食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)

內(nèi)容概要

微生物學(xué)是生命科學(xué)研究中最活躍的學(xué)科領(lǐng)域，而微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)是微生物學(xué)建立和發(fā)展的基礎(chǔ)，
曾為整個(gè)生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展做出過(guò)積極而重要的貢獻(xiàn)，
同時(shí)也是生物工程技術(shù)的核心和主體。隨著分子生物學(xué)的誕生，各學(xué)科相互交叉滲透，極大地豐富了微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)的內(nèi)容，并將其推向一個(gè)新的發(fā)展階段。而微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)也廣泛地滲透到了現(xiàn)代生命科學(xué)的各個(gè)分支領(lǐng)域，不斷發(fā)揮著它的獨(dú)特作用。
因此，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門十分重要的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)。
為了適應(yīng)21世紀(jì)科學(xué)技術(shù)更為迅猛發(fā)展的需要，迎接微生物學(xué)迅速向分子生物學(xué)水平和微生物產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的機(jī)遇和挑戰(zhàn)，為社會(huì)培養(yǎng)微生物領(lǐng)域的高素質(zhì)科技人才，教育部在面向21世紀(jì)課程教材、普通高等教育“十五”國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材的基礎(chǔ)上，評(píng)選出了一批優(yōu)秀的教材作為“十一五”國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材來(lái)進(jìn)一步完善和提高，而《食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)》就是其中的一本。本教材在“十五”期間與江漢湖主編的《食品微生物學(xué)》相配套，很好地服務(wù)了全國(guó)各高校的食品微生物學(xué)教學(xué)。此次是在第一版的基礎(chǔ)上進(jìn)行的修改與完善。
本教材針對(duì)食品微生物學(xué)是多學(xué)科組成的特點(diǎn)，分析總結(jié)了以往開(kāi)課內(nèi)容及效果，適當(dāng)刪除了某些已經(jīng)淘汰、過(guò)時(shí)或不太重要的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容；集中或改變一些原來(lái)分別在普通微生物學(xué)、微生物生理學(xué)、微生物遺傳學(xué)、食品微生物學(xué)、發(fā)酵微生物學(xué)、衛(wèi)生微生物學(xué)和發(fā)酵食品學(xué)中單獨(dú)開(kāi)設(shè)的小實(shí)驗(yàn)，編寫成系統(tǒng)、連貫、實(shí)踐性強(qiáng)、教學(xué)效果較好的實(shí)驗(yàn)系列；
同時(shí)增加了一些近年來(lái)新出現(xiàn)的與食品加工、保鮮及安全關(guān)系較為密切的相關(guān)微生物的檢測(cè)以及具有某種益生功能特性微生物菌株選育的內(nèi)容；此外，還增加了一些現(xiàn)代分子微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法與新技術(shù)，力求做到既避免與理論教材脫節(jié)，又能啟發(fā)學(xué)生的主動(dòng)思考能力和創(chuàng)新思維能力。我們希望通過(guò)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)讓學(xué)生驗(yàn)證理論，鞏固和加深理解所學(xué)過(guò)的知識(shí)，熟悉和掌握微生物基本實(shí)驗(yàn)操作技能，培養(yǎng)學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際、獨(dú)立分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，進(jìn)一步啟發(fā)和提高學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)和創(chuàng)新能力。

書籍目錄

第二版前言
　第一版前言
　食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室守則
　 第一部分 食品微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)1 普通光學(xué)顯微鏡的使用
　實(shí)驗(yàn)2 電子顯微鏡樣品的制備及使用
　實(shí)驗(yàn)3 細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色
　實(shí)驗(yàn)4 細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的染色
　實(shí)驗(yàn)5 放線菌的形態(tài)觀察
　實(shí)驗(yàn)6 酵母菌形態(tài)的觀察及死活細(xì)胞的鑒別
　實(shí)驗(yàn)7 霉菌形態(tài)的觀察及郝氏霉菌計(jì)數(shù)法
　實(shí)驗(yàn)8 微生物的培養(yǎng)特征觀察
　實(shí)驗(yàn)9 微生物細(xì)胞大小的測(cè)量
　實(shí)驗(yàn)10 微生物細(xì)胞數(shù)量的直接計(jì)數(shù)法
　實(shí)驗(yàn)11 培養(yǎng)基的制備與滅菌方法
　實(shí)驗(yàn)12 微生物的分離、純化與接種技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)13 單細(xì)胞微生物生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)14 用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物的營(yíng)養(yǎng)要求
　實(shí)驗(yàn)15 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的微生物檢測(cè)
　實(shí)驗(yàn)16 環(huán)境因素對(duì)微生物生命活動(dòng)的影響
　實(shí)驗(yàn)17 微生物鑒定用生理生化試驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)18 微生物的微量診斷系統(tǒng)
　實(shí)驗(yàn)19 微生物的菌種保藏技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)20 微生物的人工誘變育種技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)2l 微生物菌種的復(fù)壯技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)22 絲狀真菌原生質(zhì)體制備、融合及再生技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)23 細(xì)菌的凝集實(shí)驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)24 瓊脂免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)25 熒光抗體技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)26 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)
　實(shí)驗(yàn)27 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌及其檢測(cè)
　實(shí)驗(yàn)28 細(xì)菌DNA G十C摩爾百分含量的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)29 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)體外擴(kuò)增DNA
　實(shí)驗(yàn)30 16S rRNA序列分析及其同源性分析
　實(shí)驗(yàn)31 脈沖電場(chǎng)凝膠電泳分離大分子DNA
第二部分 食品微生物學(xué)安全實(shí)驗(yàn)技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)32 食品中細(xì)菌菌落總數(shù)的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)33 食品中大腸菌群的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)34 食品中糞大腸菌群的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)35 食品中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)36 食品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)37 食品中沙門氏菌屬的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)38 食品中志賀氏菌屬的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)39 食品中大腸桿菌O157：H7的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)40 食品中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)41 食品中副溶血性弧菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)42 食品中空腸彎曲菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)43 食品中肉毒梭狀芽孢桿菌及肉毒毒素的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)44 食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)45 冷卻肉中假單胞菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)46 真空包裝肉及肉制品中熱殺索絲菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)47 罐頭食品中平酸菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)48 奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)49 鮮乳中抗生素殘留檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)50 噬菌體的檢測(cè)
　實(shí)驗(yàn)51 食品中霉菌的計(jì)數(shù)及生物量的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)52 蘋果汁中棒曲霉素的檢測(cè)
　實(shí)驗(yàn)53 食品中黃曲霉毒素的檢測(cè)
　實(shí)驗(yàn)54 化學(xué)誘變劑的微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)——Ames法
　實(shí)驗(yàn)55 食品加工過(guò)程中微生物的快速檢測(cè)
第三部分 食品微生物學(xué)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)技術(shù)
　實(shí)驗(yàn)56 食品中乳酸菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)57 雙歧桿菌的檢驗(yàn)
　實(shí)驗(yàn)58 厭氧菌的分離、培養(yǎng)及活菌計(jì)數(shù)
　實(shí)驗(yàn)59 酸乳中乳酸菌活力的測(cè)定
　實(shí)驗(yàn)60 鮮牛乳自然發(fā)酵過(guò)程中微生物菌相變化測(cè)定
　……
附錄
主要參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：   插圖：   1份加等量多型混合肉毒抗毒診斷血清，混勻，37℃作用30min；1份加等量明膠磷酸鹽緩沖液，混勻，煮沸10min；1份加等量明膠磷酸鹽緩沖液，混勻即可，不做其他處理。3份混合液分別注射小白鼠各2只，每只0.5mL，觀察4d，若注射診斷血清與煮沸加熱的2份混合液的小白鼠均獲保護(hù)存活，而唯有注射未經(jīng)其他處理的混合液的小白鼠以特有癥狀死亡，則可判定檢樣中有肉毒毒素存在，必要時(shí)進(jìn)行毒力測(cè)定及定型試驗(yàn)。 （3）毒力測(cè)定：取已判定含有肉毒毒素的檢樣離心上清液，用明膠磷酸鹽緩沖液做成50倍、500倍及5 000倍的稀釋液，分別注射小白鼠各2只，每只0.5mL，觀察4d。根據(jù)動(dòng)物死亡情況，計(jì)算檢樣中所含肉毒毒素的大體毒力（MLD／mL或MLD／g）。例如，5倍、50倍及500倍稀釋致動(dòng)物全部死亡，而注射5 000倍稀釋液的動(dòng)物全部存活，則可大體判定檢樣上清液所含毒素的毒力為1 000～10 000MLD／mL。 （4）定型試驗(yàn)：按毒力測(cè)定結(jié)果，用明膠磷酸鹽緩沖液將檢樣上清液稀釋至所含毒素的毒力大體在10～1 000MLD／mL的范圍，分別與各單型肉毒抗毒診斷血清等量混勻，37℃作用30min，各注射小白鼠2只，每只0.5mL，觀察4d。同時(shí)以明膠磷酸鹽緩沖液代替診斷血清，與稀釋毒素液等量混合作為對(duì)照。能保護(hù)動(dòng)物免于發(fā)病、死亡的診斷血清型即為檢樣所含肉毒毒素的型別。 （5）結(jié)果分析：食物中發(fā)現(xiàn)毒素，表明未經(jīng)充分的加熱處理，可能引起肉毒中毒。檢出肉毒梭菌，但未檢出肉毒毒素，不能證明此食物會(huì)引起肉毒中毒。肉毒中毒診斷必須以檢出食物中的肉毒毒素為準(zhǔn)。 5.2 肉毒梭菌檢出（增菌產(chǎn)毒培養(yǎng)試驗(yàn)） 肉毒梭菌檢驗(yàn)方法的重點(diǎn)乃是產(chǎn)毒及毒素的檢出試驗(yàn)，如果要證實(shí)是否有肉毒梭菌存在，只要分離、培養(yǎng)、毒素鑒定即可。 取庖肉培養(yǎng)基3支，煮沸10～15min做如下處理： 第1支急速冷卻，接種檢樣均質(zhì)液1～2mL；第2支冷卻至60℃，接種檢樣，繼續(xù)于60℃保溫10min后急速冷卻；第3支接種檢樣，繼續(xù)煮沸加熱10min后急速冷卻。 以上接種物于30℃培養(yǎng)5d，若無(wú)生長(zhǎng)，可再培養(yǎng)10d。培養(yǎng)到期，若有生長(zhǎng)，取培養(yǎng)液離心，以其上清液進(jìn)行毒素檢測(cè)試驗(yàn)，方法同5.1，陽(yáng)性結(jié)果證明檢樣中有肉毒梭菌存在。 5.3分離培養(yǎng)選取經(jīng)毒素檢測(cè)試驗(yàn)證實(shí)含有肉毒梭菌的前述增菌產(chǎn)毒培養(yǎng)物（必要時(shí)可重復(fù)一次適宜的加熱處理）接種卵黃瓊脂平板，35℃厭氧培養(yǎng)48h。肉毒梭菌在卵黃瓊脂平板上生長(zhǎng)時(shí)，菌落及周圍培養(yǎng)基表面覆蓋特有的彩虹樣（或珍珠層樣）薄層，但G型菌無(wú)此現(xiàn)象。 根據(jù)菌落形態(tài)及菌體形態(tài)挑取可疑菌落，接種庖肉培養(yǎng)基，于30℃培養(yǎng)5d，進(jìn)行毒素檢測(cè)及培養(yǎng)特性檢查確證試驗(yàn)。 （1）毒素檢測(cè)：試驗(yàn)方法同5.1。 （2）培養(yǎng)特性檢查：接種卵黃瓊脂平板，分成兩份，分別在35℃的需氧和厭氧條件下培養(yǎng)48h，觀察生長(zhǎng)情況及菌落形態(tài)。肉毒梭菌只有在厭氧條件下才能在卵黃瓊脂平板上生長(zhǎng)并形成具有上述特征的菌落，而在需氧條件下則不生長(zhǎng)。

編輯推薦

《普通高等教育"十一五"國(guó)家級(jí)規(guī)劃教材?北京高等教育精品教材:食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)(第2版)》取材廣泛、涉及面廣、內(nèi)容新穎、結(jié)構(gòu)合理、重點(diǎn)突出，主要是作為高等院校食品科學(xué)與工程專業(yè)、食品生物工程專業(yè)、食品質(zhì)量與安全專業(yè)的主干課程——食品微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)課教材。當(dāng)然，此書也可供上述領(lǐng)域從事與食品微生物相關(guān)工作的有關(guān)教師及科技人員參考。

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