出版時間:2007-7 出版社:7-122 作者:魏群 編 頁數(shù):204 字數(shù):326000
前言
生命科學的迅速發(fā)展,使生物化學和分子生物學越來越成為生命科學各領(lǐng)域的重要研究工具。本書是在多年來為北京師范大學生命科學學院開設(shè)生物化學大實驗及分子生物學實驗為了更好地培養(yǎng)學生的綜合科研素質(zhì)和實踐技能,我們將過去實驗教學過程中的單一技能訓練轉(zhuǎn)化為綜合實驗技能訓練,在實驗課程體系和內(nèi)容的設(shè)置方面以系統(tǒng)綜合大實驗為核心和以科學研究思路為線索,設(shè)計系列教學實驗,改變了傳統(tǒng)實驗教學模式中條塊分割的狀況,讓學生在實驗課程中體驗科研的過程,使學生從整體上初步了解進行生物化學及分子生物學科學研究的思路和方法,培養(yǎng)學生們正確的科研思維能力和綜合素質(zhì)。 全書分為前后呼應的兩篇。第一篇介紹了有關(guān)生物化學和分子生物學的基本實驗技術(shù)理論,內(nèi)容包括載體,PCR基因擴增,DNA重組,基因分析與檢測,基因表達,基因突變和蛋白質(zhì)工程,層析技術(shù),電泳技術(shù),蛋白質(zhì)的分離純化,蛋白質(zhì)的分析技術(shù),酶工程與固定化酶,基因工程蛋白的發(fā)酵與制備技術(shù)。以供學生實驗時查找和老師講解。第二篇是學生實驗,內(nèi)容包括質(zhì)粒DNA的提取及其定性定量分析,大腸桿菌基因組DNA的分離,PCR法擴增大腸桿菌堿性磷酸酶基因,質(zhì)粒DNA與目的DNA的雙酶切和連接,感受態(tài)細胞的制備和重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化,重組子的篩選與鑒定,重組堿性磷酸酶的發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵產(chǎn)物(堿性磷酸酶)的檢測分析、分離純化、參數(shù)的測定、純度鑒定及其亞基分子量測定、酶學性質(zhì)分析、變性及復性作用研究、固定化及固定化酶的特性研究、定點突變、結(jié)構(gòu)與功能研究。書后還摘編了對生物化學和分子生物學實驗有用的附錄?! ”窘滩牡木帉戯L格簡明、實用。編寫時一方面突出實驗的基礎(chǔ)性、技能性和綜合性而設(shè)計系列綜合大實驗;另一方面突出實驗操作的可行性,在實驗方法中詳細羅列所需的儀器和材料,在實驗操作中詳盡地敘述每一個實驗步驟,特別是對實驗中應注意的地方和學生在實驗過程中易出現(xiàn)的問題等均給予了重要提示,學生通過本書即可獨立地進行實驗。通過學習本書,學生在獲得較好實驗結(jié)果的同時即可進行接近正規(guī)科學研究的綜合實驗技能訓練,從而培養(yǎng)學生的科研能力、創(chuàng)新能力、分析問題與解決問題等的綜合實踐能力?! ”緯勺鳛楦叩仍盒I锖歪t(yī)藥農(nóng)林等專業(yè)研究生和本科生生物化學和分子生物學實驗的指導用書,也可供生物化學和分子生物學有關(guān)研究人員、企業(yè)技術(shù)人員等參考?! 【幷摺 ?007年2月 于北京師范大學
內(nèi)容概要
生命科學的迅速發(fā)展,使生物化學和分子生物學越來越成為生命科學各領(lǐng)域的重要研究工具。本書是在多年來為北京師范大學生命科學學院開設(shè)生化大實驗及分子生物學實驗的基礎(chǔ)上編寫而成。 全書分為前后呼應的兩篇,第一篇介紹了有關(guān)生物化學和分子生物學的基本實驗技術(shù)理論,第二篇是學生實驗,書后還摘編了對生物化學和分子生物學實驗有用的附錄。 本書的編寫風格簡明、實用。編寫中突出實驗的基礎(chǔ)性、技能性和綜合性。通過學習每一個基礎(chǔ)實驗和掌握每一個基本技能,使學生綜合進行接近正規(guī)科研的實驗訓練。同時培養(yǎng)學生分析問題、解決問題的能力和研究的思維能力。 本書可作為高等院校生物和醫(yī)藥農(nóng)林等專業(yè)研究生和本科生生物化學和分子生物學實驗的指導用書,也可供生物化學和分子生物學有關(guān)研究人員、企業(yè)技術(shù)人員等參考。
書籍目錄
第一篇 常用生物化學與分子生物學實驗技術(shù)及原理 第一章 載體 第二章 PCR基因擴增 第三章 DNA重組 第四章 基因分析與檢測 第五章 基因表達 第六章 基因突變和蛋白質(zhì)工程 第七章 層析技術(shù) 第八章 電泳技術(shù) 第九章 蛋白質(zhì)的分離純化 第十章 蛋白質(zhì)的分析技術(shù) 第十一章 酶工程與固定化酶 第十二章 基因工程蛋白的發(fā)酵與制備技術(shù) 參考文獻 第二篇 學生實驗 實驗一 質(zhì)粒DNA的提取及其定性定量分析 實驗二 大腸桿菌基因組DNA的分離 實驗三 PCR法擴增大腸桿菌堿性磷酸酶基因 實驗四 質(zhì)粒DNA與目的DNA的雙酶切和連接 實驗五 感受態(tài)細胞的制備和重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化 實驗六 重組子的篩選與鑒定 實驗七 重組堿性磷酸酶的發(fā)酵培養(yǎng) 實驗八 發(fā)酵產(chǎn)物(堿性磷酸酶)的檢測分析 實驗九 發(fā)酵產(chǎn)物(堿性磷酸酶)的分離純化 實驗十 堿性磷酸酶分離純化參數(shù)的測定 實驗十一 堿性磷酸酶的純度鑒定及其亞基分子量測定 實驗十二 堿性磷酸酶的酶學性質(zhì)分析 實驗十三 堿性磷酸酶的變性及復性作用研究 實驗十四 堿性磷酸酶的固定化及固定化酶的特性研究 實驗十五 堿性磷酸酶的定點突變(PCR法) 實驗十六 堿性磷酸酶及其突變體的結(jié)構(gòu)與功能研究 附錄 一、常用單位及換算方法 二、常用核酸、蛋白質(zhì)換算數(shù)據(jù) 三、氨基酸符號及相應密碼子 四、常見市售酸堿的濃度及近似pH值 五、硫酸銨飽和度的常用表 六、離心機轉(zhuǎn)速與相對離心力的換算 七、層析法常用數(shù)據(jù) 八、常用的電泳緩沖液及凝膠加樣緩沖液 九、常用限制性內(nèi)切酶酶切位點及緩沖液 十、分子生物學常用緩沖液和試劑的配制 十一、生化常用緩沖液的配制 十二、常用細菌培養(yǎng)基和抗生素溶液 十三、小鼠腹水多克隆抗體的制備和檢測
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