植物細(xì)胞與組織研究方法

前言

　　《植物細(xì)胞與組織的研究方法》是一門(mén)理論與實(shí)踐緊密結(jié)合的實(shí)驗(yàn)生物學(xué)課程。隨著生命科學(xué)的發(fā)展以及學(xué)科間的交叉與滲透，植物細(xì)胞與組織的研究不僅是經(jīng)典植物學(xué)研究的必備技術(shù)，而且已成為現(xiàn)代遺傳學(xué)、現(xiàn)代園藝學(xué)、分子生物學(xué)、植物與微生物分子互作等研究的重要技術(shù)。為了探索積累經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)在學(xué)校生命科學(xué)學(xué)院和研究生處的支持下，我們對(duì)該課程的教學(xué)體系、教學(xué)條件、教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方法等做了相應(yīng)的調(diào)整、補(bǔ)充和改革，以全面提高研究生的實(shí)踐教學(xué)、幫助學(xué)生在理解實(shí)驗(yàn)原理的基礎(chǔ)上熟練掌握關(guān)鍵技術(shù)，培養(yǎng)學(xué)生綜合分析能力。由于形成新的教學(xué)體系和教學(xué)內(nèi)容，不少師生都向研究生處反映，希望編寫(xiě)一本既全面而又實(shí)用的研究工具書(shū)。為了滿足這一要求，我們聘請(qǐng)了在該領(lǐng)域研究上有豐富實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的專家撰寫(xiě)了這本研究生教材。　　《植物細(xì)胞與組織的研究方法》在內(nèi)容上既反映了顯微技術(shù)的較新成就，又注重切合當(dāng)前教學(xué)實(shí)際需要。書(shū)中第一篇介紹植物細(xì)胞與組織研究特別是植物制片的基本原理，從制片原理、制片過(guò)程、染色原理、染色過(guò)程等全方位進(jìn)行詳細(xì)的闡明。第二篇介紹常用的植物制片技術(shù)，既包括傳統(tǒng)的切片技術(shù)（如石蠟切片、徒手切片、半薄切片等）、非切片技術(shù)（涂壓制片、整體制片、透明制片、離析制片等），同時(shí)又介紹了植物顯微化學(xué)相關(guān)原理、技術(shù)［如細(xì)胞壁成分顯示與測(cè)定、蛋白質(zhì)顯示與測(cè)定、脂類顯示與測(cè)定、核酸（DNA）顯示與測(cè)定、糖類染色與測(cè)定等］。本書(shū)還簡(jiǎn)要介紹了部分現(xiàn)代植物生理學(xué)、遺傳學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的部分研究技術(shù)，如細(xì)胞器（葉綠體、線粒體、液泡）分離、染色、觀察技術(shù)、DNA顯色分析技術(shù)等?！　?duì)于顯微觀察、攝影方面，本書(shū)著重介紹常用的正置顯微鏡、倒置顯微鏡、體視顯微鏡、熒光顯微鏡等顯微鏡的基礎(chǔ)原理、鏡體結(jié)構(gòu)、使用操作等。介紹圖像捕獲原理及顯微拍攝軟件的使用、顯微圖像的基本處理、數(shù)據(jù)測(cè)定?！　　吨参锛?xì)胞與組織的研究方法》內(nèi)容豐富，匯集了經(jīng)典植物細(xì)胞學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及植物細(xì)胞工程中多種常用的研究方法，可供農(nóng)林院校的相關(guān)專業(yè)研究生和科學(xué)工作者參考。　　由于編者水平有限，書(shū)中難免有疏漏之處，敬請(qǐng)廣大讀者指正批評(píng)?！　【幷摺　?010年8月

內(nèi)容概要

　　植物細(xì)胞與組織研究方法是生物類、大農(nóng)學(xué)類的大學(xué)生、研究生的一門(mén)重要課程，也是一門(mén)重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。本書(shū)根據(jù)編者多年的教學(xué)、科研積累以及實(shí)驗(yàn)技能整理而成。主要介紹植物細(xì)胞與組織研究中廣泛應(yīng)用和實(shí)用的內(nèi)容和方法，包括植物制片技術(shù)（如石蠟切片、半薄切片、木材切片、徒手切片、印痕技術(shù)、離析技術(shù)、涂壓技術(shù)等）、植物組織與細(xì)胞化學(xué)、各種顯微技術(shù)（如正置顯微技術(shù)、倒置顯微技術(shù)、熒光顯微技術(shù)、體視顯微技術(shù)、顯微操作技術(shù)等）、圖像采集、圖像處理、全書(shū)圖文并茂，既系統(tǒng)地介紹了當(dāng)今植物細(xì)胞與組織的研究方法，又突出了實(shí)驗(yàn)技術(shù)要點(diǎn)。
　　本書(shū)可作為農(nóng)林院校植物生產(chǎn)類本科生、研究生各專業(yè)的參考書(shū)，亦可供綜合性大學(xué)、師范類大學(xué)生物類師生參考。
　　讀者對(duì)象:
本書(shū)可作為農(nóng)林院校植物生產(chǎn)類本科生、研究生各專業(yè)的參考書(shū)，亦可供綜合性大學(xué)、師范類大學(xué)生物類師生參考。
　　一級(jí)分類:教材
　　二級(jí)分類:十五規(guī)劃教材
　　三級(jí)分類:十五規(guī)劃教材

書(shū)籍目錄

第一篇　植物細(xì)胞與組織制片原理
　1植物制片的目的和方法
　　1.1植物制片簡(jiǎn)介
　　1.1.1植物制片目的
　　1.1.2植物制片方法
　　1.2植物制片常用儀器、用具、藥品
　　1.3植物制片一般流程
　　1.3.1一般制片
　　1.3.2石蠟/半薄切片
　　1.4植物制片相關(guān)常用技術(shù)
　　1.4.1清潔技術(shù)
　　1.4.2封邊與封片（藏）技術(shù)
　　1.4.3切片刀的磨刀技術(shù)
　2植物制片的原理
　　2.1選材
　　2.1.1材料的選擇
　　2.1.2材料的切取
　　2.2殺死、固定與保存
　　2.2.1殺死、固定與保存
　　2.2.2固定的基本原理
　　2.2.3常用的固定劑
　　2.2.4固定操作注意事項(xiàng)
　　2.3洗滌
　　2.3.1洗滌的作用
　　2.3.2洗滌的方法
　　2.4脫水劑與脫水
　　2.4.1脫水
　　2.4.2常用的脫水劑
　　2.5透明劑與透明
　　2.5.1透明的作用
　　2.5.2常用的透明劑
　　2.6制片
　　2.7染色劑與染色
　　2.7.1染色的發(fā)現(xiàn)與染色原理
　　2.7.2染色劑的概念與性質(zhì)
　　2.7.3染色劑的種類
　　2.8封固與封固劑
　　2.8.1水溶性封固劑
　　2.8.2糖漿封固劑
　　2.8.3樹(shù)脂性封固劑
　　2.8.4其它封固劑
　3常用染色劑及染色方法
　　3.1常用染色劑
　　3.1.1蘇木精（Haematoxylin）
　　3.1.2洋紅（Carmine）
　　3.1.3番紅O（Safranin Y或afranin A）
　　3.1.4亮綠（Light Green）
　 3.1.5固綠（Fast green）
　 3.1.6孔雀綠（Malachite Green）
　　3.1.7甲基綠（Methyl Green）
　　3.1.8碘綠（Iodine Green）
　　3.1.9結(jié)晶紫（Crystal Violet）
　　3.1.10橘紅G（Orange G）
　　3.1.11曙紅（Eosin）
　 3.1.12真曙紅（Erythrosin）
　 3.1.13中性紅（Neutral red）
　　3.1.14酸性品紅（復(fù)紅）（Acid fuchsin）
　　3.1.15堿性品紅（復(fù)紅）（Basic Fuchsin）
　　3.1.16剛果紅（Congo Red）
　　3.1.17甲苯胺藍(lán)（Toluidine blue）
　　3.1.18甲基藍(lán)（Methyl blue）
　　3.1.19亞甲基藍(lán)（Methylene Blue trihydrate）
　　3.1.20蘇丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）
　　3.1.21蘇丹Ⅳ（Sudan Ⅳ）
　　3.1.22苯胺藍(lán)（Cotton Blue）
　　3.1.23地衣紅（Orcein）
　　3.1.24天青石蘭（Celestine Blue）
　　3.1.25苦味酸（Picric Acid）
　　3.1.26俾斯麥棕（Basic Brown）
　　3.1.27玫瑰紅（Rhodamine）
　　3.1.28詹納斯綠（Janus Green）
　　3.1.29紅四氮唑（2，3，5.Triphenyltetra.zolium chloride）
第二篇　植物細(xì)胞與組織制片方法
　4石蠟切片法
　5半薄切片技術(shù)
　6非切片制片
　7植物細(xì)胞與組織顯微測(cè)定
　8其它切片技術(shù)
第三篇　顯微鏡與顯微技術(shù)
　9顯微鏡簡(jiǎn)介
　10常用顯微鏡
　11顯微圖像捕獲及處理
附錄
參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

　　人類對(duì)于植物的研究發(fā)展至今，己從對(duì)于植物整體、根、莖、葉、花、果實(shí)等宏觀形態(tài)、器官的觀察、研究，經(jīng)過(guò)植物的組織、細(xì)胞水平的研究，發(fā)展至現(xiàn)代分子水平的研究。對(duì)于組織、細(xì)胞及更深入的結(jié)構(gòu)層次，絕大部分自然狀態(tài)的植物材料并不能夠直接用于研究操作、進(jìn)一步的微觀研究。要對(duì)植物微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究（器官解剖觀察、花芽分化、授粉受精、貯藏營(yíng)養(yǎng)規(guī)則、染色體觀察等），就必須將原先體積大、透明性差的植物材料進(jìn)行特殊的處理，使其體積變小、厚度變薄、透光性增強(qiáng)而能夠有可能用于顯微觀察。在進(jìn)行顯微觀察時(shí)，如何區(qū)分生活或死亡的組織與細(xì)胞的不同顯微結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、各類細(xì)胞器、染色體）、同一顯微結(jié)構(gòu)的不同組成成分（纖維素、果膠、蛋白質(zhì)、糖類等）以及如何對(duì)某一具體的結(jié)構(gòu)、成分進(jìn)行特定觀察，則需要對(duì)樣品材料進(jìn)行不同的染色處理，使各結(jié)構(gòu)、成分吸附特定染料或發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而呈現(xiàn)不同顏色，進(jìn)行區(qū)分?！　≈参镏破褪且獙⑤^大的、不透明的、難于進(jìn)行顯微觀察的植物材料進(jìn)行各種特定處理，使其成為可以在顯微境下觀察的、小而薄、完整透明、可明顯區(qū)分不同結(jié)構(gòu)和成分而又保持原先結(jié)構(gòu)、狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)材料?！　　?/pre>








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