現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法

前言

經(jīng)過(guò)兩度春秋，本書的修訂再版終于同讀者見(jiàn)面了，我們感到由衷的欣慰。本書第1版是由國(guó)內(nèi)外54個(gè)醫(yī)學(xué)院校、科研機(jī)構(gòu)中的162位博士／博士后編寫、由76位老一輩專家審閱、內(nèi)容涵蓋廣泛的一本基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究參考書。本書于1997年由人民衛(wèi)生出版社正式出版，至今已有11年時(shí)間。近年來(lái)，新的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法不斷涌現(xiàn)，技術(shù)革新日新月異，因此，從醫(yī)學(xué)研究的前沿性考慮，我們根據(jù)本書編委會(huì)的討論意見(jiàn)，于2005年8月召開(kāi)的首屆中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究方法暨學(xué)科交叉創(chuàng)新研討會(huì)（CSMECKI會(huì)議）上組織了本書的修訂再版工作。本次修訂再版共有11位新編委和32位新參編人員加入，修訂歷時(shí)2年時(shí)間。新完成的第2版《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法》全書共200萬(wàn)字，收集了近年來(lái)最新的實(shí)驗(yàn)方法。主要內(nèi)容包括形態(tài)學(xué)方法、細(xì)胞功能研究方法、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)與細(xì)胞因子、分子生物學(xué)方法、免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)化學(xué)分析方法、整體與器官功能、動(dòng)物及疾病模型、科研設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析等10個(gè)方面。修改后的《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法》刪除了部分陳舊或少用的方法，納入了近10年最新和常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。如：第2版新增的“掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)”、“RNA干擾技術(shù)”、“生物芯片技術(shù)”均為近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)。內(nèi)容上，第2版較第1版更加全面、新穎和實(shí)用。在新、老編委共同努力下完成的第2版《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法》，是集體智慧的結(jié)晶，也是眾多科技工作者辛勤勞動(dòng)及合作的成果，包含了經(jīng)過(guò)無(wú)數(shù)次科研實(shí)踐總結(jié)得出的實(shí)用、可行和獨(dú)特的新方法。相信本書將對(duì)推動(dòng)我國(guó)醫(yī)學(xué)科研的發(fā)展具有重要的指導(dǎo)作用與參考價(jià)值。由于參編者眾多，大家又是在不同地方分頭寫作，所以雖然大家為此書的編寫投入了極大的熱情，我們?cè)诮y(tǒng)編中也花費(fèi)了大量的時(shí)間，但不妥之處難免，望廣大前輩和同道們不吝指正。從有編書的想法，組織實(shí)施，到完成書稿及統(tǒng)編工作，這不知疲倦的600多個(gè)日日夜夜給我們留下了許多難忘的回憶，我們深深感謝中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院、佳木斯大學(xué)醫(yī)學(xué)院、蚌埠醫(yī)學(xué)院以及其他各大醫(yī)學(xué)院校的領(lǐng)導(dǎo)、老師及同志們，感謝他們大力支持和積極參與本書的編寫和修訂再版工作，是他們?cè)谔峁┍憷耐瑫r(shí)，又給予了必要的人力、物力支援，我們也感謝那些為此書的編著而付出勞動(dòng)的人們，雖然此書的編寫已告一段落，但那么多難忘的同志之誼、同學(xué)之情都已深深地印在我們的腦海中。

內(nèi)容概要

　　《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法(精)》為《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法》之第二版，全書共230余萬(wàn)字，收集了近年來(lái)最新的實(shí)驗(yàn)方法，主要內(nèi)容包括有形態(tài)學(xué)方法、細(xì)胞功能研究方法、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)與細(xì)胞因子、分子生物學(xué)方法、免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)化學(xué)分析方法、整體與器官功能、動(dòng)物及疾病模型、科研設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析等10個(gè)方面?？晒└鞔髮Ｔ盒Ｗ鳛榻滩氖褂茫部晒氖孪嚓P(guān)工作的人員作為參考用書使用。

書籍目錄

第一篇 形態(tài)學(xué)方法第一章 形態(tài)學(xué)電鏡技術(shù)第一節(jié) 透射電鏡技術(shù)一、基本原理二、超薄切片技術(shù)三、觀察及記錄第二節(jié) 掃描電鏡技術(shù)一、概況二、掃描電鏡的生物樣品制備三、鑄型掃描技術(shù)第三節(jié) 冷凍制樣和冷凍蝕刻電鏡技術(shù)一、物理固定（冷凍固定）二、快速冷凍方法三、冷凍蝕刻樣品制備四、冷凍蝕刻圖像的解釋五、冷凍置換法六、冷凍超薄切片技術(shù)第四節(jié) 免疫電鏡技術(shù)一、概述二、鐵蛋白免疫電鏡技術(shù)三、酶免疫電鏡技術(shù)四、膠體金免疫電鏡技術(shù)五、其他免疫電鏡技術(shù)第五節(jié) 電鏡原位雜交技術(shù)一、概述二、幾種電鏡原位雜交技術(shù)操作程序三、電鏡原位雜交的注意事項(xiàng)第六節(jié) 電鏡酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、基本原理二、樣品制備基本流程三、常用的電鏡酶細(xì)胞化學(xué)方法四、電鏡酶細(xì)胞化學(xué)的注意事項(xiàng)第七節(jié) 電鏡X射線顯微分析技術(shù)一、基本原理和檢查方法二、生物樣品制備方法三、電鏡X射線顯微分析技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用第八節(jié) 電鏡放射自顯影技術(shù)一、放射性核素標(biāo)記二、電鏡放射自顯影樣品制備第九節(jié) 負(fù)染色技術(shù)一、染色液二、染色方法三、注意事項(xiàng)四、負(fù)染色結(jié)果的判讀第十節(jié) 原子力顯微鏡一、概述二、原子力顯微鏡操作方法三、原子力顯微鏡的應(yīng)用第二章 逆行追蹤及免疫細(xì)胞化學(xué)方法第一節(jié) 辣根過(guò)氧化物酶法一、基本原理二、主要儀器設(shè)備三、主要試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第二節(jié) 熒光素逆行標(biāo)記法一、原理及應(yīng)用二、儀器設(shè)備三、試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第三節(jié) 免疫熒光法一、原理及應(yīng)用二、主要儀器設(shè)備三、主要試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第四節(jié) 酶標(biāo)記抗體法一、原理及應(yīng)用二、主要儀器設(shè)備三、主要試劑四、染色步驟五、注意事項(xiàng)第五節(jié) 非標(biāo)記抗體過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶法（PAP法）一、原理及應(yīng)用二、主要儀器設(shè)備三、主要試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第六節(jié) 抗生物素蛋白.生物素.過(guò)氧化物酶復(fù)合體法（ABC法）一、原理及應(yīng)用二、儀器設(shè)備三、主要試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第七節(jié) HRP逆行追蹤與免疫細(xì)胞化學(xué)（PAP法）結(jié)合法一、原理及應(yīng)用二、儀器設(shè)備和試劑三、實(shí)驗(yàn)步驟四、注意事項(xiàng)第八節(jié) 熒光素逆行標(biāo)記與免疫熒光結(jié)合法一、原理及應(yīng)用二、儀器設(shè)備三、主要試劑四、實(shí)驗(yàn)步驟五、注意事項(xiàng)第九節(jié) 雙重和多重免疫標(biāo)記一、基本原理二、標(biāo)記方法第十節(jié) 免疫組織化學(xué)染色操作的注意事項(xiàng)、對(duì)照設(shè)計(jì)及結(jié)果判斷一、免疫組織化學(xué)染色操作的注意事項(xiàng)二、對(duì)照設(shè)計(jì)三、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果的判斷第三章 掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)第一節(jié) 基本原理一、激光光源二、激光共聚焦顯微鏡的成像原理三、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)四、激光掃描共聚焦顯微鏡在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用第二節(jié) 熒光定性、定量測(cè)量一、標(biāo)本的制備二、激光掃描共聚焦顯微鏡掃描和采集樣品圖像的一般步驟三、熒光探針的性質(zhì)四、熒光的定性和定量測(cè)量第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)分析、功能和應(yīng)用一、實(shí)驗(yàn)分析的信息形式二、直方圖分析三、動(dòng)態(tài)觀察四、熒光光漂白后的光恢復(fù)——活細(xì)胞內(nèi)分子運(yùn)動(dòng)的測(cè)定五、細(xì)胞間通訊的測(cè)定六、免疫熒光的定量測(cè)定七、生物活性物質(zhì)活性封閉解封閉的測(cè)定八、細(xì)胞膜流動(dòng)性的測(cè)定九、細(xì)胞斷層掃描與三維重建十、黏附細(xì)胞分選十一、細(xì)胞激光顯微外科術(shù)第四節(jié) 常用熒光染料的染色方法一、用BCECF測(cè)定pH值二、用SNARF定量定比例測(cè)定pH值三、用Indo-1測(cè)量細(xì)胞內(nèi)Ca2+四、用Fluo-3測(cè)定細(xì)胞內(nèi)Ca2+五、用CFDA測(cè)定細(xì)胞間通訊六、用DiBAC測(cè)定膜電位的變化七、用Rhodamine123標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體八、用AO熒光染色顯示RNA和DNA九、用PI和EB熒光染色顯示DNA第四章 形態(tài)測(cè)量學(xué)方法第一節(jié) 目鏡測(cè)微器定量分析一、概述二、測(cè)量工具的使用方法三、二維圖像的測(cè)量四、三維結(jié)構(gòu)參數(shù)的計(jì)算第二節(jié) 定量分析的影響因素一、誤差分析二、切片組織變化對(duì)估計(jì)的影響三、切片厚度的影響四、抽樣原則第三節(jié) 計(jì)算機(jī)圖像分析和三維結(jié)構(gòu)重建一、概述二、圖像分析儀簡(jiǎn)介三、圖像分析儀工作程序四、三維結(jié)構(gòu)重建切片的制作、定位和圖像輸入第五章 常規(guī)組織形態(tài)學(xué)研究方法第一節(jié) HE染色的應(yīng)用和局限性一、HE染色原理二、染液及溶液的配制三、染色程序和方法四、染色結(jié)果五、HE染色的應(yīng)用和局限性六、HE染色常見(jiàn)問(wèn)題及其處理方法第二節(jié) 固定液的選擇及要點(diǎn)一、常用固定劑的成分和作用二、常用固定液三、固定液的選擇及應(yīng)用要點(diǎn)第三節(jié) 特殊細(xì)胞的形態(tài)學(xué)鑒定方法一、肺泡Ⅱ型細(xì)胞二、胃腺上皮細(xì)胞三、潘氏細(xì)胞四、產(chǎn)肽激素細(xì)胞（APUD細(xì)胞）五、腎小球旁細(xì)胞六、垂體細(xì)胞七、松果體細(xì)胞八、胰島細(xì)胞九、嗜鉻細(xì)胞十、肥大細(xì)胞十一、神經(jīng)元的鑒定方法十二、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞十三、神經(jīng)干細(xì)胞第六章 原位分子雜交及應(yīng)用第一節(jié) 原位分子雜交組織化學(xué)技術(shù)基本原則一、雜交前準(zhǔn)備二、雜交三、雜交后處理四、雜交后顯示五、對(duì)照實(shí)驗(yàn)和原位雜交結(jié)果的判斷第二節(jié) 原位雜交探針制備和標(biāo)記一、探針制備二、探針標(biāo)記三、核苷酸探針標(biāo)記第三節(jié) 常見(jiàn)原位雜交方法一、組織和細(xì)胞的原位分子雜交二、熒光原位雜交三、原位末端標(biāo)記技術(shù)（PRINS）四、原位聚合酶鏈反應(yīng)（ISPCR）第二篇 細(xì)胞功能檢測(cè)方法第七章 普通細(xì)胞培養(yǎng)方法第一節(jié) 培養(yǎng)室儀器設(shè)備及試劑一、培養(yǎng)室儀器、器械及器皿二、培養(yǎng)試劑第二節(jié) 細(xì)胞分離技術(shù)一、梯度沉降分離法二、等密度沉降分離法三、流式細(xì)胞儀分離法第三節(jié) 原代分離細(xì)胞培養(yǎng)一、原理和應(yīng)用二、實(shí)驗(yàn)步驟三、注意事項(xiàng)第四節(jié) 細(xì)胞克隆化一、有限稀釋法二、平皿克隆分離法三、軟瓊脂克隆分離法四、單細(xì)胞顯微操作法第五節(jié) 組織塊培養(yǎng)一、原理和應(yīng)用二、實(shí)驗(yàn)步驟三、注意事項(xiàng)第六節(jié) 器官培養(yǎng)方法一、表玻皿器官培養(yǎng)法二、不銹鋼金屬網(wǎng)格法三、Maximow單蓋片法四、Wolff培養(yǎng)法五、擴(kuò)散盒培養(yǎng)法第七節(jié) 無(wú)血清培養(yǎng)一、無(wú)血清培養(yǎng)基的組成二、在原代培養(yǎng)細(xì)胞中的應(yīng)用三、注意事項(xiàng)第八節(jié) 體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞培養(yǎng)新技術(shù)一、體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)（動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞接種）二、細(xì)胞培養(yǎng)新技術(shù)第九節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)中飼（滋）養(yǎng)細(xì)胞的制備及成纖維細(xì)胞的去除一、飼（滋）養(yǎng)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的制備二、細(xì)胞培養(yǎng)中多余成纖維細(xì)胞的去除第十節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)中污染檢測(cè)和排除一、污染的概念二、污染種類及表現(xiàn)三、污染的預(yù)防及消除四、支原體污染的對(duì)策第十一節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的觀察一、細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)檢查（活細(xì)胞直接觀察）二、細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)第十二節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運(yùn)輸一、細(xì)胞凍存二、復(fù)蘇方法三、細(xì)胞運(yùn)輸?shù)诎苏?特殊細(xì)胞培養(yǎng)方法及細(xì)胞培養(yǎng)方法的應(yīng)用第一節(jié) 胚胎干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和純化一、試劑及其配制二、胚胎干細(xì)胞和培養(yǎng)三、飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備四、胚胎干細(xì)胞的鑒定五、胚胎干細(xì)胞的建系第二節(jié) 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)方法一、概述二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物年齡的選擇三、培養(yǎng)方法四、培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的觀察和鑒定五、注意事項(xiàng)第三節(jié) 神經(jīng)干細(xì)胞分離培養(yǎng)與純化一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物年齡的選擇二、大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)（新生大鼠腦皮質(zhì)）三、人類神經(jīng)干細(xì)胞分離培養(yǎng)四、神經(jīng)干細(xì)胞的傳代與純化五、神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定六、神經(jīng)干細(xì)胞系的建立第四節(jié) 肝細(xì)胞、Kupffer和Ito細(xì)胞的分離與培養(yǎng)一、概述二、細(xì)胞的分離與培養(yǎng)三、注意事項(xiàng)第五節(jié) 血管平滑肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)一、血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)方法二、原代培養(yǎng)的平滑肌形態(tài)及其鑒別第六節(jié) 心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)一、概述二、乳鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)三、成年鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)第七節(jié) 內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)一、培養(yǎng)方法二、內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定三、注意事項(xiàng)第八節(jié) 造血干細(xì)胞培養(yǎng)一、造血干細(xì)胞的采集二、造血干細(xì)胞的分離和保存三、造血干細(xì)胞的體外擴(kuò)增第九節(jié) 人外周血淋巴細(xì)胞短期培養(yǎng)一、儀器設(shè)備二、培養(yǎng)方法第十節(jié) 特殊免疫細(xì)胞的培養(yǎng)一、LAK細(xì)胞的制備二、TIL細(xì)胞的制備三、胸腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)第十一節(jié) 脂肪細(xì)胞培養(yǎng)一、脂肪細(xì)胞來(lái)源二、脂肪細(xì)胞的分離純化與鑒別三、培養(yǎng)方法四、脂肪細(xì)胞生物學(xué)性狀觀察第十二節(jié) 人皮膚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)一、試劑二、實(shí)驗(yàn)步驟第三篇 亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能檢測(cè)方法第四篇 蛋白質(zhì)與細(xì)胞因子的功能檢測(cè)第五篇 分子生物學(xué)方法第六篇 免疫學(xué)方法第七篇 醫(yī)學(xué)化學(xué)分析方法第八篇 整體功能與器官功能檢測(cè)方法第九篇 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、動(dòng)物手術(shù)和動(dòng)物模型第十篇 醫(yī)學(xué)科研設(shè)計(jì)、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、醫(yī)學(xué)科研結(jié)果的計(jì)算機(jī)處理

章節(jié)摘錄

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《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法(第2版)》為人民衛(wèi)生出版社出版。

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