親和色譜方法及應(yīng)用

前言

　　親和色譜是液相色譜的一個(gè)分支，主要用于生物分子的分離、純化和分析?！　∮H和色譜主要依據(jù)生成具有“鎖?匙”結(jié)構(gòu)特征的絡(luò)合物，利用分子識(shí)別的特異功能，來(lái)實(shí)現(xiàn)生物分子的特效性分離。本書(shū)試圖對(duì)親和色譜近50年的發(fā)展概況進(jìn)行扼要的介紹，全書(shū)共分13章?！　〉谝徽掠H和色譜法基礎(chǔ)，介紹了親和色譜方法的特點(diǎn)、親和色譜的發(fā)展史和基本理論；重點(diǎn)闡述鎖?匙絡(luò)合物的化學(xué)平衡、親和吸附等溫線和吸附與解吸的動(dòng)力學(xué)、質(zhì)量平衡的數(shù)學(xué)模型。　　第二章流動(dòng)相，對(duì)親和色譜中流動(dòng)相的組成，Good’s緩沖物和洗脫方法做了較詳細(xì)的介紹。　　第三章和第四章對(duì)應(yīng)固定相（一）和固定相（二），對(duì)構(gòu)成親和固定相的載體的組成、活化方法；間隔臂的構(gòu)成及偶聯(lián)方法；配位體的類(lèi)型、鍵合容量及鍵合方式做了全面的介紹?！　〉谖?、第六、第七章對(duì)應(yīng)生物特效配位體（一）、生物特效配位體（二）和生物特效配位體（三），重點(diǎn)介紹了生物特效配位體涉及的核酸、蛋白質(zhì)、酶、維生素、輔酶、外源凝集素、糖、抗體和抗原、親和素?生物素、激素、生物細(xì)胞、生物分子組合體和微生物等多種類(lèi)型、性能各異的高特效性配位體?！　〉诎苏氯玖吓湮惑w，其作為具有組特效性的最重要的生物模擬配位體?！　〉诰耪露ㄎ唤饘匐x子配位體，其為另一類(lèi)重要的生物模擬配位體。第十章包合配合物配位體，為近年迅速發(fā)展的、對(duì)手性生物分子具有特效的分離能力，如β?CD、冠醚、穴醚及杯芳烴?！　〉谑徽码姾赊D(zhuǎn)移配位體，介紹了電子給予配位體、電子接受配位體和卟啉、酞菁衍生物配位體?！　〉谑陆榻B了共價(jià)、分子印跡、疏水作用三類(lèi)親和配位體。　　第十三章介紹了親和色譜法的實(shí)驗(yàn)技術(shù)、方法進(jìn)展及發(fā)展前景。本書(shū)在固定相和配位體各章、節(jié)，較詳細(xì)地介紹了載體活化、間隔臂偶聯(lián)，配位體鍵合制備親和固定相的具體操作方法、化學(xué)反應(yīng)的基本過(guò)程、分析測(cè)定實(shí)例、重要的參考文獻(xiàn)，以便于讀者閱讀借鑒?！　榱送椒从骋合嗌V柱制備技術(shù)的快速發(fā)展，全書(shū)對(duì)多糖凝膠經(jīng)典填充柱；SiO2和P（S?DVB）等聚合物微粒高效填充柱；配位體涂漬或表面薄層鍵合柱；由甲基丙烯酸酯共聚物或聚丙烯酰胺制作的整體填充柱和整體毛細(xì)管柱；開(kāi)管毛細(xì)管微柱；微流路芯片制作等都做了較全面的介紹?！　”緯?shū)是在作者承擔(dān)兩項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目和參與一項(xiàng)北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目的科研工作基礎(chǔ)上，通過(guò)閱讀大量參考文獻(xiàn)，和大量本科生、研究生參與科研實(shí)踐，才完成本書(shū)的編寫(xiě)工作，在此向參與上述科研工作的本科生和研究生致以誠(chéng)摯的感謝?！　”緯?shū)完稿過(guò)程中責(zé)任編輯對(duì)章、節(jié)的分割提出中肯的意見(jiàn)，并做了大量編輯工作，特此致謝?！　∽詈蟾兄x本叢書(shū)主編傅若農(nóng)教授的耐心審閱和提出的寶貴修改意見(jiàn)，特此致謝。鑒于作者水平，對(duì)本書(shū)不妥之處，歡迎讀者指教。

內(nèi)容概要

本書(shū)是《色譜技術(shù)叢書(shū)》中專(zhuān)門(mén)介紹親和色譜方法的分冊(cè)。書(shū)中對(duì)親和色譜方法的特點(diǎn)、適用范圍、親和固定相的制備方法及實(shí)驗(yàn)技術(shù)作了較全面的介紹。由載體、間隔臂和配位體制作的親和固定相可與生物分子生成具有“鎖?匙”結(jié)構(gòu)的絡(luò)合物，其在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和生物工程下游技術(shù)中獲得廣泛的應(yīng)用。　　本書(shū)適用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、藥學(xué)、分析化學(xué)等專(zhuān)業(yè)師生選作教材或參考書(shū)，也可供從事制備液相色譜、生物制品或天然產(chǎn)物純化、傳感器制作、微流路芯片或生物芯片制作的工程技術(shù)人員作為學(xué)習(xí)參考材料。

書(shū)籍目錄

第一章　親和色譜法基礎(chǔ) 　第一節(jié)　概述 　　一、鎖匙結(jié)構(gòu)絡(luò)合物的形成 　　二、親和色譜和液相色譜 　　三、高效液相親和色譜 　　四、親和色譜方法的分類(lèi) 　　五、親和色譜發(fā)展史 　第二節(jié)　親和色譜法的基本理論 　　一、鎖匙結(jié)構(gòu)親和吸附絡(luò)合物的化學(xué)平衡 　　二、親和吸附等溫線、吸附速度和吸附動(dòng)力學(xué)方程式 　　三、親和鍵合動(dòng)力學(xué) 　　四、親和色譜的質(zhì)量平衡數(shù)學(xué)模型 　　五、“分裂峰”效應(yīng)的研究 　參考文獻(xiàn) 第二章　流動(dòng)相 　第一節(jié)　影響親和色譜洗脫的各種因素 　　一、鎖匙絡(luò)合物的離解常數(shù) 　　二、配位體的濃度 　　三、空間阻礙作用 　　四、親和固定相的吸附容量 　　五、平衡時(shí)間 　　六、溫度效應(yīng) 　第二節(jié)　緩沖溶液流動(dòng)相的組成 　　一、常用的酸、堿緩沖溶液 　　二、用于生物化學(xué)研究的氫離子緩沖物 　第三節(jié)　洗脫方法 　　一、非選擇性洗脫法 　　二、特效性洗脫法（或稱(chēng)生物選擇性洗脫法） 　　三、特殊洗脫方法 　參考文獻(xiàn) 第三章　固定相（一） 　第一節(jié)　親和色譜固定相的制備方法 　　一、親和色譜固定相的組成 　　二、固定化反應(yīng)及其特點(diǎn) 　　三、在固定化反應(yīng)中使用的分析技術(shù) 　第二節(jié)　載體材料的分類(lèi)及特性 　　一、描述載體材料的基本特性參數(shù) 　　二、無(wú)機(jī)氧化物載體材料 　　三、聚合物載體材料 　　四、無(wú)機(jī)氧化物、聚合物載體的性能比較 　　五、復(fù)合物載體材料 　　六、磁性載體材料 　參考文獻(xiàn) 第四章　固定相（二） 　第一節(jié)　載體材料的活化 　　一、無(wú)機(jī)氧化物的偶聯(lián)反應(yīng) 　　二、天然有機(jī)高聚物的活化反應(yīng) 　　三、合成有機(jī)聚合物的功能化反應(yīng) 　第二節(jié)　間隔臂 　　一、間隔臂在親和色譜固定相中的特殊作用 　　二、疏水性直鏈型間隔臂 　　三、親水性直鏈型間隔臂 　　四、星形輻射?樹(shù)枝狀間隔臂 　第三節(jié)　配位體 　　一、配位體的類(lèi)型 　　二、配位體的鍵合量 　　三、配位體的鍵合方式 　參考文獻(xiàn) 第五章　生物特效配位體（一） 　第一節(jié)　核堿、核苷、核苷酸、寡聚核苷酸、核酸（RNA、DNA） 　　一、核堿 　　二、核苷 　　三、核苷酸 　　四、寡聚核苷酸、核酸及其碎片 　第二節(jié)　氨基酸、肽、酶和蛋白質(zhì) 　　一、氨基酸 　　二、肽　　三、酶和蛋白質(zhì)　參考文獻(xiàn)第六章　生物特效配位體（二）　第一節(jié)　維生素及輔酶　　…… 第七章　生物特效配位體（三）第八章　染料配位體第九章　定位金屬離子配位體第十章　包合配合物配位體第十一章　電荷轉(zhuǎn)移配位體第十二章　共價(jià)、分子印跡和疏水作用配位體第十三章　親和色譜法實(shí)驗(yàn)技術(shù)及其進(jìn)展附錄

章節(jié)摘錄

　　第一章　親和色譜法基礎(chǔ)　　第一節(jié)　概述　　親和色譜（affnity chromatography，AC）是利用生物分子，特別是生物大分子與親和色譜固定相表面配位體之間，存在的生物學(xué)和生物化學(xué)過(guò)程的特效性親和吸附作用，來(lái)進(jìn)行選擇性分離生物分子的分離方法?！　∩锎蠓肿樱?、蛋白質(zhì)、核酸等）的一個(gè)共同特性，是它們具有以特有的高效方式去識(shí)別或鍵合到其他分子上的能力，這就使得所有的生物大分子，可借助親和作用過(guò)程來(lái)進(jìn)行分離和純化?！　∮H和色譜的固定相可與生物分子產(chǎn)生可逆的生物特異性的親和吸附作用，經(jīng)過(guò)選擇性或特效性洗脫，可實(shí)現(xiàn)對(duì)不同分子量的生物活性分子的分離和分析?！　≈两瘢H和色譜已在生物化學(xué)、分子生物學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物工程、臨床醫(yī)學(xué)、新型高效藥物研究中，成為常規(guī)的分離、分析和制備的有效工具，并且在生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能研究中，成為一種普遍采用的方法。　　一、鎖匙結(jié)構(gòu)絡(luò)合物的形成　　親和色譜固定相上鍵合的配位體與被分離的生物活性目標(biāo)分子之間的相互作用，可用鎖匙結(jié)構(gòu)絡(luò)合物10ck—and—key structural complex）的形成來(lái)表示，如圖1—1所示。　　生物活性目標(biāo)分子與配位體之間存在著特效的、可逆性的相互作用，這種相互作用的差異，才使不同種類(lèi)的生物分子獲得分離，它涉及分子間相互作用的范德華力、疏水作用力、靜電吸引力、絡(luò)合作用力以及空間位阻效應(yīng)等多種因素。　　親和色譜法的突出特點(diǎn)是可對(duì)天然生物活性物質(zhì)進(jìn)行高特效性的分離和純化，具有高的濃縮效應(yīng)，可從大量樣品基體中分離、純化出所希望獲取的少量生物活性物質(zhì)。

圖書(shū)封面

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