生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)

內(nèi)容概要

本書共分三篇，分別是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及基本操作、基本生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)、實(shí)驗(yàn)部分。在第二篇中，特別對(duì)基本生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)理論進(jìn)行了較詳實(shí)的介紹，以期使用者能夠掌握生化實(shí)驗(yàn)的背景和原理，在做實(shí)驗(yàn)的同時(shí)使自己的專業(yè)理論水平真正得到提高。在第三篇中，特別注意編排的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的全面性，廣泛選取了生化實(shí)驗(yàn)中較為成熟的糖類、脂類、氨基酸和蛋白質(zhì)類、核酸類、酶類、維生素類和代謝類實(shí)驗(yàn)，以及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，因此本書可以作為一本實(shí)用的生化實(shí)驗(yàn)手冊(cè)使用。    本書可作為高等院校動(dòng)物科學(xué)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)、發(fā)酵工程、衛(wèi)生檢驗(yàn)、生物技術(shù)、化工、環(huán)保等專業(yè)的實(shí)驗(yàn)教材，也可供相關(guān)專業(yè)的學(xué)生、教師和科技工作者參考。

書籍目錄

第一篇  生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及基本操作  1  實(shí)驗(yàn)室規(guī)則  2  預(yù)習(xí)報(bào)告要求  3  實(shí)驗(yàn)記錄要求  4  實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫要求及參考格式    4.1  實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式    4.2  實(shí)驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容    4.3  實(shí)驗(yàn)結(jié)果  5  儀器的清洗與清潔    5.1  初用玻璃儀器的清洗    5.2  使用過的玻璃儀器的清洗    5.3  石英和玻璃比色皿的清洗    5.4  塑料器皿的清洗    5.5  玻璃和塑料器皿的干燥  6  清洗液的配制及使用    6.1  鉻酸洗液的配制    6.2  其他洗滌液  7  移液器的種類和使用    7.1  滴管    7.2  移液管（吸管）    7.3  微量進(jìn)樣器    7.4  自動(dòng)取液器  8  定量容器的種類和使用    8.1  量筒、量杯    8.2  容量瓶  9  溶液的混勻    9.1  攪拌    9.2  旋轉(zhuǎn)    9.3  彈打  10  實(shí)驗(yàn)室意外情況及處理措施    10.1  著火    10.2  爆炸    10.3  中毒    10.4  外傷    10.5  觸電第二篇  基本生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)  1  分光光度技術(shù)    1.1  紫外和可見光光譜    1.2  熒光光度分析    1.3  原子吸收光譜  2  電泳技術(shù)    2.1  電泳技術(shù)總論    2.2  紙電泳和乙酸纖維薄膜電泳    2.3  聚丙烯酰胺凝膠電泳    2.4  瓊脂糖凝膠電泳    2.5  免疫電泳    2.6  等電聚焦電泳    2.7  毛細(xì)管電泳    2.8  電泳結(jié)果處理  3  色譜技術(shù)    3.1  色譜技術(shù)概述    3.2  凝膠色譜    3.3  離子交換色譜    3.4  親和色譜    3.5  具體的一些色譜方法    3.6  高效液相色譜  4  PCR技術(shù)    4.1  PCR基本原理    4.2  PCR的基本過程    4.3  PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)要點(diǎn)    4.4  提高PCR擴(kuò)增特異性  5  膜分離技術(shù)    5.1  透析    5.2  超濾  6  免疫技術(shù)——酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）    6.1  原理    6.2  操作要點(diǎn)  7  生物大分子制備技術(shù)    7.1  概述    7.2  生物大分子制備的前處理    7.3  生物大分子的分離純化    7.4  樣品的保存第三篇  實(shí)驗(yàn)部分第一部分  糖類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)一  還原糖和總糖的測(cè)定（3，5-二硝基水楊酸法）  實(shí)驗(yàn)二  可溶性總糖的蒽酮比色法測(cè)定  實(shí)驗(yàn)三  費(fèi)林試劑法測(cè)定總糖  實(shí)驗(yàn)四  磷鉬酸比色法測(cè)定血糖  實(shí)驗(yàn)五  黏多糖——肝素鈉效價(jià)的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)六  淀粉的提取及性質(zhì)實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)七  淀粉與纖維素的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)八  肝糖原的提取及鑒定  實(shí)驗(yàn)九  果膠的提取與膠凍的制備  實(shí)驗(yàn)十  可溶性糖的硅膠G薄層色譜  實(shí)驗(yàn)十一  糖的聚酰胺薄層色譜  實(shí)驗(yàn)十二  細(xì)菌細(xì)胞壁糖的薄層色譜  實(shí)驗(yàn)十三  葡萄糖-1-磷酸的制備及其純度的測(cè)定第二部分  脂類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)十四  脂肪的堿水解及組分鑒定  實(shí)驗(yàn)十五  粗脂肪的定量測(cè)定——索氏抽提法  實(shí)驗(yàn)十六  皂化值的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)十七  酸值的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)十八  碘值的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)十九  卵磷脂的提取及鑒定  實(shí)驗(yàn)二十  磷硫鐵法測(cè)定血清膽固醇  實(shí)驗(yàn)二十一  分光光度法測(cè)定膽紅素（改良J-G法）  實(shí)驗(yàn)二十二  紅細(xì)胞膜的制備及其成分分析（磷脂、膽固醇）第三部分  氨基酸和蛋白質(zhì)類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)二十三  氨基酸的紙色譜  實(shí)驗(yàn)二十四  薄層色譜法分離氨基酸  實(shí)驗(yàn)二十五  甲醛滴定法測(cè)定氨基酸  實(shí)驗(yàn)二十六  華勃氏呼吸計(jì)法測(cè)定L-谷氨酸  實(shí)驗(yàn)二十七  旋光法測(cè)定谷氨酸  實(shí)驗(yàn)二十八  蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)、顏色反應(yīng)、兩性反應(yīng)、電荷及等電點(diǎn)的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)二十九  粗蛋白的定量測(cè)定——微量凱氏定氮法  實(shí)驗(yàn)三十  紫外光吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量  實(shí)驗(yàn)三十一  雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量  實(shí)驗(yàn)三十二  考馬斯亮藍(lán)G-250法（Bradford法）測(cè)定蛋白質(zhì)含量  實(shí)驗(yàn)三十三  Fo1in-酚試劑法（Lowry法）測(cè)定蛋白質(zhì)  實(shí)驗(yàn)三十四  尿素對(duì)蛋白質(zhì)的變性作用  實(shí)驗(yàn)三十五  蛋白質(zhì)DNS分析法（DNS-C1膜色譜技術(shù)）  實(shí)驗(yàn)三十六  乙酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)  實(shí)驗(yàn)三十七  垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)  實(shí)驗(yàn)三十八  等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)  實(shí)驗(yàn)三十九  SDS-PAGE電泳測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量  實(shí)驗(yàn)四十  凝膠色譜法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量  實(shí)驗(yàn)四十一  酪蛋白的提取  實(shí)驗(yàn)四十二  植物葉蛋白的提取  實(shí)驗(yàn)四十三  細(xì)胞色素C的制備及其測(cè)定第四部分  核酸類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)四十四  質(zhì)粒DNA的堿裂解法提取與純化  實(shí)驗(yàn)四十五  植物組織中核酸的提取和測(cè)定  實(shí)驗(yàn)四十六  酵母RNA的分離與組分鑒定  實(shí)驗(yàn)四十七  DNA的瓊脂糖凝膠電泳  實(shí)驗(yàn)四十八  RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳  實(shí)驗(yàn)四十九  DNA重組  實(shí)驗(yàn)五十  PCR聚合酶擴(kuò)增DNA  實(shí)驗(yàn)五十一  逆轉(zhuǎn)錄聚合酶（PCR）鏈反應(yīng)第五部分  酶類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)五十二  過氧化氫酶和過氧化物酶的作用  實(shí)驗(yàn)五十三  溫度、pH、激活劑和抑制劑對(duì)唾液淀粉酶活性的影響  實(shí)驗(yàn)五十四  大麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較  實(shí)驗(yàn)五十五  枯草桿菌蛋白酶活力的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)五十六  轉(zhuǎn)氨酶GPT、GOT活性的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)五十七  脲酶的動(dòng)力學(xué)研究  實(shí)驗(yàn)五十八  糖化型淀粉酶活力的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)五十九  蛋清溶菌酶的制備及活力測(cè)定  實(shí)驗(yàn)六十  正交法測(cè)定對(duì)酶活力影響的幾種因素  實(shí)驗(yàn)六十一  堿性磷酸酶的分離與純化  實(shí)驗(yàn)六十二  結(jié)晶乳酸脫氫酶（LDH）的制備  實(shí)驗(yàn)六十三  琥珀酸脫氫酶的活性測(cè)定及丙二酸的抑制作用  實(shí)驗(yàn)六十四  辣根過氧化物酶的制備及酶比活力的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)六十五  發(fā)色底物測(cè)定大曲中α-葡萄糖苷酶活力  實(shí)驗(yàn)六十六  酵母蔗糖酶的純化及性質(zhì)研究  實(shí)驗(yàn)六十七  固定化酵母細(xì)胞及蔗糖酶的檢測(cè)  實(shí)驗(yàn)六十八  親和色譜法純化胰蛋白酶第六部分  維生素類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)六十九  維生素A的測(cè)定（三氯化銻比色法）  實(shí)驗(yàn)七十  還原型維生素C的測(cè)定  實(shí)驗(yàn)七十一  總維生素C的測(cè)定——2，4-二硝基苯肼比色法  實(shí)驗(yàn)七十二  熒光法測(cè)定維生素B2（核黃素）  實(shí)驗(yàn)七十三  高效液相色譜法測(cè)定脂溶性維生素第七部分  代謝類實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)七十四  肌糖原的酵解作用  實(shí)驗(yàn)七十五  發(fā)酵過程中無機(jī)磷的利用  實(shí)驗(yàn)七十六  糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定  實(shí)驗(yàn)七十七  氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)的定性鑒定  實(shí)驗(yàn)七十八  脂肪酸的β-氧化第八部分  其他實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)七十九  辛酸一硫酸銨法從人血清中純化免疫球蛋白（IgG）  實(shí)驗(yàn)八十  免疫電泳技術(shù)  實(shí)驗(yàn)八十一  ELISA法測(cè)定單克隆抗體的效價(jià)    實(shí)驗(yàn)八十二  分光光度法測(cè)定葉綠素含量附錄  附錄1  一些常用化合物的溶解度（20℃）  附錄2  酸、堿溶液的配制  附錄3  常用酸堿體積分?jǐn)?shù)、相對(duì)密度和物質(zhì)的量濃度的關(guān)系  附錄4  某些有機(jī)溶劑的主要物理常數(shù)  附錄5  一些常用酸堿指示劑  附錄6  混合指示劑  附錄7  氧化還原染料  附錄8  染料和熒光標(biāo)準(zhǔn)試劑  附錄9  生物發(fā)色團(tuán)  附錄10  某些重要生化物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)  附錄11  氨基酸的一些物理常數(shù)  附錄12  元素的相對(duì)原子質(zhì)量表  附錄13  調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計(jì)算表（25℃）  附錄14  調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計(jì)算表（0℃）  附錄15  氣體干燥劑  附錄16  液體干燥劑  附錄17  易變質(zhì)及需要特殊方法保存的試劑  附錄18  冷卻劑  附錄19  常用緩沖溶液的配制參考書目

章節(jié)摘錄

第一篇 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及基本操作1 實(shí)驗(yàn)室規(guī)則（1）每位同學(xué)應(yīng)自覺遵守課堂紀(jì)律，維護(hù)課堂秩序，不遲到，不早退，不大聲談笑。（2）實(shí)驗(yàn)前須認(rèn)真預(yù)習(xí)，熟悉實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、操作步驟，懂得每一操作步驟的意義，并了解所用儀器的使用方法，否則不能開始實(shí)驗(yàn)。（3）實(shí)驗(yàn)過程中要聽從教師的指導(dǎo)，嚴(yán)肅認(rèn)真地按照操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并把實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)及時(shí)、如實(shí)記錄在實(shí)驗(yàn)記錄本上，文字要簡(jiǎn)練、準(zhǔn)確。完成實(shí)驗(yàn)后經(jīng)教師檢查同意，方可離開實(shí)驗(yàn)室。（4）實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)隨時(shí)保持整潔，儀器、藥品擺放整齊。公用試劑用完后，應(yīng)立即蓋嚴(yán)放回原處。勿使試劑、藥品灑在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地上。實(shí)驗(yàn)完畢，儀器洗凈放好，將實(shí)驗(yàn)臺(tái)面抹拭干凈，才能離開實(shí)驗(yàn)室。（5）使用儀器、藥品、試劑和各物品必須注意節(jié)約；洗滌和使用儀器時(shí)，應(yīng)小心仔細(xì)，防止損壞儀器；使用貴重精密儀器時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，發(fā)現(xiàn)故障須立即報(bào)告教師，不得擅自動(dòng)手檢修。（6）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙！加熱用的電爐應(yīng)隨用隨關(guān)，嚴(yán)格做到：人在爐火在，瓜走爐火關(guān)。乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能直接加熱，并要遠(yuǎn)離火源操作和放置。實(shí)驗(yàn)完畢：后應(yīng)立即拔去電爐開關(guān)，關(guān)好水龍頭并拉下電閘。離開實(shí)驗(yàn)室以前應(yīng)認(rèn)真、負(fù)責(zé)地檢查水電，嚴(yán)防發(fā)生安全事故。（7）廢液可倒入水槽內(nèi)，同時(shí)放水沖走。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液必須先用水稀釋。廢紙屑及其他固體廢物和帶渣滓的廢物倒入廢品缸內(nèi)，不可倒入水槽或到處亂扔。（8）要精心使用和愛護(hù)儀器，如使用分光光度計(jì)時(shí)，不能將比色皿直接置于分光光度計(jì)上，并注意拿放比色皿時(shí)，不要打碎。儀器損壞時(shí)，應(yīng)如實(shí)向教師報(bào)告，并填寫損壞儀器登記表，然后補(bǔ)領(lǐng)。（9）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一切物品，未經(jīng)本室負(fù)責(zé)教師批準(zhǔn)，嚴(yán)禁帶出室外，借物必須辦理登記手續(xù)。（10）每次實(shí)驗(yàn)課由班長或課代表負(fù)責(zé)安排值日生。值日生的職責(zé)是負(fù)責(zé)當(dāng)天實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生、安全、組織同學(xué)填寫實(shí)驗(yàn)室登記本等一切服務(wù)性的工作。

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《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》由化學(xué)工業(yè)出版社出版。

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