醫(yī)學分子生物學實驗技術

內容概要

這本《醫(yī)學分子生物學實驗技術(供臨床醫(yī)學等專業(yè)用第2版)》由藥立波主編，讀者對象定位于高等醫(yī)藥院校及研究機構的碩士和博士研究生。主要是作為醫(yī)學研究生分子生物學實驗課必修課或選修課教材，同時也可以作為醫(yī)學院校研究生課題研究過程中分子生物學技術選擇和應用的參考用書。本書的主要目的是幫助研究生理解各種分子生物學技術的基本原理、主要用途和主要流程，學會在研究中正確選用適合各自課題所需求的分子生物學技術。

書籍目錄

緒論
第一章  聚合酶鏈反應
  第一節(jié)  PCR技術概述
  第二節(jié)  PCR的引物設計和條件優(yōu)化
  第三節(jié)  PCR產物的鑒定方法
  第四節(jié)  PCR的基本類型及應用
  第五節(jié)  實時定量PCR
第二章  DNA體外重組
  第一節(jié)  DNA體外重組的基本流程
  第二節(jié)  載體的選擇及準備
  第三節(jié)  目的DNA片段的獲取
  第四節(jié)  DNA片段與載體的連接
  第五節(jié)  重組DNA轉化宿豐細胞
  第六節(jié)  重組DNA的克隆篩選及鑒定
第三章  DNA序列分析技術
  第一節(jié)  常規(guī)DNA序列測定的原理
  第二節(jié)  自動激光熒光DNA測序——第一代測序技術
  第三節(jié)  其他DNA序列分析新技術
第四章  基因突變技術
  第一節(jié)  體外基因突變和鑒定
  第二節(jié)  細胞和動物的基因誘變和鑒定
第五章  核酸分子雜交
  第一節(jié)  核酸探針及其標記
  第二節(jié)  Southem印跡雜交
  第三節(jié)  Northem印跡雜交
  第四節(jié)  其他核酸分子雜交
第六章  外源基因在原核細胞的表達
  第一節(jié)  常用表達系統(tǒng)及其選擇
  第二節(jié)  外源基因的表達和鑒定
  第三節(jié)  外源基因表達條件和優(yōu)化
  第四節(jié)  外源基因原核表達的基本操作
第七章  外源基因在真核細胞中的表達
  第一節(jié)  真核表達載體及宿主
  第二節(jié)  真核細胞基因導入方法
  第三節(jié)  外源基因在酵母細胞中的表達
  第四節(jié)  外源基因在昆蟲細胞中的表達
  第五節(jié)  外源基因在哺乳動物細胞中的表達
第八章  蛋白質的分離純化
  第一節(jié)  蛋白質分離純化的基本原則
  第二節(jié)  生物樣品的預處理
  第三節(jié)  蛋白質樣品的粗分離
  第四節(jié)  蛋白質的層析純化
  第五節(jié)  蛋白質的電泳分離和鑒定
  第六節(jié)  純化蛋白質的后期處理
  第七節(jié)  蛋白質分離純化的綜合策略
第九章  蛋白質的定性定量分析
  第一節(jié)  蛋白質分子量的測定
  第二節(jié)  蛋門質的等電點測定
  第三節(jié)  蛋白質總含量測定
  第四節(jié)  特定蛋白質的含量測定
  第五節(jié)  蛋白質半衰期測定
第十章  蛋白的化學修飾分析
  第一節(jié)  蛋白磷酸化分析
  第二節(jié)  蛋白糖基化分析
  第三節(jié)  其他蛋白共價修飾分析
第十一章  蛋白質的空間結構分析
  第一節(jié)  蛋白質的一級結構分析
  第二節(jié)  蛋白質的二級結構分析
  第三節(jié)  蛋白質的晶體空間結構解析
  第四節(jié)  蛋白質的液相空間結構解析
  第五節(jié)  蛋白質空間結構的預測
  第六節(jié)  蛋白質的分子結構對接
第十二章  蛋白質相互作用研究技術
  第一節(jié)  酵母雙雜交法
  第二節(jié)  標簽融合蛋白結合實驗
  第三節(jié)  免疫共沉淀分析
  第四節(jié)  物理學方法研究蛋白-蛋白相互作用
  第五節(jié)  蛋白-蛋白相互作用預測方法
第十三章  蛋白質組學研究相關技術
  第一節(jié)  蛋白質組雙向凝膠電泳-質譜研究技術
  第二節(jié)  基于多維層析質譜的蛋白質組研究策略
  第三節(jié)  定量蛋白質組學研究技術
第十四章  基因表達譜分析
  第一節(jié)  基因表達譜分析的基本方法
  第二節(jié)  基因芯片的原理及應用
  第三節(jié)  基因芯片的數(shù)據(jù)挖掘
  第四節(jié)  蛋白質芯片的原理及應用
第十五章  基因轉錄調控分析
  第一節(jié)  轉錄調節(jié)蛋白與DNA的結合分析
  第二節(jié)  啟動子轉錄活性分析
  第三節(jié)  DNA甲基化分析
  第四節(jié)  芯片技術在基因表達調控研究中的應用
第十六章  非編碼RNA研究策略與方法
  第一節(jié)  miRNA的研究策略及相關技術
  第二節(jié)  siRNA的設計與應用
第十七章  疾病相關基因的鑒定和分析
  第一節(jié)  鑒定和分析疾病相關基因的策略
  第二節(jié)  基因分型
  第三節(jié)  突變基因的檢測
第十八章  遺傳修飾動物
  第一節(jié)  小鼠實驗的一般要求
  第二節(jié)  轉基因小鼠
  第三節(jié)  基因剔除小鼠
第十九章  基因功能的研究策略
  第一節(jié)  從分子水平研究基因產物的功能特點
  第二節(jié)  從細胞水平研究基因產物的作用機制
  第三節(jié)  從整體水平研究基因產物的牛物學效應
附錄
  附錄Ⅰ分子生物學實驗設計中的常見錯誤
  附錄Ⅱ分子生物學實驗微量操作技巧
  附錄Ⅲ分子生物學實驗教學實施方案
  附錄Ⅳ分子生物學實驗資料參考
英中文名詞對照索引

章節(jié)摘錄

　　分子生物學實驗數(shù)據(jù)的可靠性依賴于可重復性。從來不可以依據(jù)一次實驗的數(shù)據(jù)來作出結論，得到的所有實驗數(shù)據(jù)都應該至少有3次以上的重復驗證；對于需要主觀判斷的數(shù)據(jù)，如對形態(tài)學結果的人工判讀，最好由多位專業(yè)人員依照相同標準各自獨立地判讀，再對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理。只有可靠的數(shù)據(jù)才能引導你的研究保持正確的方向?！　o論在任何情況下，都不能人為地改動甚至編造數(shù)據(jù)。從事科學研究需要有專業(yè)奉獻精神和足夠的耐心，不懼風險。人們進入科學研究領域的動機不同，共同的是：只有始終保持對自然的好奇心和專業(yè)進取心，才能身心愉快地應對實驗中的失敗?！　?.數(shù)據(jù)的歸納和保存及時歸納和整理數(shù)據(jù)，做出必要的統(tǒng)計學分析，可以幫助你看到所研究問題的實際趨勢，從而及時作出是繼續(xù)實驗，還是適可而止、節(jié)約時間和資源的決定。數(shù)據(jù)的歸納和整理依賴于高質量的實驗記錄。所有實驗所涉及的事項均應詳細記錄，包括重要試劑的生產批次、用量、制備和稀釋方法，反應的溫度和時間，樣品處理方法，測定用儀器和條件。所有測定的原始數(shù)據(jù)均應翔實記錄。好的實驗記錄幫助你整理出有意義的結論，也幫助你找出實驗失敗的原因?！　?.數(shù)據(jù)的意義在分子生物學實驗中，由于主觀或客觀原因，我們不可能總是獲得期望的數(shù)據(jù)，更多的情況下得到的是不理想的結果。需要仔細分析這些數(shù)據(jù)，才能分辨出哪些對自己提出的科學問題是支持的，哪些可能是否定自己的預期答案的。盡管我們提倡否定思維，但是這并不意味著剛一拿到陰性數(shù)據(jù)就直接否定自己原來的想法。細胞活動十分復雜，對外源信號的反應可能會被許多因素所掩蓋，如細胞密度、血清濃度等。我們需要仔細分析所獲數(shù)據(jù)的條件，才能獲得真正的分子變化規(guī)律。一些出乎意外的實驗結果往往是重要發(fā)現(xiàn)的出發(fā)點，關鍵是我們必須有理論和技術準備來面對這些數(shù)據(jù)。　　4.數(shù)據(jù)的交流剛進入科研領域的研究生在實驗中遇到問題，應該隨時向周圍有經驗的同事和導師請教和討論，有些問題他們不一定有直接的答案，但是可以提出解決問題的線索，因為他們有過更多失敗的教訓。千萬不可自己埋頭苦干，重復別人走過的很多彎路?！　∪绻玫降膶嶒灲Y果并非預期，需要鑒別問題是技術性的，還是全局的。在許多情況下，問題是技術性的，是由于實驗條件的不同或操作程序導致，此時可以變化條件、檢查操作步驟，以保證獲得的數(shù)據(jù)無論是否符合自己的預期，但都是可靠的。全局性的問題指的是原本的假設有偏差或不足，在這種情況下，需要將實驗設計全面考慮，進行補充。遇到技術性的問題，需要和導師及同事加強討論，進行修正。對于課題存在的根本性問題，需要再次閱讀文獻，考慮是否在課題的設計上進行改進，甚至更換?！　∪绾闻袛嘌芯窟M程是否合理？存在什么問題？除了自己思考以外，可以將已經獲得的數(shù)據(jù)進行整理，無論是否有機會在討論會上做報告，都可以將自己的數(shù)據(jù)按照做報告的形式（如電子幻燈）來整理，理順研究背景、研究目標、研究內容、技術路線，將已獲得的數(shù)據(jù)按照研究內容呈現(xiàn)給同事，可以提出問題討論；如沒有機會報告，想象別人會提出哪些問題來質疑這些數(shù)據(jù)，然后試圖回答這些問題，在這一過程中，思路將會得到完善。很少有研究課題會始終沿著最初的設想完成，不斷地修訂計劃才能引導你保持正確的方向。　　在交流中，難免會遇到對你的數(shù)據(jù)或結論的否定意見。不管這些意見出自何人、出于什么樣的目的，對你的實驗都會有幫助。客觀地從質疑中獲得完善研究思路和設計的信息是最聰明的應對質疑的方式?！　　?/pre>








圖書封面






評論、評分、閱讀與下載



還沒讀過(84)
勉強可看(612)
一般般(104)
內容豐富(4329)
強力推薦(355)


 


    醫(yī)學分子生物學實驗技術 PDF格式下載