生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程是生物化學(xué)教學(xué)重要的組成部分，通過(guò)生化實(shí)驗(yàn)技術(shù)相關(guān)理論的學(xué)習(xí)和實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練，培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題等方面能力。進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，我國(guó)高等教育的發(fā)展改革步伐加快，各個(gè)高等農(nóng)林院校的發(fā)展規(guī)模也逐步擴(kuò)大，為了充分發(fā)揮生物化學(xué)作為一門(mén)重要的專業(yè)基礎(chǔ)課在培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和獨(dú)立工作方面所起的不可替代的作用，我們數(shù)所高等農(nóng)林院校的相關(guān)教師結(jié)合多年來(lái)的實(shí)際教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，分工協(xié)作，共同編寫(xiě)了這本實(shí)驗(yàn)教程。本教材從基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)三個(gè)層次進(jìn)行內(nèi)容的編排?；A(chǔ)性實(shí)驗(yàn)是精選的最能代表本課程特點(diǎn)的最基本的實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)，使學(xué)生掌握相應(yīng)的基本知識(shí)與基本技能，為綜合性實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。綜合性實(shí)驗(yàn)與基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)相比較要復(fù)雜些，是由多種實(shí)驗(yàn)手段與技術(shù)及多層次的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容組成，主要訓(xùn)練學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能的綜合運(yùn)用能力、獨(dú)立操作能力以及對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析能力，為研究與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行打好基礎(chǔ)。

內(nèi)容概要

　　本書(shū)較為系統(tǒng)、全面地介紹了農(nóng)林院校生物化學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)。全書(shū)共分三個(gè)部分，第一部分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，精選了最能代表生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程特點(diǎn)的、最基本的實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)，使學(xué)生掌握相應(yīng)的基本知識(shí)與基本技能，為綜合性實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)；第二部分為綜合性實(shí)驗(yàn)，是由多種實(shí)驗(yàn)手段與技術(shù)及多層次的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容組成，主要訓(xùn)練學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能的綜合運(yùn)用能力、獨(dú)立操作能力以及對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析能力；第三部分為研究性實(shí)驗(yàn)，以培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立科研能力為主要目的?！　”緯?shū)的實(shí)驗(yàn)方法嚴(yán)謹(jǐn)可靠、可操作性強(qiáng)，可供高等農(nóng)林院校農(nóng)學(xué)、園藝、食品、生物工程、動(dòng)物科學(xué)等專業(yè)的本、?？茖W(xué)生使用，也可供農(nóng)林院校生物科學(xué)和生物技術(shù)等專業(yè)的學(xué)生使用。

書(shū)籍目錄

第一部分　基礎(chǔ)性　實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)1　雙向紙層析法分離氨基酸　實(shí)驗(yàn)2　離子交換層析分離氨基酸　實(shí)驗(yàn)3　甲醛滴定法測(cè)定氨基氮　實(shí)驗(yàn)4　谷類作物種子中賴氨酸含量的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)5　雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量　實(shí)驗(yàn)6　考馬斯亮藍(lán)G-250法(Bradford法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量　實(shí)驗(yàn)7　紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量　實(shí)驗(yàn)8　蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)測(cè)定和沉淀反應(yīng)　實(shí)驗(yàn)9　血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳　實(shí)驗(yàn)10　聚丙烯酰胺凝膠盤(pán)狀電泳分離蛋白質(zhì)　實(shí)驗(yàn)11　聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)　實(shí)驗(yàn)12　凝膠過(guò)濾分離血紅蛋白與硫酸銅　實(shí)驗(yàn)13　蛋白質(zhì)透析法脫鹽　實(shí)驗(yàn)14　血液葡萄糖含量的測(cè)定(Folin-Wu法)　實(shí)驗(yàn)15　醋酸纖維素薄膜電泳分離核苷酸　實(shí)驗(yàn)16　單核苷酸的離子交換柱層析分離　實(shí)驗(yàn)17　酵母RNA的提取(濃鹽法)　實(shí)驗(yàn)18　酶的基本性質(zhì)　實(shí)驗(yàn)19　脲酶Km值的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)20　轉(zhuǎn)氨酶活性的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)21　乳酸脫氫酶(LDH)同工酶的瓊脂糖凝膠電泳　實(shí)驗(yàn)22　淀粉酶活力的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)23　丙酮酸含量的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)24　糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定　實(shí)驗(yàn)25　脂肪酸的β-氧化　實(shí)驗(yàn)26　維生素C的定量測(cè)定(2，6-二氯酚靛酚滴定法)　實(shí)驗(yàn)27　血清鈣的測(cè)定第二部分　綜合性　實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)28　直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的測(cè)定　實(shí)驗(yàn)29　小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較　實(shí)驗(yàn)30　發(fā)酵過(guò)程中無(wú)機(jī)磷的利用　實(shí)驗(yàn)31　PCR擴(kuò)增小麥管家基因Tubulin　實(shí)驗(yàn)32　高等植物材料丙酮粉的制備　實(shí)驗(yàn)33　植物基因組DNA提取(CTAB法)　實(shí)驗(yàn)34　細(xì)胞色素c的制備及測(cè)定　實(shí)驗(yàn)35　SOD提取及活力測(cè)定　實(shí)驗(yàn)36　SOD的聚丙烯酰胺凝膠電泳　實(shí)驗(yàn)37　聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物酶(POD)同工酶　實(shí)驗(yàn)38　SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量第三部分　研究型　實(shí)驗(yàn)　實(shí)驗(yàn)39　果　實(shí)菠蘿蛋白酶的動(dòng)力學(xué)測(cè)定　實(shí)驗(yàn)40　雞卵黏蛋白的純化及分析測(cè)定參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：1.過(guò)氧化氫酶廣泛分布于生物體內(nèi)，能將代謝中產(chǎn)生的機(jī)體有害的H2O2分解成H2O和02，使H2O2不致在體內(nèi)大量積累。其催化效率比無(wú)機(jī)催化劑鐵粉高10個(gè)數(shù)量級(jí)，反應(yīng)速率可觀察0，產(chǎn)生情況。2.酶與一般催化劑最主要的區(qū)別之一是酶具有高度的特異（專一）性，即一種酶只能對(duì)一種或一類化合物起催化作用。淀粉酶只能催化淀粉水解，蔗糖酶只水解蔗糖。淀粉水解后生成的麥芽糖屬于還原性糖，能使本乃狄試劑中二價(jià)銅離子還原成一價(jià)亞銅離子，加熱后與空氣中的氧氣作用，生成磚紅色的氧化亞銅。淀粉酶不同催化蔗糖水解，所以不能產(chǎn)生具有還原性的葡萄糖和果糖，蔗糖本身又無(wú)還原性，故不與本乃狄試劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)。3.唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解，生成分子大小不同的糊精，最后水解成麥芽糖。淀粉及糊精遇碘各呈不同的顏色反應(yīng)。直鏈淀粉遇碘呈藍(lán)色，糊精按相對(duì)分子質(zhì)量大小不同可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色和紅色，寡糖和麥芽糖遇碘不顯色。根據(jù)顏色反應(yīng)可了解淀粉被水解的程度。由于在不同的溫度、不同pH下唾液淀粉酶的活性高低不同，所以淀粉被水解的程度也不一樣。另外，激活劑能提高酶活性，抑制劑能抑制酶活性，也能影響淀粉被水解的程度。因此，可通過(guò)與碘產(chǎn)生的顏色反應(yīng)判斷淀粉被水解的程度，了解溫度、pH、激活劑和抑制劑對(duì)酶促作用的影響。

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