生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程

內(nèi)容概要

　　《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程》是編者在多年生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)基礎(chǔ)上，反復(fù)摸索，以專題模塊的形式編寫(xiě)而成?！渡锘瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程》第一篇介紹了實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理，包括離心技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、光譜技術(shù)和生物大分子的分離純化。第二篇包括糖化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、脂質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、核酸化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、酶學(xué)及維生素實(shí)驗(yàn)技術(shù)、物質(zhì)代謝實(shí)驗(yàn)技術(shù)、常見(jiàn)生物活性物質(zhì)分離分析技術(shù)、分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)選題和實(shí)驗(yàn)論文撰寫(xiě)10個(gè)模塊，共82項(xiàng)實(shí)驗(yàn)和20項(xiàng)選題。既有基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，又有綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。附錄介紹了常用試劑的配制與標(biāo)定、常用酸堿指示劑以及市售酸堿試劑的介紹等。

書(shū)籍目錄

第一篇 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理第一章 離心技術(shù)及原理1.1 離心基本原理1.2 離心機(jī)的結(jié)構(gòu)與分類1.3 離心機(jī)的應(yīng)用第二章 層析技術(shù)及原理2.1 層析概述2.2 常用層析技術(shù)第三章 電泳技術(shù)及原理3.1 電泳概述3.2 常用電泳技術(shù)第四章 光譜技術(shù)及原理4.1 分光光度法4.2 旋光分析法第五章 生物大分子的分離純化5.1 分離純化概述5.2 生物材料的選擇和前處理5.3 常用生物大分子分離純化技術(shù)5.4 樣品的保存第二篇 生物化學(xué)模塊實(shí)驗(yàn)第一模 塊糖化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.1 糖化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)1 糖的還原作用實(shí)驗(yàn)2 糖的旋光性和變旋現(xiàn)象(糖含量測(cè)定)1.2 糖的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)1血糖濃度的測(cè)定(鄰甲苯胺法)實(shí)驗(yàn)2蒽酮比色法測(cè)定植物組織中總糖含量實(shí)驗(yàn)3 3，5-二硝基水楊酸法測(cè)定總糖與還原糖含量第二模塊 脂質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)2.1 脂肪提取及含量和性質(zhì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 脂肪酸價(jià)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)2 油脂皂化值的測(cè)定實(shí)驗(yàn)3 粗脂肪提取與含量的測(cè)定(索氏抽提法)實(shí)驗(yàn)4 血清甘油三酯含量測(cè)定(乙酰丙酮顯色法)2.2 血清膽固醇的定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 磷硫鐵法測(cè)定血清膽固醇含量實(shí)驗(yàn)2 鄰苯二甲醛法測(cè)定血清膽固醇含量實(shí)驗(yàn)3 乙酸酐法測(cè)定血清膽固醇含量2.3 肝中丙二醛含量的測(cè)定第三模塊 蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)3.1 蛋白質(zhì)與氨基酸的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1 蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)實(shí)驗(yàn)2 蛋白質(zhì)的沉淀作用實(shí)驗(yàn)3 蛋白質(zhì)的鹽析和透析3.2 牛乳中酪蛋白的制備3.3 蛋白質(zhì)和氨基酸的層析分離實(shí)驗(yàn)1 氨基酸紙層析實(shí)驗(yàn)2 氨基酸的薄層層析實(shí)驗(yàn)3 離子交換層析分離蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)4 凝膠過(guò)濾層析測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量3.4 蛋白質(zhì)和氨基酸含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 植物組織中賴氨酸含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)2 考馬斯亮藍(lán)(G-250)比色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)3 Folin-酚法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)4 紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)5 微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量3.5 蛋白質(zhì)電泳分析實(shí)驗(yàn)1 乙酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白實(shí)驗(yàn)2 聚丙烯酰胺凝膠盤(pán)狀電泳分離血清蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)3 SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量實(shí)驗(yàn)4 等電聚焦電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)5 SDS-PAGE檢測(cè)植物中熱激蛋白(銀染法)第四模塊 核酸化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)4.1 核苷酸的分析測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 紙電泳法測(cè)定腺苷三磷酸(ATP)含量實(shí)驗(yàn)2 薄層層析法分離核苷酸實(shí)驗(yàn)3 離子交換柱層析分離單核苷酸實(shí)驗(yàn)4 5'核苷酸含量測(cè)定(過(guò)碘酸氧化法)4.2 核酸含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 定磷法測(cè)定核酸含量實(shí)驗(yàn)2 紫外分光光度法測(cè)定核酸含量4.3 核酸的提取及分析實(shí)驗(yàn)1 動(dòng)物肝DNA的提取及含量測(cè)定(二苯胺法)實(shí)驗(yàn)2 酵母RNA的提取及組成成分鑒定實(shí)驗(yàn)3 動(dòng)物肝組織中核酸的制備與測(cè)定第五模塊 酶學(xué)及維生素實(shí)驗(yàn)技術(shù)5.1 酶的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1 溫度與pH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響實(shí)驗(yàn)2 酶的專一性實(shí)驗(yàn)3 唾液淀粉酶的激活與抑制作用5.2 酶 促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1 影響酶活力的因素——正交實(shí)驗(yàn)法實(shí)驗(yàn)2 胰蛋白酶米氏常數(shù)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)3 過(guò)氧化氫酶米氏常數(shù)測(cè)定5.3 酶活力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)1 淀粉酶的活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)2 酸性磷酸酯酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)3 膽堿酯酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4 肝丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)5 血清氨基轉(zhuǎn)移酶活性的測(cè)定——賴氏比色法實(shí)驗(yàn)6 超氧化物歧化酶(SOD)活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)7 溶菌酶的分離純化和活力測(cè)定5.4 同工酶分析實(shí)驗(yàn)1 瓊脂糖凝膠電泳法分離LDH同工酶及血清LDH總活力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)2 植物過(guò)氧化物酶同工酶測(cè)定……主要參考文獻(xiàn)參考網(wǎng)頁(yè)地址

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：插圖：在生命科學(xué)迅猛發(fā)展的今天，蛋白質(zhì)、酶和核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能是探求生命奧秘的中心課題，而生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究，必須首先解決生物大分子的制備問(wèn)題，沒(méi)有足夠純度的生物大分子，結(jié)構(gòu)和功能的研究就無(wú)從談起。因此，生物大分子分離純化手段的發(fā)展直接推動(dòng)了人們對(duì)生物化學(xué)過(guò)程的了解。然而，生物大分子的分離純化又是一件十分細(xì)致而艱巨的工作，有時(shí)要得到一種高純度的生物大分子，需要付出長(zhǎng)期的艱苦努力。從生產(chǎn)實(shí)踐角度看，分離純化大大提高了人類的生活品質(zhì)。5.1.1生物大分子分離純化的特點(diǎn)與一般的化學(xué)分離制備技術(shù)比較，生物大分子的分離純化有以下主要特點(diǎn)：（1）生物材料的組成極其復(fù)雜。一個(gè)簡(jiǎn)單的大腸桿菌細(xì)胞包含了數(shù)千種化合物，各種化合物的形狀、大小、相對(duì)分子質(zhì)量和理化性質(zhì)都各不相同，許多化合物還不為人們所認(rèn)識(shí)，而且很多化合物在分離時(shí)還處在不斷的代謝變化中。所以生物大分子的分離純化方法差別極大，想找到一種適合所有生物大分子分離純化的標(biāo)準(zhǔn)方法是不現(xiàn)實(shí)的，也是不可能的。另一方面，有些生物材料中的化合物與目標(biāo)分子在結(jié)構(gòu)等理化性質(zhì)上非常相似，造成目標(biāo)分子分離純化的難度加大。（2）目標(biāo)分子在生物材料中含量極微。許多目標(biāo)分子在生物材料中的含量只有萬(wàn)分之一、幾十萬(wàn)分之一。甚至百萬(wàn)分之一。如從腦垂體組織中提取某些激素的釋放因子，從蠶體中提取某些信息素，都需要采用幾噸甚至幾十噸的生物材料，才能提取到幾個(gè)毫克的目標(biāo)物質(zhì)。因此，為提高產(chǎn)品回收率，必須優(yōu)化設(shè)計(jì)分離純化過(guò)程，采用正確的技術(shù)路線，并努力開(kāi)發(fā)和應(yīng)用新型高效的分離純化技術(shù)。（3）原料液幾乎都是目標(biāo)物含量較低的水溶液，生化物質(zhì)分離純化方法都是在溶液中進(jìn)行，溫度、pH、離子強(qiáng)度等各種參數(shù)對(duì)溶液中各種組分的綜合影響往往無(wú)法固定，以致實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大的經(jīng)驗(yàn)成分。實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性較差，個(gè)人的實(shí)驗(yàn)技術(shù)水平和經(jīng)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有較大的影響。（4）分離純化過(guò)程要把防止目的物的失活放在首位。一個(gè)生物大分子的分離純化常常少則幾個(gè)步驟，多則十幾個(gè)步驟，并不斷變換各種分離方法，才達(dá)到純化目的。雖然這些方法和流程多數(shù)為溫和方式，但步驟多、時(shí)間長(zhǎng)、目的物可能被自身材料的代謝酶所破壞，或被微生物活動(dòng)所分解或污染，還可能受到酸、堿、鹽、重金屬離子、機(jī)械攪拌、溫度、甚至光線和空氣中的氧的作用而改變或喪失其生理活性。為保持目標(biāo)產(chǎn)物的生物活性和功能，必須設(shè)計(jì)合理的分離純化路線，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)物的快速分離純化，從而獲得高活性目標(biāo)產(chǎn)品。

編輯推薦

《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程》是由高等教育出版社出版的。

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