生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)

前言

　　前言　　生物化學(xué)是生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物工程專業(yè)的主干課，醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)各專業(yè)的基礎(chǔ)課，是一門授課節(jié)奏快、知識信息量大，教與學(xué)難度大的必修課。生物化學(xué)實驗是培養(yǎng)學(xué)生的基本操作能力，養(yǎng)成良好的科研素質(zhì)的重要環(huán)節(jié)。隨著該學(xué)科的不斷發(fā)展，一些舊的實驗方法不斷被改進或淘汰，而新的研究方法和技術(shù)不斷涌現(xiàn)，因此非常需要一本涵蓋面較廣而又實用的實驗教材?；诖?，結(jié)合我校具體情況，在參考兄弟院校實驗教材的基礎(chǔ)上，我們編寫了這本教材?！　”緦嶒灲滩谋局鴮嵱?、夠用、適用的原則，力爭與大多數(shù)高等院校的教學(xué)實際相符。與此同時，我們精選了一些針對高年級本科生的創(chuàng)新性實驗，使得他們在進入研究生階段學(xué)習(xí)之前熟悉實驗室常用的生物化學(xué)實驗操作，加入了一些上機實驗和選作實驗，以開闊學(xué)生的視野，鍛煉其綜合能力?！　”緯譃槿蟛糠郑谝徊糠譃榛A(chǔ)實驗，包括糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素及其他小分子的內(nèi)容，其中實驗一至四由張一折老師編寫，實驗五、實驗六、實驗二十二、實驗二十六至實驗二十八以及實驗三十和實驗三十一由楊艷坤老師編寫，實驗七、實驗九至實驗十五和實驗二十五在本校生物化學(xué)基礎(chǔ)實驗講義原有基礎(chǔ)上經(jīng)張守濤老師整理編寫，實驗八、實驗十六、實驗十七、實驗二十二至實驗二十四由張守濤老師編寫，實驗十八至實驗二十一由翟明霞老師編寫，實驗三十二和實驗三十三由崔惠芳老師編寫，實驗三十四和實驗三十五由高艷鋒老師編寫。本書第二部分為綜合實驗，其中綜合實驗一在本校生物化學(xué)綜合實驗講義原有基礎(chǔ)上經(jīng)高艷鋒老師整理編寫，綜合實驗二至綜合實驗五由高艷鋒老師編寫，綜合實驗六由康巧珍老師和閆紅霞老師編寫，綜合實驗七由康巧珍老師和李杰老師編寫。第三部分是附錄，由張一折老師編寫。主編負(fù)責(zé)全書的通稿。本校的劉偉老師、陳鯉翔老師以及吳亞紅、吳宗胤、劉偉等研究生在本書的編寫過程中的前期也做了大量資料搜集及文字工作，在此表示感謝?！　”緯幷呔鶠樵诮虒W(xué)一線從事多年基礎(chǔ)生化理論與實驗教學(xué)、具有豐富工作經(jīng)驗的科技工作者，但由于編者水平有限，本書可能存在疏漏或不當(dāng)之處，敬請廣大讀者指正，以便改進?！　【幷摺　?010年10月

內(nèi)容概要

　　《生物科學(xué)生物技術(shù)系列：生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)》共分為三個部分，包括35個基礎(chǔ)實驗、7個綜合實驗，基礎(chǔ)實驗部分重在基本實驗技能的培訓(xùn)，綜合實驗部分著重對實驗原理的應(yīng)用和分析能力的提高，并且加入了研究生階段常用的生物化學(xué)實驗技術(shù)。這兩部分涵蓋了糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等物質(zhì)的分離、純化、定性或定量分析、功能和代謝的研究等。附錄部分介紹了玻璃儀器的洗滌、試劑的配制、層析技術(shù)、常見儀器的使用方法及實驗室的常用數(shù)據(jù)表等。　　《生物科學(xué)生物技術(shù)系列：生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)》可作為普通高等院校生物科學(xué)、生物技術(shù)及生物工程專業(yè)本、?？萍搬t(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等各專業(yè)的教材，也可作為研究生以及生物化學(xué)研究人員的參考用書。

書籍目錄

實驗室規(guī)則實驗記錄與實驗報告基礎(chǔ)實驗實驗一　可溶性糖的硅膠G薄層層析實驗二　糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定實驗三　葡萄糖氧化酶法測定血清葡萄糖實驗四　腎上腺素對血糖濃度的影響實驗五　脂肪的粗提取和定量測定實驗六　脂肪酸的β?氧化——酮體的生成及其測定實驗七　氨基酸的分離與鑒定——濾紙層析法實驗八　氨基移換反應(yīng)的定性鑒定實驗九　血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳實驗十　蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗十一　影響酶促反應(yīng)的因素——溫度、pH、激活劑及抑制劑實驗十二　乳酸脫氫酶酶活力測定實驗十三　紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量實驗十四　雙縮脲法測定漿總蛋白質(zhì)含量實驗十五　Folin?酚法測定血清蛋白質(zhì)含實驗十六　考馬斯亮藍(lán)染色法測定蛋白質(zhì)含量實驗十七　樣品中總氮量的測定——微量凱氏定氮法實驗十八　蛋白質(zhì)基本性質(zhì)分析與結(jié)構(gòu)預(yù)測實驗十九　小分子與蛋白質(zhì)相互作用的模擬與分析實驗二十　蛋白質(zhì)抗原T細(xì)胞表位在線預(yù)測實驗二十一　蛋白質(zhì)抗原B細(xì)胞表位預(yù)測實驗二十二　動物組織細(xì)胞基因組DNA提取實驗二十三　植物DNA的提取實驗二十四　DNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗二十五　酵母RNA的提取與地衣酚顯色測定法實驗二十六　維生素A的提取和含量測定——三氯化銻比色法實驗二十七　維生素B1含量的測定——熒光法實驗二十八　維生素B1含量的測定——質(zhì)量法實驗二十九　維生素C的定量測定（2,6?二氯酚靛酚滴定法）實驗三十　維生素C含量的測定——碘量法實驗三十一　ATP的生物合成和發(fā)光法測定含量實驗三十二　碳納米管電極定量測定維生素C實驗三十三　碳納米管電極定量測定尿酸實驗三十四　肌肽清除羥自由基活性測定實驗三十五　谷胱甘肽清除DPPH自由基活性測定……綜合實驗附錄參考文獻

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：插圖：2.裝配槍頭（吸液嘴）將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。如果是多道（如8道或12道）移液槍，則可以將移液槍的第一道對準(zhǔn)第一個槍頭，然后傾斜地插入，往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。3.移液的方法吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2～3mm。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取黏稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。（1）前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第一停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。（2）反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高黏液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸人多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點，慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第一停點排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點（千萬別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。4.移液器的正確放置使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。5.維護保養(yǎng)時的注意事項如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或60%的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。高溫消毒之前，要確保移液器能適應(yīng)高溫。

編輯推薦

《生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)》：生物科學(xué)生物技術(shù)系列，普通高等教育“十二五”規(guī)劃教材

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