微生物學實驗指導(dǎo)

前言

　　《微生物學實驗指導(dǎo)》第1版自1999年問世至今已有8年了，本書得到同行的大力支持與關(guān)照，已被許多師范院校、農(nóng)林等高等院校作為實驗教材使用，受到好評。隨著科學技術(shù)的發(fā)展和教學改革的需要，賦予了新的內(nèi)容?！段⑸飳W實驗指導(dǎo)》（第2版）已列人“十一五”國家級規(guī)劃教材。我們根據(jù)第1版的使用情況，在學習兄弟院校實驗教學先進經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，進行修改和補充，使第2版在內(nèi)容上更加豐富和完善，并增加了一套配合教材使用的“教學輔助光盤”，使其實用性更強，應(yīng)用范圍更廣，更能適應(yīng)廣大讀者的需求?！　〉?版繼續(xù)保持第1版簡明扼要、重點突出和實用性強的特點，并從多方面進行了擴展和補充。為適應(yīng)學科發(fā)展與實際需要擴展了實驗內(nèi)容，由原來的44個實驗增加到54個。每個實驗增加了實驗原理簡介和實驗結(jié)果分析，以幫助讀者更好理解實驗。為了增加教材的實用性和可操作性，增添了“教學輔助光盤”，與本教材配套使用。光盤內(nèi)容包括4個部分：一、以視頻方式演示部分實驗操作過程及注意事項；二、通過彩色照片、圖解等展示部分實驗的真實結(jié)果；三、圖文配合介紹重要實驗菌株的形態(tài)和基本特性；四、通過圖表和鏈接查詢等方式顯示的附錄內(nèi)容。在附錄中增加了國內(nèi)外著名微生物學網(wǎng)站和國外著名微生物學期刊及影響因子兩項內(nèi)容。便于讀者及時從網(wǎng)上獲取更多的微生物學資源，及向國外微生物學期刊投稿時參考。本教材注意引入新的微生物學研究技術(shù)，如增加了外源蛋白在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達及檢測、細菌系統(tǒng)發(fā)育學分析及熒光原位雜交等綜合性新實驗。本書是《微生物學》（第2版）（黃秀梨主編，高等教育出版社，2003）的配套實驗教材。為使知識體系和實驗體系成為一個完整的有機整體，我們將實驗順序及內(nèi)容進行了調(diào)整，并增加了“自主設(shè)計實驗”內(nèi)容?！　⒓颖緯抻喒ぷ鞯膯挝挥校罕本煼洞髮W、湖南師范大學、華南師范大學、天津師范大學、河北師范大學、陜西師范大學、河南師范大學、中國農(nóng)業(yè)科學院、河北科技大學及山東理工大學等。參加本書修訂的作者都是多年從事微生物學教學和微生物學實驗教學的一線教師，具有豐富的知識體系和教學經(jīng)驗，在此我們對他們的精誠合作表示衷心的感謝！并特別感謝高等教育出版社生命科學分社吳雪梅社長，王莉、潘超、趙曉媛等編輯同志的關(guān)心、支持和幫助，她們?yōu)楸緯某霭娓冻隽似D辛的勞動。同時也感謝參加本書校對的本室研究生潘青、李倩、陳彥闖和姜莉莉等同學。　　本書特別適合作為高等師范院校本科生和?？粕奈⑸飳W實驗教材，亦可作為農(nóng)、林、醫(yī)等其他院校相關(guān)專業(yè)的參考教材。對從事微生物學研究的科研人員以及研究生也具有一定的參考價值?！　∮捎诰幷咚接邢蓿緯€會存在不少缺點和不足，敬請各位同仁批評指正和提出寶貴意見，謝謝！

內(nèi)容概要

　　本書是《微生物學實驗指導(dǎo)》一書的修訂版。本書在修訂過程中，注重保持上一版簡明扼要、重點突出和實用性強的特點，并從多方面進行了擴展和補充。實驗由原來的44個增加為54個，并增加了“自主設(shè)計實驗”內(nèi)容。
　　每個實驗都精心設(shè)計了實驗原理簡介和實驗結(jié)果分析的內(nèi)容，以幫助讀者更好理解。在編寫過程中注意引入新的微生物學研究技術(shù)，增加了外源蛋白在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達及檢測、細菌系統(tǒng)發(fā)育學分析及熒光原位雜交等綜合性新實驗。與本書配套出版有“教學輔助光盤”，內(nèi)容包括實驗操作演示、實驗結(jié)果展示、重要實驗菌株的基本特性描述及附錄4部分內(nèi)容。
　　本教材特別適用于師范院校的本科生和專科生使用，亦可作為農(nóng)、林等其他有關(guān)專業(yè)或教師的參考用書。

書籍目錄

第一部分 基礎(chǔ)實驗
　實驗1 培養(yǎng)基的配制
　實驗2 消毒和滅菌
　實驗3 土壤微生物的分離、純化及無菌操作技術(shù)
　實驗4 微生物菌落的觀察
　實驗5 顯微鏡油浸系物鏡的使用
　實驗6 細菌形態(tài)的觀察
　實驗7 細菌單染色法及口腔微生物的觀察
　實驗8 細菌的革蘭氏染色
　實驗9 細菌鞭毛染色及細菌運動的觀察
　實驗10 細菌芽孢、莢膜的染色及觀察
　實驗11 支原體、衣原體的形態(tài)觀察
　實驗12 放線菌的形態(tài)觀察
　實驗13 酵母菌的形態(tài)觀察
　實驗14 霉菌的形態(tài)觀察
　實驗15 細菌大小的測定
　實驗16 細菌數(shù)量的測定
　實驗17 細菌的生理生化反應(yīng)（V—P反應(yīng)、甲基紅試驗、吲哚試驗、糖發(fā)酵試驗）
　實驗18 微生物與氧關(guān)系的檢測
　實驗19 厭氧微生物的培養(yǎng)
　實驗20 免疫血清的制備
　實驗21 凝集反應(yīng)
　實驗22 沉淀反應(yīng)
　實驗23 巨噬細胞體外吞噬　實驗
　實驗24 細菌生長曲線的測定
第二部分 基礎(chǔ)專題實驗
　實驗25 水中大腸菌群的檢測
　實驗26 噬菌體的提取及效價測定
　實驗27 細菌轉(zhuǎn)導(dǎo)的測定
　實驗28 微生物的誘變育種
　實驗29 營養(yǎng)缺陷型的篩選和鑒定
　實驗30 微生物的原生質(zhì)體融合
第三部分 分子微生物學基礎(chǔ)　實驗
　實驗31 質(zhì)粒DNA的小量制備
　實驗32 感受態(tài)細胞的制備及轉(zhuǎn)化
　實驗33 DNA重組
　實驗34 外源蛋白在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達及檢測
　實驗35 應(yīng)用熒光原位雜交（FISH）技術(shù)檢測變形菌綱J3亞綱細菌
　實驗36 應(yīng)用16S rDNA序列進行細菌系統(tǒng)發(fā)育學分析
第四部分 實際應(yīng)用實驗
　實驗37 乳酸發(fā)酵與乳酸菌飲料
　實驗38 酒精發(fā)酵及糯米甜酒的釀制
　實驗39 抗生素抗菌譜及抗生菌的抗藥性測定
　實驗40 固定化枯草芽孢桿菌連續(xù)生產(chǎn)a-淀粉酶
　實驗41 食用菌的培養(yǎng)
　實驗42 蘇云金芽孢桿菌的發(fā)酵生產(chǎn)
　實驗43 病毒的血清學反應(yīng)
　實驗44 螺旋體的檢測
　實驗45 從蟲體中分離殺蟲微生物
　實驗46 微生物菌種保藏
　實驗47 蛋白酶產(chǎn)生菌的篩選
　實驗48 淀粉酶產(chǎn)生菌的篩選
　實驗49 脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選
　實驗50 表面活性劑降解菌的分離
　實驗51 光合細菌的分離
第五部分 自主設(shè)計實驗
　實驗52 自主設(shè)計實驗
第六部分 微生物學實驗技能的測評
　實驗53 基本實驗技能的檢測
　實驗54 實驗設(shè)計及實施能力的測評
　附錄
　附錄1 實驗室意外事故的處理
　附錄2 實驗用培養(yǎng)基的配制
　附錄3 酸堿指示劑的配制
　附錄4 實驗用染色液及試劑的配制
　附錄5 微生物學實驗部分常用數(shù)據(jù)表
　附錄6 玻璃器皿及玻片洗滌法
　附錄7 瓊脂的制造和檢驗方法
　附錄8 實驗常用縮寫名稱對照表
　附錄9 實驗常用中英名詞對照表
　附錄10 各國主要菌種保藏機構(gòu)
　附錄11 國內(nèi)外著名微生物學網(wǎng)站
　附錄12 國外著名微生物學期刊及影響因子

章節(jié)摘錄

　　第二部分 基礎(chǔ)專題實驗　　實驗25 水中大腸菌群的檢測　　一、實驗?zāi)康暮蛢?nèi)容　　目的：學習檢測水中大腸菌群的方法，了解大腸菌群數(shù)量與水質(zhì)狀況的關(guān)系。　　內(nèi)容：1.用濾膜法檢測大腸菌群。　　2.用多管發(fā)酵法檢測大腸菌群?！　《⒒驹怼　〈竽c菌群是一類革蘭氏陰性無芽孢桿菌，24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖或半乳糖。濾膜法是采用濾膜過濾器過濾水樣，使其中的細菌截留在濾膜上，然后將濾膜放在選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，根據(jù)大腸菌群菌落特征進行分析和計數(shù)。多管發(fā)酵法包括初發(fā)酵、平板分離和復(fù)發(fā)酵3個部分。初發(fā)酵中大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，產(chǎn)氣，根據(jù)培養(yǎng)基內(nèi)指示劑顏色變化及杜氏小管內(nèi)有無氣體，判斷是否為陽性。平板分離一般利用大腸菌群在復(fù)紅亞硫酸鈉瓊脂（遠藤氏培養(yǎng)基，Endo’smedium）或伊紅美藍瓊脂（EMB）上形成深紅色或紫色金屬光澤菌落并結(jié)合革蘭氏染色進行判斷。最后進行復(fù)發(fā)酵進一步證實?！　∪?、實驗材料和用具　　1.培養(yǎng)基　復(fù)紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基（遠藤氏培養(yǎng)基）、乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液、3倍濃乳糖蛋白胨培養(yǎng)液、伊紅美藍培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）?！　?.儀器及用具微孔濾膜（孔徑0.45um）、濾器（容量500mL）、抽氣設(shè)備、鑷子、發(fā)酵用試管、杜氏小管、培養(yǎng)皿、刻度吸管或移液管、接種環(huán)、酒精燈?！　∷摹⒉僮鞑襟E　?。ㄒ唬┧畼拥牟杉　?.自來水將自來水龍頭用火焰燒灼3min滅菌，再擰開水龍頭流水5min，以排除管道內(nèi)積存的死水，隨后用已滅菌的三角瓶接取水樣，以供檢測?！　?.池水、河水或湖水將無菌的帶玻塞的小口瓶浸入距水面10～15 cm深的水層中，瓶口朝上，除去瓶塞，待水流人瓶中裝滿后，蓋好瓶塞，取出后立即進行檢測，或臨時存于冰箱，但不能超過24h?！　。ǘV膜法檢測大腸菌群　　1.用無菌鑷子將一無菌濾膜置于濾器的膜承受器當中，將過濾杯裝于濾膜承受器上，旋緊，使接口處能密封，將真空泵與濾器下部的抽氣口連接（圖25-1）。

編輯推薦

　　《微生物學實驗指導(dǎo)》第1版自1999年問世至今已有8年了，《微生物學實驗指導(dǎo)》得到同行的大力支持與關(guān)照，已被許多師范院校、農(nóng)林等高等院校作為實驗教材使用，受到好評。隨著科學技術(shù)的發(fā)展和教學改革的需要，賦予了新的內(nèi)容?！段⑸飳W實驗指導(dǎo)》（第2版）已列入“十一五”國家級規(guī)劃教材。我們根據(jù)第1版的使用情況，在學習兄弟院校實驗教學先進經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，進行修改和補充，使第2版在內(nèi)容上更加豐富和完善，并增加了一套配合教材使用的“教學輔助光盤”，使其實用性更強，應(yīng)用范圍更廣，更能適應(yīng)廣大讀者的需求。

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