臨床檢驗生物化學實驗指導

前言

《臨床檢驗生物化學實驗指導》是普通高等教育“十一五”國家級規(guī)劃教材之一，系涂植光教授主編的《臨床檢驗生物化學》的配套實驗教材，由來自全國開辦醫(yī)學檢驗專業(yè)本科教育的10所醫(yī)學院校的11名工作在教學第一線的教授或副教授編寫。本教材主要適用于醫(yī)學檢驗專業(yè)四年制或五年制本科的臨床生物化學檢驗的實驗教學，也可作為從事臨床生物化學檢驗專業(yè)技術人員和碩士研究生入學考試的參考書。教材中的實驗內(nèi)容各院?？筛鶕?jù)本校的實際情況選擇開設。隨著現(xiàn)代科學技術的迅速發(fā)展，臨床生物化學分析技術不斷更新，先進的實驗儀器及試劑盒廣泛的應用，醫(yī)學檢驗技術發(fā)生了巨大的變化。為適應我國醫(yī)學檢驗專業(yè)發(fā)展的需要，高等教育出版社組織了本套醫(yī)學檢驗專業(yè)教材的編寫，這套教材是國家“十五”重點立項課題“21世紀中國高等學校人才培養(yǎng)體系的創(chuàng)新與實踐”課題中的醫(yī)學子課題“21世紀中國高等學校醫(yī)學檢驗專業(yè)課程體系與教學內(nèi)容的創(chuàng)新與實踐”的內(nèi)容之一。根據(jù)2005年7月高等教育出版社在海南三亞召開的醫(yī)學檢驗專業(yè)教材主編會議精神，為了使本教材成為涂植光教授主編的《臨床檢驗生物化學》真正配套的實驗教材，并讓學生對疾病的生物化學檢驗有一個完整系統(tǒng)的概念，我們改變了以往實驗教材以各代謝物檢測為主線或以各生物化學檢驗技術為主線的編寫格式，進行了按理論教材章節(jié)編寫相應檢驗項目的新嘗試，這是本書的主要特色。為了避免與本套教材中的其他教材重復，本教材還取消了光譜技術、層析技術、電泳技術等章節(jié)。個別實驗放在器官疾病生物化學檢驗實驗中。本教材分16章共計124個實驗，每個實驗包括原理、試劑（試劑與器材）、操作步驟、計算、參考范圍、臨床意義、注意事項及評價等八項。本書主要分兩部分：一是臨床生物化學檢驗技術，以綜合性實驗方式編寫。即酶學基本實驗、方法學評價與試劑盒評價兩章。將綜合性實驗編入實驗教材，符合目前國家教育部本科教學工作水平評估方案中*的機能學課程需要開設綜合性實驗的要求，有利于培養(yǎng)學生綜合解決問題、分析問題以及創(chuàng)新意識的能力。二是以器官疾病為中心的生物化學檢驗實驗，與理論教材章節(jié)相配套。在這部分中，為了讓學生較全面地理解檢測項目的選擇目的和方法學的發(fā)展歷史，每章先概述應檢驗哪些項目，對于本教材需要介紹的檢測項目，先概述方法學評價或歷史發(fā)展，再具體介紹本書選擇的實驗。一般一個檢測項目介紹兩種方法，一種是在教學中較常開展的；另一種則是目前臨床上經(jīng)常使用的或代表目前檢測水平的方法。為了介紹更多的方法，類似的檢驗項目則介紹不同的檢驗方法。對于多種疾病均要檢驗的項目，前面的章節(jié)先介紹，后面章節(jié)需再用此實驗項目的則采用參見方式。由于有的實驗無法在教學實驗室完成，因此我們補充了全實驗室自動化系統(tǒng)、瓊脂糖凝膠自動電泳和血氣分析標準化操作程序三個真人規(guī)范化演示實驗錄像，特別是全實驗室自動化系統(tǒng)是今后臨床實驗室的發(fā)展趨勢，作為補充內(nèi)容制成光盤的贈予教師供教學參考。前兩個錄像由廣州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院劉忠民主任技師、后一個由四川大學華西醫(yī)院賈成瑤副主任技師負責組織錄像，感謝他們的辛勤勞動！在編寫過程中我們還得到檢驗醫(yī)學界許多同行專家的指點和幫助，同時得到廣東醫(yī)學院檢驗學院和重慶醫(yī)科大學醫(yī)學檢驗系的大力支持，在此一并表示衷心的感謝。  由于檢驗醫(yī)學發(fā)展迅速，內(nèi)容涉及廣泛，加之編者水平有限，書中難免存在不足之處或錯誤，敬請各位專家和讀者在使用過程中給予批評指正，以便再版時修訂。

內(nèi)容概要

　　《臨床檢驗生物化學實驗指導》分16章共計124個實驗?！杜R床檢驗生物化學實驗指導》主要分兩部分：一是臨床生物化學檢驗技術，以綜合性實驗方式編寫。二是以器官疾病為中心的生物化學檢驗實驗，與理論教材章節(jié)相配套?！杜R床檢驗生物化學實驗指導》的主要特色是改變了以往實驗教材以各代謝物檢測為主線或以各生物化學檢驗技術為主線的編寫格式，進行了按理論教材章節(jié)編寫相應檢驗項目的新嘗試，從而對疾病的生物化學檢驗項目有一個完整系統(tǒng)認識。本教材主要適用于醫(yī)學檢驗專業(yè)本科臨床生物化學檢驗的實驗教學，也可作為從事臨床生物化學檢驗專業(yè)技術人員以及碩士研究生人學考試

書籍目錄

第一章 酶學基本知識實驗實驗1 分離純化小麥胚芽中酸性磷酸酶實驗2 酶蛋白含量測定及比活性分析實驗3 酸性磷酸酶時間進程曲線實驗4 酸性磷酸酶酶濃度-速率曲線實驗5 pH-酸性磷酸酶活性曲線實驗6 酸性磷酸酶米氏常數(shù)的測定實驗7 磷酸鹽對酸性磷酸酶活性的抑制作用第二章 方法學評價與試劑盒評價實驗第一節(jié) 方法學評價試驗實驗8 線性范圍測定實驗9 檢測能力測定實驗10 批內(nèi)重復性試驗實驗11 回收試驗實驗12 干擾試驗實驗13 方法比較試驗第二節(jié) 試劑盒質(zhì)量評價試驗實驗14 GOD-POD法測定葡萄糖的反應時間進程曲線試驗實驗15 GOD-POD法測葡萄糖試劑盒的穩(wěn)定性試驗實驗16 應用EP10-A文件對試劑盒的初步評價第三章 糖代謝紊亂的生物化學檢驗第一節(jié) 血清(漿)葡萄糖測定實驗17 葡糖氧化酶法測定血清(漿)葡萄糖實驗18 己糖激酶法測定血清(漿)葡萄糖實驗19 鄰甲苯胺法測定血清(漿)葡萄糖實驗20 口服葡萄糖耐量試驗第二節(jié) 血清(漿)糖化蛋白的測定實驗21 高效液相色譜法分離糖化血紅蛋白實驗22 硝基四氮唑藍還原法測定果糖胺第三節(jié) 與糖代謝紊亂相關的實驗室檢測指標實驗23 放射免疫法測定血清胰島素實驗24 電化學發(fā)光免疫法測定C肽實驗25 酶動力學法測定血清β-羥丁酸實驗26 乳酸氧化酶法測定血漿乳酸第四章 血漿脂質(zhì)及脂蛋白代謝紊亂的生物化學檢驗第一節(jié) 血漿脂質(zhì)的測定實驗27 乙酰丙酮顯色法測定血清三酰甘油實驗28 磷酸甘油氧化酶法測定血清三酰甘油實驗29 膽固醇氧化酶法測定血清總膽固醇第二節(jié) 血漿脂蛋白的測定實驗30 磷鎢酸-鎂沉淀法測定高密度脂蛋白膽固醇實驗31 均相法測定血漿高密度脂蛋白膽固醇實驗32 聚乙烯硫酸鹽沉淀法測定血清低密度脂蛋白膽固醇實驗33 酶聯(lián)免疫吸附法測定脂蛋白(a)實驗34 免疫比濁法測定C反應蛋白第三節(jié) 血清載脂蛋白的測定實驗35 免疫透射比濁法測定血清載脂蛋白A1和載脂蛋白B第五章 電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂的生物化學檢驗第一節(jié) 鉀、鈉離子的測定實驗36 離子選擇性電極電位法測定血清鉀、鈉離子實驗37 酶法測定鉀離子實驗38 酶法測定鈉離子第二節(jié) 氯離子的測定實驗39 硫氰酸汞比色法測血清氯離子實驗40 離子選擇性電極法測血清氯離子第三節(jié) 血氣分析實驗41 血氣分析實驗42 酶法測定血漿二氧化碳第六章 骨代謝紊亂的生物化學檢驗第一節(jié) 血清鈣、磷、鎂測定實驗43 鄰甲酚酞絡合酮直接比色法測血清總鈣實驗44 離子選擇性電極電位法測定鈣離子實驗45 米吐爾直接顯色法測定血清磷實驗46 甲基麝香草酚藍法測定血清鎂第二節(jié) 血清堿性磷酸酶測定實驗47 磷酸苯二鈉比色法測定血清堿性磷酸酶第三節(jié) 鈣和磷及骨代謝調(diào)節(jié)激素測定實驗48 放射免疫法測定甲狀旁腺素第七章 微量元素與維生素異常的生物化學檢驗第一節(jié) 微量元素的測定實驗49 雙環(huán)己酮草酰二腙比色法測定血清銅實驗50 吡啶偶氮酚比色法測定血清鋅實驗51 石墨爐原子吸收光譜法測微量元素鉛第二節(jié) 維生素的測定實驗52 三氯化銻比色法測定維生素A實驗53 熒光法測定維生素B2實驗54 直接碘量法測定維生素C實驗55 熒光法測定維生素E第八章 營養(yǎng)狀況的生物化學檢驗實驗56 亞鐵嗪比色法測定血清鐵實驗57 放射免疫法測定血清鐵蛋白實驗58 免疫透射比濁法測定血清前清蛋白第九章 肝膽疾病的生物化學檢驗第一節(jié) 肝臟分泌與排泄功能的生物化學檢驗實驗59 改良J-G法測定血清總膽紅素和結合膽紅素實驗60 膽紅素氧化酶法測定總膽紅素和結合膽紅素實驗61 酶比色法測定總膽汁酸實驗62 四溴酚酞磺酸鈉清除試驗第二節(jié) 肝臟蛋白質(zhì)合成功能的生物化學檢驗實驗63 雙縮脲法測定血清總蛋白實驗64 溴甲酚綠法測定血清清蛋白實驗65 羥胺三氯化鐵比色法測定血清膽堿酯酶實驗66 乙酸纖維膜電泳分離血清蛋白質(zhì)第三節(jié) 肝臟疾病的相關酶的生物化學檢驗實驗67 賴氏法測定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶實驗68 連續(xù)監(jiān)測法測定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶實驗69連續(xù)監(jiān)測法測定血清γ-谷氨?；D(zhuǎn)肽酶實驗70 芐醛偶氮萘酚法測定血清單胺氧化酶第四節(jié) 酒精性肝病和肝性腦病等的生物化學檢驗實驗71 微量擴散法測定血液乙醇的含量實驗72 酶法測定血漿氨第五節(jié) 肝腫瘤的生物化學檢驗實驗73 放射免疫(雙抗體)法測定甲胎蛋白第十章 腎臟疾病的生物化學檢驗第一節(jié) 反映腎小球功能的生物化學檢驗實驗74 除蛋白堿性苦味酸法測定血清肌酐實驗75 不去蛋白速率法測定血清肌酐實驗76 內(nèi)生肌酐清除率的測定實驗77 二乙酰-肟法測定血清尿素實驗78 脲酶-波氏比色法測定血清尿素實驗79 酶偶聯(lián)速率法測定血清尿素實驗80 尿酸酶-過氧化物酶偶聯(lián)比色法測定血清尿酸實驗81 乙酸纖維膜電泳分離尿蛋白第二節(jié) 反映腎小管功能的生物化學檢驗實驗82 酚紅排泄試驗實驗83 放射免疫分析法測定血(尿)β2-微球蛋白第十一章 心血管系統(tǒng)疾病的生物化學檢驗第一節(jié) 心肌損傷及再灌注的生物化學檢驗實驗84 肌酸比色法測定血清肌酸激酶實驗85 免疫抑制法測定肌酸激酶同工酶CK-MB實驗86 瓊脂糖凝膠電泳法測定血清肌酸激酶同工酶實驗87 化學發(fā)光免疫法測定心肌肌鈣蛋白T第二節(jié) 高血壓的相關生物化學檢驗實驗88 熒光比色法測定尿兒茶酚胺實驗89 放射免疫法測定血漿腎素第三節(jié) 心功能不全的生物化學檢驗實驗90 EI．ⅡSA法測定腦鈉肽第十二章 內(nèi)分泌疾病的生物化學檢驗第一節(jié) 下丘腦-垂體內(nèi)分泌功能紊亂的生物化學檢驗實驗91 時間分辨熒光免疫分析法測定生長激素實驗92 電化學發(fā)光法測定催乳素第二節(jié) 甲狀腺功能紊亂的生物化學檢驗實驗93 酶聯(lián)免疫吸附法測定促甲狀腺激素實驗94 放射免疫法測定總T3實驗95 放射免疫法測定抗甲狀腺微粒體抗體(或抗甲狀腺球蛋白抗體)第三節(jié) 腎上腺功能紊亂的生物化學檢驗實驗96 放射免疫法測定血漿或24 h尿醛固酮實驗97 尿17-酮類固醇測定實驗98 尿17-羥皮質(zhì)類固醇測定實驗99 尿香草扁桃酸測定實驗100 化學發(fā)光法測定血漿促腎上腺皮質(zhì)激素第四節(jié) 性激素紊亂的生物化學檢驗實驗101 競爭性放射免疫分析法測定睪丸酮實驗102 化學發(fā)光法測定雌二醇第十三章 消化系統(tǒng)疾病的生物化學檢驗第一節(jié) 胃病的生物化學檢驗實驗103 滴定法測定胃酸分泌實驗104 連續(xù)監(jiān)測法測定胃蛋白酶第二節(jié) 胰腺疾病的生物化學檢驗實驗105 碘-淀粉比色法測定血清淀粉酶實驗106 連續(xù)監(jiān)測法測定血清淀粉酶實驗107 比濁法測定血清脂肪酶第十四章 神經(jīng)系統(tǒng)疾病的生物化學檢驗實驗108 鄰聯(lián)大茴香胺比色法測定血清銅藍蛋白實驗109 放射免疫法測定血漿P物質(zhì)實驗110 生物發(fā)光法測定血清γ-氨基丁酸第十五章 妊娠及其相關的生物化學檢驗第一節(jié) 正常及異常妊娠的生物化 學檢驗實驗111 免疫層析雙抗體夾心法測定人絨毛膜促性腺激素實驗112 競爭性化學發(fā)光酶免疫法測定孕酮第二節(jié) 評價孕婦與胎兒的健康的生物化學檢驗實驗113 肺成熟度組合試驗-泡沫試驗或振蕩試驗第三節(jié) 妊娠與相關疾病的生物化學檢驗第四節(jié) 新生兒代謝特點與新生兒疾病篩查的生物化學檢驗實驗114 時間分辨熒光免疫分析法測定妊娠相關血漿蛋白A實驗115 酶聯(lián)免疫法產(chǎn)前篩查孕中期唐氏綜合征實驗116 金標法產(chǎn)前篩查唐氏綜合征和開放性神經(jīng)管缺陷實驗117 新生兒疾病篩查的基因 診斷實驗第十六章 常用治療藥物監(jiān)測第一節(jié) 強心苷類藥物濃度監(jiān)測實驗118 化學發(fā)光酶免疫法測定 地高辛第二節(jié) 抗癲癇藥物濃度監(jiān)測實驗119 高效液相色譜法同時測定血漿苯 巴比妥、苯妥英及卡馬西平第三節(jié) 免疫抑制藥物濃度監(jiān)測實驗12。 熒光偏振免疫法測定全血 環(huán)孢素A第四節(jié) 情感性精神障礙藥物 濃度監(jiān)測實驗121 干化學法測定血液鋰的含量第五節(jié) 抗心律失常藥物濃度監(jiān)測實驗122 酶放大免疫測定技術測定血漿(清)利多卡因第六節(jié) 抗哮喘藥物濃度監(jiān)測實驗123 雙波長紫外分光光度法測定血清氨茶堿及藥代動力學參數(shù)計算第七節(jié) 氨基糖苷類抗生素濃度監(jiān)測實驗124 酶放大免疫技術測定血清慶大霉素參考文獻

章節(jié)摘錄

插圖：當一個實驗室要引進一個新方法或改進原有的方法時，都必須進行方法學評價試驗，欲評價的方法稱為候選方法。所謂方法學評價，就是對候選方法進行實驗誤差的測定，根據(jù)評價試驗所測得的結果與方法學性能判斷標準進行比較，決定候選方法是否可以被接受。評價試驗的具體內(nèi)容和過程大致可分為：評價前試驗、初步評價試驗、最后評價試驗及評價后試驗。評價前試驗主要研究候選方法的最適條件，對文獻報道的最條件進行必要的驗證。如果欲改變實驗條件，則必須通過實驗證明改變后的實驗條件比原來條件為優(yōu)。這些最適條件包括試劑的濃度，緩沖液的種類、離子強度及pH，標本與試劑的體積比，反應溫度及反應時間，呈色穩(wěn)定性，吸收曲線與最適波長選擇，線性范圍等。初步評價試驗包括：批內(nèi)與日內(nèi)重復性、回收試驗及干擾試驗。最后評價試驗包括日間重復性和方法對比試驗。根據(jù)評價試驗的結果，判斷方法是否可被接受。如果得出了候選方法可被接受的結論，隨后需進行臨床相關研究，包括確定參考范圍，特殊患者的標本檢測等工作。這類內(nèi)容屬于評價后試驗。本章方法學評價試驗選擇血糖測定項目，以葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）作為候選方法，己糖激酶法（HK法）作為對比方法，對GOD-POD法測定血糖進行方法學性能評價。試劑盒評價除上述方法學評價指標外，還包括試劑的穩(wěn)定性、酶促反應或化學反應時間進程曲線等性能指標。本章試劑盒評價試驗也選用GOD-POD法測定血糖試劑盒。通過評價試驗的教學，旨在讓學生熟悉方法學評價和試劑盒評價試驗的設計原則和基本方法，培養(yǎng)學生的科研能力。美國國家臨床實驗室標準化委員會（National Committec for.Clinical Labor.atory Standards，NC-CLS）曾制訂了一套方法學評價方案（Evaluation Protocols），能客觀而正確地對線性、不精密度、干擾及其他性能指標做出評價。由于該類評價方案設計合理、規(guī)范，近年來國內(nèi)外發(fā)表的方法學研究論文采用上述評價方案者日益增多。學生在學習這章內(nèi)容時可查閱有關這方面的文獻資料。

編輯推薦

《臨床檢驗生物化學實驗指導》是由高等教育出版社出版的。

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