臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)

內(nèi)容概要

　　本書是由衛(wèi)生部教材辦公室統(tǒng)一組織編寫的系列實驗教材之一，供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)本科和?？剖褂?。與前一版相比，本書增加了臨床免疫章節(jié)的實驗內(nèi)容，使之能更好地與理論教材配合使用。同時針對各單元的實驗內(nèi)容編寫了PPT光盤附于書后與本書配合使用，使有關(guān)實驗，特別是臨床免疫相關(guān)的實驗?zāi)軌蛟赑PT的輔助下進行。

書籍目錄

第一單元 抗體制備技術(shù)
　實驗一 免疫血清——多克隆抗體的制備技術(shù)
　實驗二 單克隆抗體的制備
　實驗三 酶標(biāo)記抗體的制備
　單元討論 新型抗體制備的途徑和策略
第二單元 免疫沉淀類實驗
　驗證實驗一 雙向免疫擴散試驗
　驗證實驗二 單向免疫擴散試驗
　驗證實驗三 對流免疫電泳
　設(shè)計實驗抗原物質(zhì)的變化及性質(zhì)分析
　臨床見習(xí) 免疫比濁分析系統(tǒng)
　單元討論 免疫沉淀類實驗的發(fā)展
第三單元 免疫凝集類實驗
　驗證實驗一 直接凝集試驗
　驗證實驗二 間接凝集試驗
　驗證實驗三 間接凝集抑制試驗
　設(shè)計實驗 不完全抗體檢測的實驗設(shè)計
　臨床見習(xí) 免疫凝集分析系統(tǒng)——全自動血型分析系統(tǒng)
　單元討論 免疫凝集類實驗的發(fā)展趨勢
第四單元 酶免疫檢測技術(shù)
　驗證實驗一 酶聯(lián)免疫吸附試驗
　驗證實驗二 酶免疫組織化學(xué)染色技術(shù)
　設(shè)計實驗一 酶聯(lián)免疫試劑盒的研制
　設(shè)計實驗二 酶聯(lián)免疫試劑盒的評價體系
　設(shè)計實驗三 定量酶免疫分析中標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)學(xué)模型的建立
　臨床見習(xí) 全自動酶聯(lián)免疫分析儀
　單元討論 根據(jù)待測物質(zhì)特性選擇酶聯(lián)免疫試驗的類型
第五單元 細(xì)胞免疫和非特異免疫功能檢測技術(shù)
　驗證實驗一 外周血單個核細(xì)胞的分離
　驗證實驗二 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗
　驗證實驗三 細(xì)胞吞噬率與吞噬指數(shù)測定
　驗證實驗四 血清總補體活性測定
　設(shè)計實驗 白細(xì)胞殺菌能力測定
　臨床見習(xí) 流式細(xì)胞分析系統(tǒng)
　單元討論 細(xì)胞免疫檢測技術(shù)的現(xiàn)狀及發(fā)展
第六單元 感染性疾病的免疫學(xué)檢測
　實驗一 乙型肝炎病毒表面抗體檢測
　實驗二 HBsAg不同檢測方法的最低檢測限驗證實驗
　實驗三 抗鏈球菌溶血素“O”檢測
　實驗四 梅毒螺旋體抗體檢測
　實驗五 人類巨細(xì)胞病毒抗體IgM檢測
　臨床見習(xí) 臨床感染免疫學(xué)檢測項目、實驗操作、技術(shù)優(yōu)勢與存在問題
　病案討論 感染性疾病
第七單元 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢測
　實驗一 血清IgE的檢測
　實驗二 紅細(xì)胞表面不完全抗體的檢測
　實驗三 循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測
　臨床見習(xí) 臨床常用超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢測項目與臨床應(yīng)用
　病案討論 超敏反應(yīng)性疾病
第八單元 自身免疫性疾病的免疫學(xué)檢測
　實驗一 抗核抗體檢測
　實驗二 可提取性核抗原抗體譜檢測
　實驗三 抗雙鏈DNA抗體檢測
　實驗四 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測
　臨床見習(xí) 熒光免疫顯微鏡技術(shù)
　病案討論 自身免疫性疾病
第九單元 免疫增殖性疾病的免疫學(xué)檢驗
　實驗一 血清免疫固定電泳實驗
　實驗二 血清IgG定量檢測的可報告范圍評價實驗
　臨床見習(xí) 臨床用于免疫增殖性疾病免疫學(xué)檢測的設(shè)備、項目與臨床意義
　病案討論 免疫增殖性疾病
第十單元 免疫缺陷性疾病的免疫學(xué)檢測
　實驗一 人類免疫缺陷病毒抗體初篩實驗
　實驗二 人類免疫缺陷病毒確證實驗
　實驗三 T細(xì)胞亞群的流式細(xì)胞儀檢測
　臨床見習(xí) 人類免疫缺陷病毒抗體初篩試驗
　病案討論 免疫缺陷性疾病
第十一單元 腫瘤免疫學(xué)檢驗
　實驗一 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)檢測血清甲胎蛋白參考區(qū)間建立實驗
　實驗二 血清前列腺特異性抗原診斷前列腺癌的性能評價實驗
　臨床見習(xí) 腫瘤標(biāo)志物檢測新指標(biāo)新技術(shù)
　病案討論 腫瘤免疫學(xué)檢測
第十二單元 移植免疫學(xué)檢測
　實驗一 微量淋巴細(xì)胞交叉毒試驗
　實驗二 群體反應(yīng)性抗體檢測
　臨床見習(xí) 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)——全血環(huán)孢素濃度檢測
　病案討論 器官移植中的免疫學(xué)問題
第十三單元 綜合型實驗
　綜合實驗一 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測傷寒0抗體方法的建立
　綜合實驗二 機體免疫功能評估
　綜合實驗三 科研設(shè)計——免疫相關(guān)疾病的實驗診斷
　單元討論 評價機體免疫狀態(tài)免疫評估指標(biāo)的選擇
附錄
　附錄一 本書實驗常用試劑及配制方法
　附錄二 本書有關(guān)實驗指標(biāo)參考范圍
　附錄三 本書單元討論與病案討論提示

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁：   插圖：   3.燒杯、量筒、加樣器、試管、吸水紙、濕盒、37℃孵箱、熒光顯微鏡等。 【操作方法】 1.試劑準(zhǔn)備 將試劑從冰箱取出置室溫復(fù)溫10～15分鐘，之后按試劑說明書配制所需應(yīng)用緩沖液。 2.樣本稀釋 按說明書稀釋標(biāo)本。 3.加樣 在每個反應(yīng)區(qū)加入稀釋標(biāo)本和質(zhì)控血清，每次實驗須加入陽性和陰性質(zhì)控。質(zhì)控血清使用前必須充分混勻。37℃保濕溫育30分鐘，使樣本中的抗dsDNA抗體與動基體dsDNA抗原充分反應(yīng)。 4.洗滌 用流水緩沖液沖洗反應(yīng)底物片，然后立即放入裝有沖洗緩沖液的容器中浸泡至少5分鐘，洗滌去除未反應(yīng)的非特異性結(jié)合物質(zhì)（洗滌步驟是影響檢測結(jié)果最為關(guān)鍵的一步，洗滌不充分將會增加非特異性染色）。 5.加二抗 將熒光素標(biāo)記的抗IgG二抗加入到每個反應(yīng)區(qū)，37℃保濕溫育30分鐘，使熒光二抗與已被動基體結(jié)合的抗dsDNA抗體充分反應(yīng)。 6.同第4步進行洗滌，洗滌去除過量的未反應(yīng)的熒光二抗。 7.封片 用吸水紙擦干底物片背面和四周（不要擦拭反應(yīng)區(qū)），之后在反應(yīng)底物片上滴加緩沖甘油，加載蓋玻片封片，以延長熒光壽命。 【結(jié)果分析】 用熒光顯微鏡觀察動基體部位的熒光強度，陽性結(jié)果見文末彩圖3。 1.陰性 熒光顯微鏡下觀察反應(yīng)底物片，綠蠅短膜蟲的動基體未見熒光。 2.可疑 即臨界值檢測結(jié)果，熒光顯微鏡下綠蠅短膜蟲的動基體僅見到模糊、暗淡的微弱熒光。 3.陽性 熒光顯微鏡下綠蠅短膜蟲的動基體部位可見明亮、清晰的亮綠色熒光。 4.陽性滴度檢測 當(dāng)樣本初始稀釋倍數(shù)檢測結(jié)果為陽性時，應(yīng)參照試劑廠商推存的樣本稀釋度進一步檢測，直至稀釋至檢測結(jié)果為陰性的前一稀釋度（樣本滴度）。常用的血清稀釋度系統(tǒng)為1：10，1：32，1：100，1：320，1：1000或1：10，1：20，1：40倍比稀釋，稀釋度越高表明抗dsDNA抗體滴度越高，即濃度越高。 【實驗討論】 目前，臨床上除了間接免疫熒光法檢測抗dsDNA抗體外，ELISA法和純化抗原的免疫印跡法也較常使用，但由于試劑生產(chǎn)商和檢測方法不同，3種方法檢測結(jié)果的敏感性和特異性也不盡相同?？傮w來講，ELISA和純化抗原的免疫印跡法敏感性明顯高于以綠蠅短膜蟲為底物的間接免疫熒光法。 由于抗dsDNA抗體是ANA的一種，在以HEp—2細(xì)胞為底物的ANA檢測中，抗dsDNA抗體陽性表現(xiàn)為均質(zhì)型熒光模型，因此，ANA檢測結(jié)果為陰性時，可基本排除抗dsDNA抗體陽性的可能性。試分析間接免疫熒光法檢測抗dsDNA抗體與其他方法比較各有什么特點？

編輯推薦

《全國高等學(xué)校配套教材:臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)(第4版)(供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用)》是由衛(wèi)生部教材辦公室統(tǒng)一組織編寫的系列實驗教材之一，供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)本科和專科使用。與前一版相比，《全國高等學(xué)校配套教材:臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)(第4版)(供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用)》增加了臨床免疫章節(jié)的實驗內(nèi)容，使之能更好地與理論教材配合使用。同時針對各單元的實驗內(nèi)容編寫了PPT光盤附于書后，與《全國高等學(xué)校配套教材:臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)(第4版)(供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用)》配合使用，使有關(guān)實驗特別是臨床免疫相關(guān)的實驗?zāi)軌蛟赑PT的輔助下進行。應(yīng)當(dāng)強調(diào)的是，實驗教學(xué)是引領(lǐng)學(xué)生進行感性認(rèn)識的教學(xué)環(huán)節(jié)，因此，我們?nèi)匀恢鲝堊寣W(xué)生多做實驗或親自到臨床實驗室中見習(xí)，了解新技術(shù)、新方法。為此，《全國高等學(xué)校配套教材:臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)(第4版)(供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用)》還增加了臨床見習(xí)的內(nèi)容，這些內(nèi)容也是臨床實驗室實習(xí)的要點，因此，《全國高等學(xué)校配套教材:臨床免疫學(xué)檢驗實驗指導(dǎo)(第4版)(供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用)》也可以在臨床實驗室實習(xí)中參考使用。

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