細(xì)胞生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南

前言

伴隨符細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等學(xué)科的迅猛發(fā)展，以及計(jì)算機(jī)、網(wǎng)絡(luò)信息等島新技術(shù)的普遍應(yīng)用，生命科學(xué)研究的進(jìn)展突飛猛進(jìn)。作為生命科學(xué)主要分支的細(xì)胞工程及生物技術(shù)·將為解決人類面臨的重大問(wèn)題，如糧食、健康、環(huán)境、能源等方而存的問(wèn)題，提供一個(gè)瀅有力的工具，因而具有廣闊的發(fā)展前景，被認(rèn)為是21世紀(jì)科學(xué)T程技術(shù)重要的核心之一。目前，細(xì)胞工程及生物技術(shù)最活躍的應(yīng)用領(lǐng)域是生物醫(yī)藥行業(yè)，世界各國(guó)均把生物醫(yī)藥行業(yè)視為最具潛力的戰(zhàn)略產(chǎn)業(yè)，紛紛投入巨額資金，進(jìn)行相戈產(chǎn)船與技術(shù)的開發(fā)，井匕逐步形成一個(gè)巨大的高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)，產(chǎn)生了巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。從本質(zhì)上講，生物技術(shù)的突破引發(fā)r細(xì)胞學(xué)研究乃至生命科學(xué)及醫(yī)學(xué)革命，日新月異的生物技術(shù)的誕生有力地推動(dòng)著這一高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)的飛速發(fā)展?？寺⊙颉岸嗬颉钡呐嘤晒?，將治療性克隆研究推向一個(gè)新高潮，為糖尿病、脊椎損傷和先天性免疫缺乏癥等現(xiàn)代醫(yī)學(xué)難以根治的疾病的解決帶來(lái)了新的希螺；干細(xì)胞研究的重大進(jìn)展，使得人類在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)現(xiàn)培育人造器官的夢(mèng)想不冉遙遠(yuǎn)。這些激動(dòng)人心的科學(xué)實(shí)驗(yàn)都足技術(shù)推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步的最好證明。一個(gè)新學(xué)科、新領(lǐng)域的誕生、發(fā)展以至于完善有賴于實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的創(chuàng)新與升華，如果沒(méi)有先進(jìn)成熟的技術(shù)，沒(méi)有認(rèn)真規(guī)范的操作，沒(méi)有嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)的判斷依據(jù)，沒(méi)有重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法，就難以獲得可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果+也就無(wú)法得出令人信服的結(jié)論，對(duì)人類社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展做出貢獻(xiàn)電就無(wú)從談起。

內(nèi)容概要

本書著重精選細(xì)胞工程和生物技術(shù)領(lǐng)域常用的技術(shù)方法和實(shí)驗(yàn)方案，以實(shí)用性強(qiáng)、重復(fù)性好為基準(zhǔn)，并兼顧實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段的先進(jìn)性；以可操作規(guī)范化為目的，理論聯(lián)系實(shí)際，盡可能收集整理目前國(guó)際通行的先進(jìn)技術(shù)方法，并對(duì)該領(lǐng)域的具有重大意義的新技術(shù)作了簡(jiǎn)明扼要、深入淺出的推薦。    本書不僅介紹常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和問(wèn)題解決指南，同時(shí)提供特殊細(xì)胞(如干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等)的分離、純化和培養(yǎng)手段；既保留細(xì)胞實(shí)驗(yàn)指南類叢書的實(shí)用性特點(diǎn)，又兼顧生物技術(shù)高速發(fā)展和迅速更新的要求，有目的地引入基因和蛋白芯片檢測(cè)、RNA干擾、基因治療病毒載體、細(xì)胞核移植、干細(xì)胞等前沿技術(shù)。    每一種主要的技術(shù)方法均從基本原理入手，以儀器設(shè)備和試劑、操作方法與結(jié)果分析、實(shí)驗(yàn)技巧及注意事項(xiàng)等為重點(diǎn)逐一闡述，以期為從事細(xì)胞工程、生物技術(shù)、醫(yī)藥衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)、食品等生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究人員、技術(shù)操作人員以及大中專高校師生，提供一本前瞻性、重復(fù)性、可操作性兼?zhèn)涞膶?shí)驗(yàn)技術(shù)指南。    本書適用于上述相關(guān)行業(yè)的人員在實(shí)驗(yàn)中和課題設(shè)計(jì)時(shí)參考。

作者簡(jiǎn)介

刁勇，博士，原籍山東鄆城，教育部分子藥物工程研究中心總工程師，華僑大學(xué)分子藥物學(xué)研究所副所長(zhǎng)、教授、博士生導(dǎo)師。第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)學(xué)士，南京市有突出貢獻(xiàn)的中青年專家。主要從事新藥研究與開發(fā)，以及化學(xué)藥、中藥和生物制品等藥品的生產(chǎn)與管理。曾獲得國(guó)這０有科技進(jìn)

書籍目錄

第一章　細(xì)胞與生物技術(shù)基礎(chǔ)　第一節(jié)　細(xì)胞生物學(xué)　　一、細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容與現(xiàn)狀　　二、細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展史　　三、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)　第二節(jié)　細(xì)胞分子生物學(xué)　　一、細(xì)胞分子生物學(xué)的發(fā)展　　二、細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)　第三節(jié)　細(xì)胞工程　　一、基本概念　　二、細(xì)胞工程的發(fā)展進(jìn)程　　三、細(xì)胞工程技術(shù)　　四、展望第二章　細(xì)胞顯微觀測(cè)技術(shù)　第一節(jié)　細(xì)胞顯微技術(shù)　　一、光學(xué)顯微鏡　　二、電子顯微鏡　　三、掃描探針顯微鏡　第二節(jié)　細(xì)胞超微標(biāo)記示蹤技術(shù)　　一、電鏡細(xì)胞化學(xué)　　二、免疫電鏡技術(shù)　　三、電鏡原位雜交技術(shù)第三章　細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)　第一節(jié)　流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)　　一、流式細(xì)胞儀的工作原理和基本操作　　二、流式細(xì)胞術(shù)樣品制備技術(shù)　　三、細(xì)胞免疫熒光染色技術(shù)　　四、細(xì)胞分選技求　第二節(jié)　細(xì)胞化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)　　一、細(xì)胞化學(xué)　　二、免疫細(xì)胞化學(xué)　第三節(jié)　細(xì)胞增殖與凋亡　　一、細(xì)胞增殖　　二、細(xì)胞凋亡   第四章　細(xì)胞的培養(yǎng)與分離技術(shù)  第一節(jié)　細(xì)胞培養(yǎng)基本方法和技術(shù)    一、細(xì)胞的原代培養(yǎng)    二、細(xì)胞的傳代培養(yǎng)    三、細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇    四、細(xì)胞計(jì)數(shù)與成活率檢測(cè)    五、培養(yǎng)物污染的判斷及防止　第二節(jié)　幾種特殊細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    一、神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    二、肝細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    三、星狀細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    四、上皮細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    五、內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)與分離    六、腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與分離第五章　細(xì)胞器的分離與制備技術(shù)　第一節(jié)　細(xì)胞膜    一、從懸浮細(xì)胞中制備細(xì)胞膜    二、從組織培養(yǎng)皿中的匯合或部分匯合細(xì)胞中分離頂層膜、基底膜或中間膜    三、從生長(zhǎng)于微載體上的細(xì)胞中分離細(xì)胞膜　第二節(jié)　橋粒    一、從牛舌或牛口鼻部分離橋粒    二、分級(jí)分離橋?！〉谌?jié)　細(xì)胞質(zhì)　    一、網(wǎng)織紅細(xì)胞和紅細(xì)胞胞質(zhì)液的制備    二、用培養(yǎng)細(xì)胞制備胞質(zhì)液　第四節(jié)　線粒體  　一、從肝臟中分離線粒體　  二、從組織培養(yǎng)細(xì)胞中分離線粒體　第五節(jié)　高爾基體    一、從大鼠肝臟中分離高爾基復(fù)合體    二、從培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離高爾基體　第六節(jié)　粗微體  　一、從狗的胰臟中制備粗微體  　二、從組織培養(yǎng)細(xì)胞中制備粗微體　第七節(jié)　核糖體　第八節(jié)　細(xì)胞核  　一、從肝臟組織中制備細(xì)胞核  　  二、用滲透速溶脹法從HeLa細(xì)胞懸浮培養(yǎng)物中制備細(xì)胞核　  三、活化劑裂解方法從懸浮培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞中制備細(xì)胞核　……第六章　細(xì)胞的誘導(dǎo)分化技術(shù)第七章　干細(xì)胞分享與培養(yǎng)技術(shù)第八章　細(xì)胞內(nèi)基因的導(dǎo)入第九章　哺乳動(dòng)物細(xì)胞RNAi技術(shù)第十章　細(xì)胞內(nèi)基因的檢測(cè)第十一章　染色體檢測(cè)技術(shù)第十二章　細(xì)胞信號(hào)通路的檢測(cè)方法第十三章　細(xì)胞與重組病毒載體的生產(chǎn)第十四章　細(xì)胞融合與單克隆抗體第十五章　治療性克隆技術(shù)第十六章　細(xì)胞生物技術(shù)的應(yīng)用參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

第一章 細(xì)胞與生物技術(shù)基礎(chǔ)王 曉  施偉杰  許瑞安第一節(jié)細(xì)胞生物學(xué)一、細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容與現(xiàn)狀1．細(xì)胞及細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)的基本單位。細(xì)胞的重大生命活動(dòng)如增艮、分化、衰老和凋亡是生命體賴以存在的基礎(chǔ)，也是研究與控制動(dòng)植物生艮、發(fā)育、人類疾?。ㄓ绕涫悄[瘤）發(fā)生以及衰老的產(chǎn)生與延緩等過(guò)程的基礎(chǔ)。細(xì)胞學(xué)是研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、形態(tài)、生理功能及生活史的科學(xué)。現(xiàn)代細(xì)胞學(xué)是隨著細(xì)胞體外培養(yǎng)的實(shí)施及包括分子生物學(xué)技術(shù)在內(nèi)的物理、化學(xué)等方面技術(shù)的完善，推動(dòng)了生物學(xué)在細(xì)胞、分子水平上的研究日益成為學(xué)科研究的主要方向，因而誕生了細(xì)胞生物學(xué)這一生命科學(xué)領(lǐng)域中最活躍、最富有發(fā)展前景的分支科學(xué)。細(xì)胞生物學(xué)是研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能、生活史以及細(xì)胞生命活動(dòng)的科學(xué)，它在不同層次上以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、增殖、分化、衰老與凋亡、信號(hào)傳遞、基因表達(dá)與調(diào)控、起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容，是生命科學(xué)和分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，是一門蓬勃發(fā)展的新興學(xué)科，它的研究?jī)?nèi)容和范疇義與生命科學(xué)的其他學(xué)科相互交匯、相互滲透。2．細(xì)胞生物學(xué)研究對(duì)象和任務(wù)細(xì)胞生物學(xué)以細(xì)胞為研究對(duì)象，進(jìn)而揭示其生物科學(xué)的本質(zhì)。其研究的任務(wù)是多方面的，應(yīng)采取分析與綜合相結(jié)合的方法，從細(xì)胞整體、亞顯微結(jié)構(gòu)以及分子三個(gè)不同的層次將細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能有機(jī)結(jié)合并進(jìn)行探討。研究理論問(wèn)題與解決實(shí)際問(wèn)題斤舉。運(yùn)用現(xiàn)代新工具、新技術(shù)、新方法揭示細(xì)胞內(nèi)的亞顯微與分子結(jié)構(gòu)，以及細(xì)胞生命活動(dòng)的變化規(guī)律、內(nèi)在聯(lián)系及其功能與應(yīng)用。

編輯推薦

《細(xì)胞生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南》由化學(xué)工業(yè)出版社出版。

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