分子克隆實驗指南

內(nèi)容概要

《分子克隆實驗指南》第三版作為一本準確、可靠、明晰的實驗操作手冊，獲得廣泛的贊譽，已成為分子生物學(xué)工作者必備的案頭工具書。     第三版在前兩版的基礎(chǔ)上對圖書內(nèi)容進行徹底的更新，修改了每一個方案，增加了大量的新內(nèi)容，拓寬了學(xué)科范圍，涵蓋了各類常規(guī)技術(shù)、成熟技術(shù)和新技術(shù)，這些實驗技術(shù)都是目前世界范圍內(nèi)分離、分析和克隆DNA分子頂尖實驗室日常工作中經(jīng)常用到的。     本書是《分子克隆實驗指南》第三版的精編版，著者將原第三版的實驗材料和操作技術(shù)部分抽出來并進行了適當(dāng)?shù)男拚?，從而使三卷本的大作匯成了精悍的一本。精編版囊括了原第三版中的 “step—by—step”實驗方案以及精心選擇的附錄部分，經(jīng)原第三版的相同譯者翻譯并認真校訂為中文，在準確性、實用性方面都有所增強。       精編版專為實驗臺邊的工作者設(shè)計，對于遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)的學(xué)生具有無與倫比的價值，同時給單個研究者提供了“一書在手、方案全覽”的便利。

書籍目錄

第1章  分子克隆中使用的質(zhì)粒載體的制備   方案1.1 SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA：小量制備  方案1.2 SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA：中量制備  方案1.3 SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA：大量制備  方案1.4 煮沸法小量制備質(zhì)粒DNA   方案1.5 煮沸法大量制備質(zhì)粒DNA  方案1.6 用牙簽挑取菌落小量制備質(zhì)粒DNA  方案1.7 SDS裂解法制備質(zhì)粒DNA  方案1.8 聚乙二醇沉淀法純化質(zhì)粒DNA  方案1.9 層析法純化質(zhì)粒DNA  方案1.10 氯化銫?溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環(huán)DNA：連續(xù)梯度法  方案1.11 氯化銫?溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環(huán)DNA：不連續(xù)梯度法  方案1.12 有機溶劑萃取法從DNA中去除溴化乙錠  方案1.13 離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠  方案1.14 NaCl離心法去除質(zhì)粒DNA樣品中的小片段核酸  方案1.15 Sephacryl S?1000層析法去除質(zhì)粒DNA樣品中的小片段核酸  方案1.16 氯化鋰沉淀法去除質(zhì)粒DNA樣品中的小片段核酸  方案1.17 在質(zhì)粒載體中進行定向克隆  方案1.18 在黏性末端上連接接頭  方案1.19 在質(zhì)粒載體中進行平末端克隆  方案1.20 質(zhì)粒DNA的去磷酸化  方案1.21 平末端DNA連接合成的接頭  方案1.22 在低熔點瓊脂糖中連接質(zhì)粒和目的DNA  方案1.23 制備和轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)的Hanahan  方法：高效的轉(zhuǎn)化  方法  方案1.24 制備和轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌的Inoue  方法：超級感受態(tài)細胞  方案1.25 氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)  方案1.26 大腸桿菌的電轉(zhuǎn)化  方案1.27 用X?gal和IPTG篩選細菌克?。害粱パa  方案1.28 小量細菌克隆的雜交篩選  方案1.29 中量細菌克隆的雜交篩選  方案1.30 大量菌落的雜交篩選  方案1.31 菌落的裂解和DNA與濾膜的結(jié)合  方案1.32 在濾膜上進行細菌DNA的雜交第2章  λ噬菌體及其載體   方案2.1 λ噬菌體的平板培養(yǎng)  方案2.2 λ噬菌體噬菌斑的挑取  方案2.3 通過平板裂解和洗脫制備λ噬菌體原種  方案2.4 用小量液體培養(yǎng)制備λ噬菌體原種  方案2.5 λ噬菌體的大規(guī)模培養(yǎng)：低倍數(shù)感染  方案2.6 從大規(guī)模裂解物中沉淀λ噬菌體顆粒  方案2.7 通過凝膠電泳測定λ噬菌體原種和裂解物中DNA的含量  方案2.8 通過CsCl等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒  方案2.9 通過甘油分  級梯度離心純化λ噬菌體顆粒  方案2.10 通過沉淀/離心純化λ噬菌體顆粒  方案2.11 用蛋白酶K和SDS從大規(guī)模培養(yǎng)物中提取λ噬菌體DNA  方案2.12 用甲酰胺從大規(guī)模培養(yǎng)物中提取λ噬菌體DNA  方案2.13 用作克隆載體的經(jīng)單一限制性酶切割的λ噬菌體DNA的制備  方案2.14 用作克隆載體的雙限制性酶切割的λ噬菌體DNA的制備83   方案2.15 λ噬菌體載體DNA的堿性磷酸酶處理  方案2.16 λ噬菌體臂的純化:通過蔗糖密度梯度離心  方案2.17 用于基因組文庫中的真核DNA的部分  酶切：預(yù)反應(yīng)  方案2.18 用于基因組文庫的真核DNA的部分  酶切: 制備反應(yīng)  方案2.19 λ噬菌體臂與外源DNA片段的連接  方案2.20 基因組文庫的擴增  方案2.21 噬菌體DNA從噬菌斑轉(zhuǎn)移到濾膜98   方案2.22 噬菌體DNA在濾膜上的雜交  方案2.23 λ噬菌體快速分  析：從平板裂解物中純化λDNA  方案2.24 λ噬菌體分  離物的快速分  析：從液體培養(yǎng)物中純化λDNA第3章  M13噬菌體載體 第4章  高容量載體的應(yīng)用 第5章  DNA凝膠電泳和脈沖場瓊脂糖凝膠電泳 第6章  真核基因組DNA的制備和分  析 第7章  真核細胞mRNA的提取、純化和分  析 第8章  聚合酶鏈反應(yīng)體外擴增DNA 第9章  放射性標記DNA探針與RNA探針的制備 第10章  人工合成的寡核苷酸探針 第11章  cDNA文庫制備及基因鑒定 第12章  DNA測序 第13章  誘變 第14章  表達文庫的篩選第15章  克隆基因在大腸桿菌中的表達 第16章  克隆基因轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的哺乳動物細胞 第17章  哺乳動物細胞基因表達分  析 第18章  蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù) 附錄 索引

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