細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方案

前言

細(xì)胞生物學(xué)成為迅猛發(fā)展的學(xué)科得益于持續(xù)的技術(shù)進(jìn)步。我們?cè)噲D編纂一部令人興奮、又有廣泛用途的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)書籍，使其包括屢試不爽的實(shí)驗(yàn)方法又有新近建立的技術(shù)方案。因此，本書包含了現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)各方面實(shí)用的常規(guī)和時(shí)新實(shí)驗(yàn)方案。本書首先介紹了基本光學(xué)顯微鏡技術(shù)，繼之介紹用于投射顯微鏡研究的不同細(xì)胞、亞細(xì)胞和生物大分子標(biāo)本制備的基本技術(shù)。后續(xù)一章涉及到細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞分離技術(shù)。這些技術(shù)廣泛地用于為細(xì)胞研究提供初始的實(shí)驗(yàn)材料。此后兩章是本書的主要內(nèi)容，介紹了不少用于研究亞細(xì)胞的細(xì)胞器和分離細(xì)胞膜組分的技術(shù)。再下一章中，包括了44個(gè)用于體外研究的特殊技術(shù)和細(xì)胞生物學(xué)的綜合技術(shù)，每項(xiàng)技術(shù)均由該領(lǐng)域的知名專家提供。最后在參考數(shù)據(jù)一章中提供有關(guān)化學(xué)品安全、離心和放射性同位素方面的有用信息。本書具有很強(qiáng)的實(shí)用性，對(duì)不同層次的從事細(xì)胞生物學(xué)的研究者均具有指導(dǎo)意義。

內(nèi)容概要

近年來(lái)，細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域取得了迅速的發(fā)展和進(jìn)步。細(xì)胞生物學(xué)工作者對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的需求日益增長(zhǎng)，其中的許多技術(shù)也適用于分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)。本書收錄了許多很實(shí)用的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方案，具體表現(xiàn)在：     實(shí)驗(yàn)方案涵蓋了光學(xué)顯微術(shù)、電子顯微術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞分離、細(xì)胞器的分離和功能分析、組織和膜分離以及體外實(shí)驗(yàn)技術(shù)；     許多實(shí)驗(yàn)方案都提供了有用的“注釋”和“安全措施”，便于操作； 附錄部分則收錄了對(duì)于細(xì)胞生物學(xué)工作者來(lái)說(shuō)非常有價(jià)值的生物學(xué)參考數(shù)據(jù)。     本書可供細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)、基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué)等領(lǐng)域的研究生、高年級(jí)本科生及其他研究人員閱讀參考。

作者簡(jiǎn)介

譯者：呂社民 李冬民 孟列素 等 編者：(德國(guó))J.R.哈里斯(J.Robin Harris) (英國(guó))J.格雷厄姆(John Graham) (英國(guó))D.賴克伍德(David Rickwood)

書籍目錄

1　光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)　1.1　簡(jiǎn)介　1.2　復(fù)式顯微鏡的關(guān)鍵部件　1.3　顯微鏡使用技術(shù)　1.4　樣本的準(zhǔn)備和染色　參考文獻(xiàn)2　電子顯微鏡基礎(chǔ)　2.1　簡(jiǎn)介　2.2　可用的電子顯微鏡方法　致謝　參考文獻(xiàn)3　細(xì)胞培養(yǎng)　3.1　細(xì)胞：分離和分析　3.2　機(jī)械法分離組織　3.3　從體液中分離細(xì)胞　3.4　去除紅細(xì)胞　3.5　細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力 　3.6　細(xì)胞培養(yǎng)的用途　3.7　冷藏　3.8　外周血單核細(xì)胞的分離4　細(xì)胞器的分離與功能分析　4.1　簡(jiǎn)介　4.2　勻漿化　4.3　差速離心　4.4　密度梯度離心　4.5　細(xì)胞核及核組分　4.6　線粒體　4.7　溶酶體　4.8　過(guò)氧化物酶體　4.9　粗面與光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)　4.10　高爾基膜　4.11　質(zhì)膜　4.12　葉綠體（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)方案4.30）5　在跨膜運(yùn)輸和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究中使用的亞細(xì)胞膜的分級(jí)分離方法6　體外實(shí)驗(yàn)技術(shù)7　細(xì)胞和分子生物學(xué)參考數(shù)據(jù)索引

章節(jié)摘錄

插圖：1 光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)1.1 簡(jiǎn)介對(duì)于細(xì)胞與分子生物學(xué)家來(lái)說(shuō)，不管是在活著的還是固定的細(xì)胞中研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其生物進(jìn)程，光學(xué)顯微鏡都是一項(xiàng)不可替代的技術(shù)。本章概述了光學(xué)顯微術(shù)，描述了重要的光鏡部件，進(jìn)一步介紹了在明視野和相差顯微鏡中，如何調(diào)定符合研究標(biāo)準(zhǔn)的光學(xué)顯微鏡。還有一小部分是有關(guān)共聚焦顯微鏡的。對(duì)不同形式光鏡的更詳細(xì)的描述可見(jiàn)于其他文獻(xiàn)。顯微鏡是一種可以讓標(biāo)本產(chǎn)生放大圖像的儀器。目鏡和物鏡是光鏡放大系統(tǒng)的主要組成部分，這兩者的放大倍數(shù)的乘積就是顯微鏡的總放大倍數(shù)。而放大標(biāo)本的可見(jiàn)度主要取決于對(duì)比度和分辨率。對(duì)比度就是物體和其背景間的光密度差異。一些生物標(biāo)本內(nèi)存在有色化合物，如著色的動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞中含有葉綠素的葉綠體，但是，大部分生物標(biāo)本都是無(wú)色的，在觀察前必須要固定和染色。明視野顯微鏡術(shù)就是用來(lái)觀察這些染色標(biāo)本。

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