出版時間:2010-6 出版社:盧健 人民衛(wèi)生出版社 (2010-06出版) 作者:盧健 編 頁數(shù):186
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《細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗教程(供臨床醫(yī)學(xué)口腔醫(yī)學(xué)和相關(guān)醫(yī)學(xué)專業(yè)使用)》是在自編教材《細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗指導(dǎo)》的基礎(chǔ)上編寫而成的。整合了細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)這些學(xué)科的實驗教學(xué),以獨立設(shè)置的課程適應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實驗教學(xué)的進步與需要?! 都?xì)胞與分子生物學(xué)實驗教程(供臨床醫(yī)學(xué)口腔醫(yī)學(xué)和相關(guān)醫(yī)學(xué)專業(yè)使用)》分成基礎(chǔ)實驗、其他基本實驗技術(shù)、綜合實驗和設(shè)計性實驗引導(dǎo)四個部分。以電泳技術(shù)、層析技術(shù)、離心技術(shù)、蛋白質(zhì)技術(shù)、PCR技術(shù)、免疫學(xué)分析基本技術(shù)、遺傳學(xué)的染色體制備分析技術(shù)和細(xì)胞學(xué)的細(xì)胞培養(yǎng)、顯微鏡使用作為基礎(chǔ)實驗,輔以教師的講授和新技術(shù)的演示,形成新的細(xì)胞與分子生物學(xué)實驗教學(xué)特色。綜合實驗將給予學(xué)生比較實用、連貫的實驗技術(shù)訓(xùn)練。設(shè)計性實驗引導(dǎo)將注重學(xué)生科研設(shè)計、綜合分析和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。
書籍目錄
第一章 緒論第一節(jié) 概述第二節(jié) 課程設(shè)置與要求第三節(jié) 實驗的基本要求一、實驗室的要求二、實驗課的要求三、實驗記錄的要求第四節(jié) 實驗報告的撰寫第二章 基礎(chǔ)實驗第一節(jié) 電泳技術(shù)實驗一 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗二 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳分離蛋白質(zhì)實驗三 血清脂蛋白瓊脂糖電泳實驗四 免疫電泳與對流免疫電泳第二節(jié) 層析技術(shù)實驗五 凝膠柱層析分離鑒定蛋白質(zhì)實驗六 DNS-氨基酸的雙向聚酰胺薄膜層析實驗七 離子交換層析分離氨基酸第三節(jié) 離心技術(shù)實驗八 差速離心法從鼠肝中提取核糖核蛋白體和核蛋白體RNA一、提取核糖核蛋白體二、提取核蛋白體RNA實驗九 蔗糖梯度離心法分步離心核糖核酸實驗十 小鼠脾單個核細(xì)胞的分離——密度梯度離心法第四節(jié) 蛋白質(zhì)技術(shù)實驗十一 血清免疫球蛋白的分離、純化與定量實驗十二 細(xì)胞總蛋白的提取實驗十三 蛋白質(zhì)定量測定方法——標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蛋白質(zhì)含量實驗十四 Western印跡法檢測表達蛋白第五節(jié) 多聚酶鏈體外擴增技術(shù)(PCR)實驗十五 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)一、PCR技術(shù)檢測β-actin基因二、瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段實驗十六 逆轉(zhuǎn)錄PCR一、Trizot法抽提總RNA二、逆轉(zhuǎn)錄(RT)-PCR實驗十七 PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(示教)第六節(jié) 免疫技術(shù)實驗十八 直接凝集試驗——血型鑒定實驗(玻片法)實驗十九 雙向免疫擴散實驗實驗二十 酶聯(lián)免疫吸附實驗(EUSA)——雙抗體夾心法實驗二十一 細(xì)胞膜表面抗原檢測——補體依賴的微量淋巴細(xì)胞毒實驗第七節(jié) 細(xì)胞分析技術(shù)實驗二十二 顯微鏡使用、細(xì)胞的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)及細(xì)胞的化學(xué)成分分析一、光學(xué)顯微鏡的使用方法二、過氧化氫酶分解過氧化氫實驗三、蟾蜍血細(xì)胞內(nèi)DNA的顯示四、幾種特殊顯微鏡的基本原理和用途實驗二十三 動物原代細(xì)胞的培養(yǎng)實驗二十四 培養(yǎng)細(xì)胞的存活率檢測實驗二十五 蟾蜍血細(xì)胞的體外融合實驗二十六 細(xì)胞有絲分裂及細(xì)胞骨架的顯微觀察實驗二十七 動物染色體的制備第八節(jié) 染色體分析技術(shù)實驗二十八 外周血培養(yǎng)染色體制備技術(shù)實驗二十九 染色體標(biāo)本G顯帶制備實驗三十 染色體C顯帶技術(shù)實驗三十一 人類染色體非顯帶核型分析實驗三十二 人類染色體G顯帶核型分析第三章 其他基本實驗技術(shù)實驗一 葡萄糖定量方法——標(biāo)準(zhǔn)管法測定葡萄糖含量實驗二 流式細(xì)胞術(shù)(示教)實驗三 圖像分析/電鏡觀察(示教)一、圖像分析二、電子顯微鏡觀察第四章 綜合實驗實驗一 基因組DNA分析一、高分子量DNA的提取與純化二、DNA的酶解三、瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段四、DNA轉(zhuǎn)移五、探針標(biāo)記六、核酸分子雜交實驗二 兔肝堿性磷酸酶(AKP)的純化及Km的測定一、有機溶劑法部分純化兔肝AKP二、AKP比活性測定三、DEAE纖維素(DE-52)離子交換層析進一步純化AKP四、AKP Km測定五、結(jié)果實驗三 細(xì)胞凋亡檢測一、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)二、瓊脂糖凝膠檢測凋亡細(xì)胞DNA ladder三、TUNEL法檢測凋亡細(xì)胞實驗四 臨床標(biāo)本處理、核酸、蛋白質(zhì)表達和染色體定位一、常見組織細(xì)胞的培養(yǎng)方法二、腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)方法三、細(xì)胞的凍存、解凍和計數(shù)方法四、細(xì)胞與組織核酸的非放射性標(biāo)記原位雜交檢測技術(shù)五、免疫細(xì)胞和組織異常蛋白表達的檢測六、基因的染色體定位七、FISH技術(shù)與檢測第五章 設(shè)計性實驗引導(dǎo)第一節(jié) 設(shè)計性實驗概述第二節(jié) 設(shè)計性實驗實驗一 選一種miRNA研究其與臨床的關(guān)系實驗二 腫瘤細(xì)胞或組織相關(guān)細(xì)胞因子檢測分析實驗設(shè)計實驗三 培養(yǎng)環(huán)境中的葡萄糖濃度對細(xì)胞的影響實驗四 人體腫瘤小鼠移植瘤的建立和實驗實驗五 糖代謝與腫瘤診斷和治療實驗六 中藥提取物對人類疾病的治療作用實驗七 免疫細(xì)胞亞群分離與鑒定實驗八 細(xì)胞因子的測定實驗九 外環(huán)境對免疫功能影響的實驗設(shè)計實驗十 免疫學(xué)快速檢測方法的實驗設(shè)計實驗十一 三體綜合征的產(chǎn)前診斷方法實驗十二 鐮形紅細(xì)胞貧血的診斷方法附錄附錄一 實驗誤差及其產(chǎn)生原因與糾正附錄二 實驗室注意事項及應(yīng)急處理
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