生物化學(xué)實驗指導(dǎo)

出版時間:2011-2  出版社:高等教育  作者:周楠迪//史鋒//田亞平  頁數(shù):147  
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內(nèi)容概要

  《生物化學(xué)實驗指導(dǎo)》定位于工科類專業(yè)生物化學(xué)實驗課程本科教材,其內(nèi)容基本涵蓋以生物工程、食品工程等專業(yè)為代表的工科類高等學(xué)校本科生生物化學(xué)實驗課程教學(xué)大綱。全書按實驗性質(zhì)和內(nèi)容分為六大篇:生物分子的定性定量測定方法,生物大分子的性質(zhì)研究,酶促反應(yīng)動力學(xué)和酶活力測定,生物分子的分離技術(shù),物質(zhì)代謝過程研究,綜合性、設(shè)計性和研究型實驗。每篇分別按先理論后實驗的順序進行編排,理論部分簡要概括了與生物化學(xué)實驗教學(xué)大綱密切相關(guān)的原理和技術(shù)基礎(chǔ);實驗部分總共提供了42個實驗,包含靜態(tài)生化、物質(zhì)代謝、生物分子的分離分析、綜合性大型實驗等各種類型?!渡锘瘜W(xué)實驗指導(dǎo)》實驗方法敘述詳細,可操作性強,可為相關(guān)專業(yè)學(xué)生提供全面的生物化學(xué)實驗理論和具體實驗操作的指導(dǎo)。

書籍目錄

實驗課要求及實驗室安全規(guī)則第一篇 生物分子的定性定量測定方法1 滴定分析法1.1 酸堿滴定法的原理和操作1.2 氧化還原滴定法的原理和操作2 紫外-可見分光光度法2.1 原理2.2 紫外-可見分光光度計2.3 吸光度的測定和濃度計算3 熒光分光光度法3.1 原理3.2 熒光分光光度計3.3 熒光強度的測定和濃度計算4 電化學(xué)檢測法4.1 原理4.2 電化學(xué)檢測儀4.3 電流值的測定和濃度計算5 其他測定方法6 實驗部分實驗一 總糖和還原糖含量的測定實驗二 葡萄糖傳感器檢測樣品中葡萄糖含量實驗三 玉米種子中色氨酸含量的測定實驗四 蛋白質(zhì)的定量分析I.總氮量的測定——微量凱氏定氮法Ⅱ.Folin-酚試劑法(Lowry法)Ⅲ.考馬斯亮藍染色法(Bradford法)Ⅳ.雙縮脲法V.紫外吸收法實驗五 核酸的定量分析I.紫外分光光度法測定核酸含量Ⅱ.利用糖類的顏色反應(yīng)測定核酸含量Ⅲ.定磷法測定核酸含量(鉬藍比色法)實驗六 維生素B2(核黃素)的熒光測定法實驗七 食物中維生素C的提取和含量測定實驗八 植物材料中總黃酮的提純與鑒定第二篇 生物大分子的性質(zhì)研究7 糖類的理化性質(zhì)7.1 物理性質(zhì)7.2 單糖的氧化反應(yīng)7.3 單糖的強酸脫水和顏色反應(yīng)7.4 多糖的水解8 脂質(zhì)的理化性質(zhì)8.1 物理性質(zhì)8.2 甘油三酯的水解和皂化8.3 不飽和脂肪酸的化學(xué)性質(zhì)8.4 羥基脂肪酸的?;? 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)9.1 膠體性質(zhì)9.2 兩性解離和等電點9.3 沉淀作用9.4 變性作用9.5 顏色反應(yīng)9.6 紫外吸收性質(zhì)10 核酸的理化性質(zhì)10.1 物理性質(zhì)10.2 紫外吸收性質(zhì)10.3 顯色反應(yīng)10.4 變性和復(fù)性11 實驗部分實驗九 糖類的呈色反應(yīng)實驗十 脂肪碘值的測定實驗十一 氨基酸和蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)實驗十二 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點的測定實驗十三 蛋白質(zhì)的沉淀和變性反應(yīng)第三篇 酶促反應(yīng)動力學(xué)和酶活力測定12 酶的概論12.1 酶的概念和分類12.2 酶的催化特點12.3 生物工程常用酶制劑簡介13 酶促反應(yīng)動力學(xué)13.1 底物濃度對酶促反應(yīng)速率的影響13.2 溫度對酶促反應(yīng)速率的影響13.3 pH對酶促反應(yīng)速率的影響13.4 激活劑對酶促反應(yīng)速率的影響13.5 抑制劑對酶促反應(yīng)速率的影響14 酶活力測定14.1 酶活力單位的定義和酶活力的概念14.2 酶活力測定方法的類型和特點15 實驗部分實驗十四 酶作用的專一性實驗十五 酶的激活和抑制實驗十六 底物濃度對酶活性的影響——蔗糖酶米氏常數(shù)的測定實驗十七 過氧化物酶動力學(xué)性質(zhì)分析實驗十八 大麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較實驗十九 糖化型淀粉酶活力的測定實驗二十 發(fā)色底物測定大曲中口-葡萄糖苷酶活力實驗二十一 蛋白酶活力的測定第四篇 生物分子的分離技術(shù)16 生物分離的一般過程和特點17 生物樣品的預(yù)處理17.1 固液分離17.2 細胞的破碎17.3 生物分子的提取技術(shù)18 生物分子的粗分級18.1 濃縮技術(shù)18.2 沉淀技術(shù)18.3 膜分離技術(shù)19 生物分子的細分級19.1 層析技術(shù)19.2 電泳技術(shù)19.3 離心分離技術(shù)20 實驗部分實驗二十二 酵母RNA的提取及其組分的鑒定實驗二十三 核苷酸的DEAE-纖維素薄板層析法實驗二十四 氨基酸紙層析及蛋清氨基酸成分研究實驗二十五 蛋白酶的鹽析沉淀實驗二十六 醋酸纖維薄膜電泳分離蛋白質(zhì)實驗二十七 凝膠過濾層析測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量實驗二十八 SDS-聚丙烯酰胺凝……第五篇 物質(zhì)代謝過程研究第六篇 綜合性、設(shè)計性和研究型實驗參考文獻

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁:插圖:3.1原理物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分能量又以發(fā)射光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光,發(fā)射光的波長比激發(fā)光的波長更長。不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征性激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的不同來定性的進行物質(zhì)鑒定。在進行熒光發(fā)射光譜掃描時,將激發(fā)光波長調(diào)節(jié)到最適當?shù)牟ㄩL處,而記錄樣品在這一固定波長激發(fā)光的激發(fā)下所產(chǎn)生的發(fā)射光在各波長下的熒光強度,這種熒光強度與發(fā)射光波長間的光譜即為熒光發(fā)射光譜。在進行熒光激發(fā)光譜的掃描時,將發(fā)射光的波長調(diào)節(jié)到最適當?shù)臒晒獠ㄩL處,而記錄樣品在各波長的激發(fā)光激發(fā)下所產(chǎn)生的發(fā)射光在這一固定波長下的熒光強度,這種熒光強度與激發(fā)光波長間的光譜即為熒光激發(fā)光譜。當熒光物質(zhì)溶液濃度較低時,在特征性激發(fā)光激發(fā)下,發(fā)射光熒光強度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即F=kc,F(xiàn)為熒光強度,其單位因儀器而異,多為光能量或光子計數(shù)的單位;k為熒光強度和樣品濃度c之間的系數(shù),可通過標樣計算出來,其數(shù)值和單位因儀器的測量條件和F、c的單位而異。利用這種關(guān)系可以進行熒光物質(zhì)的定量分析。3.2熒光分光光度計熒光分光光度計是用于掃描液體或固體熒光標記物所發(fā)出熒光光譜的一種儀器。它能提供激發(fā)光譜、發(fā)射光譜及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命和熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對這些參數(shù)的測定,不但可以定量分析,還能定性鑒定,且可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm。熒光分光光度計由光源、激發(fā)光單色器、樣品室、發(fā)射光單色器、檢測器5個部件組成。光源負責(zé)提供儀器使用波段的連續(xù)光譜,一般為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜,且波長為300~400nm時強度幾乎相等,故較常用。激發(fā)光單色器位于光源和樣品室之間,用于將光源發(fā)射出的連續(xù)光譜分解成特定波長的單色光,將此單色激發(fā)光照射在樣品上。樣品室通常由石英池或固體樣品架組成。在測量液體樣品時,光源與檢測器成直角安排;在測量固體樣品時,光源與檢測器成銳角安排。

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