基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗教程

前言

　　基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗教程是由細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)和人體寄生蟲學(xué)5個專業(yè)的教師聯(lián)合編寫，經(jīng)高等教育出版社出版發(fā)行的一本綜合性實驗技能教材。本教程的立意是在打破專業(yè)教研室和實驗室的界限，組成綜合性基礎(chǔ)教學(xué)實驗中心的前提下形成的，順應(yīng)了實驗教學(xué)體系改革不斷深入的形勢。　　本教程吸取了國內(nèi)外有關(guān)教材的精華，結(jié)合基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)改革的實際，在保證基本理論、基本技術(shù)和基本知識的前提下，充分吸收各學(xué)科最新技術(shù)和經(jīng)典實驗，盡可能將各專業(yè)實驗內(nèi)容融會貫通，有機結(jié)合，建立了一些綜合性的系統(tǒng)實驗。目的在于啟發(fā)學(xué)生思維和創(chuàng)新意識，所以刪除了專業(yè)間的重復(fù)，力求簡明實用為宗旨，使其既適合各專業(yè)、各層次的學(xué)生實驗及教學(xué)需求，又為研究生和青年教師的科研工作提供一些常用的實驗方法。具有內(nèi)容豐富和使用面廣的特點?！　≡谄陆Y(jié)構(gòu)上，力求實驗內(nèi)容的完整性和系統(tǒng)性。本書分為細(xì)胞學(xué)技術(shù)、免疫檢測技術(shù)、醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、細(xì)菌分析技術(shù)、其他原核微生物的微生物學(xué)檢查、真菌學(xué)、病毒學(xué)、人體寄生蟲學(xué)實驗技術(shù)等共10篇?！　【帉戇@部綜合性實驗教程是我們多年教學(xué)改革的愿望和新嘗試，但由于時間倉促和編寫能力有限，書中難免有不妥與疏漏之處，懇請同行指正。

內(nèi)容概要

　　醫(yī)學(xué)是一門實踐性很強的科學(xué)，各門醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程的實驗課不僅是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，而且也是一個必要的實踐教學(xué)環(huán)節(jié)，搞好實驗教學(xué)是保證與提高教學(xué)質(zhì)量的關(guān)鍵。《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗教程》根據(jù)三年制醫(yī)學(xué)?？频慕虒W(xué)計劃及各門醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程教學(xué)大綱所要求的實驗內(nèi)容，由多年工作在教學(xué)第一線的教師編寫而成。該實驗教程包括實驗總則及人體解剖學(xué)、組織學(xué)與胚胎學(xué)、人體生理學(xué)、醫(yī)學(xué)生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)寄生蟲學(xué)、藥理學(xué)、病理學(xué)、病理生理學(xué)、醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)等10門醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程的基本實驗內(nèi)容，同時還附上了部分實驗用試劑、染色液的配制、標(biāo)本的制作及儀器的使用等。該實驗教程適合三年制的臨床醫(yī)學(xué)、全科醫(yī)學(xué)、婦幼衛(wèi)生、護(hù)理學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)等?？茖I(yè)使用。

書籍目錄

1 細(xì)胞學(xué)技術(shù)1.1 顯微鏡1.1.1 光學(xué)顯微鏡1.1.1.1 普通光學(xué)顯微鏡1.1.1.2 相差顯微鏡1.1.1.3 暗視野顯微鏡1.1.1.4 熒光顯微鏡1.1.1.5 倒置顯微鏡1.1.1.6 體視顯微鏡1.1.1.7 萬能研究用顯微鏡1.1.2 電子顯微鏡1.1.2.1 電鏡的基本原理1.1.2.2 電鏡的基本構(gòu)造1.1.2.3 透射電鏡的標(biāo)本制備及觀察1.1.2.4 掃描電鏡的標(biāo)本制備及觀察1.1.2.5 其他電鏡1.1.2.6 電鏡的制備技術(shù)1.1.2.7 電子探針顯微鏡分析1.1.3 顯微鏡的應(yīng)用1.1.3.1 細(xì)胞顯微攝影1.1.3.2 血液涂片及顯微測量1.1.3.3 細(xì)胞顯微注射1.1.3.4 放射自顯影術(shù)1.2 細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察和成分分析1.2.1 細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)1.2.1.1 光學(xué)顯微鏡下的細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)1.2.1.2 細(xì)胞器的顯微和超微結(jié)構(gòu)1.2.1.3 細(xì)胞中微絲的染色及觀察1.2.1.4 細(xì)胞組分的分級分離1.2.1.5 細(xì)胞群體中各周期時相百分比的測定1.2.2 細(xì)胞化學(xué)分析1.2.2.1 細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)及核酸成分的測定1.2.2.2 細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶和過氧化物酶的測定1.2.3 細(xì)胞的生命活動1.2.3.1 觀察細(xì)胞的生理活動1.2.3.2 人類ABO血型的測定1.2.3.3 細(xì)胞的活體染色1.2.3.4 同種和異種細(xì)胞融合1.2.3.5 動物細(xì)胞的原代培養(yǎng)和細(xì)胞計數(shù)1.2.3.6 動物和植物細(xì)胞的有絲分裂1.2.3.7 動物細(xì)胞的減數(shù)分裂1.2.3.8 TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡參考文獻(xiàn)2 免疫學(xué)檢測技術(shù)2.1 細(xì)胞免疫檢測技術(shù)2.1.1 人外周血單個核細(xì)胞分離——Ficoll分層離心法2.1.2 T、B淋巴細(xì)胞的分離——尼龍毛柱法2.1.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離2.1.4 T淋巴細(xì)胞亞群檢測——微量細(xì)胞毒法2.1.5 E玫瑰花環(huán)試驗2.1.6 B細(xì)胞膜免疫球蛋白檢測2.1.7 脾細(xì)胞介導(dǎo)的SRBC溶血分光光度計定量測定法（QHs）2.1.8 小鼠骨髓細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定2.1.9 小鼠胸腺細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定2.1.10 小鼠脾細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定2.1.11 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗2.1.11.1 3H-TdR摻入法2.1.11.2 MTT比色法2.1.11.3 微量全血法2.1.12 B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗2.1.13 巨噬細(xì)胞吞噬功能測定2.1.13.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞2.1.13.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅測定2.1.14 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒技術(shù)2.1.14.1 抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒試驗2.1.14.2 NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗2.1.14.3 補體依賴性細(xì)胞毒實——小鼠脾及胸腺T細(xì)胞百分率測定2.1.14.4 小鼠細(xì)胞毒T細(xì)胞（cTL）活性測定2.1.15 LAK殺傷活性檢測2.2 細(xì)胞因子檢測技術(shù)2.2.1 白細(xì)胞介素1的誘生及檢測2.2.2 白細(xì)胞介素2檢測2.2.2.1 依賴細(xì)胞株增殖測定法2.2.2.2 鼠脾T淋巴細(xì)胞增殖分析法2.2.3 腫瘤壞死因子測定2.2.4 集落刺激因子檢測2.2.5 干擾素檢測2.2.6 趨化因子檢測2.2.7 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子檢測2.2.8 轉(zhuǎn)化生長因子B檢測2.3 抗體制備技術(shù)2.3.1 免疫血清制備2.3.2 動物的選擇2.3.3 免疫原2.3.4 佐劑2.3.5 免疫途徑2.3.6 免疫血清效價的測定2.3.7 采血及分離血清2.3.8 免疫血清的保存2.3.9 兔抗人血清白蛋白多克隆抗體的制備2.3.10 抗體的純化2.3.10.1 硫酸銨鹽析法2.3.10.2 DEAE-纖維素層析法2.3.11 單克隆抗體制備2.3.12 基因工程抗體2.4 抗原抗體檢測技術(shù)2.4.1 直接凝集2.4.1.1 玻片凝集——ABO血型鑒定2.4.1.2 試管凝集2.4.2 間接凝集——抗鏈球菌溶血素0（ASO）抗體的檢測2.4.3 協(xié)同凝集2.4.4 雙向免疫擴散2.4.5 單向免疫擴散2.4.6 對流免疫電泳2.4.7 火箭電泳2.4.8 免疫電泳2.4.9 免疫印記檢測嗜酸性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞（Eol-1）bcl-2蛋白的表達(dá)2.4.10 免疫沉淀法2.4.11 補體依賴細(xì)胞毒試驗2.4.12 溶血反應(yīng)——血清總補體含量的測定（cH50）2.5 免疫標(biāo)記技術(shù)2.5.1 免疫熒光技術(shù)2.5.1.1 間接法——T細(xì)胞亞群檢測2.5.2 免疫酶技術(shù)2.5.2.1 夾心法ELISA——檢測sIL-2R2.5.2.2 ELIsA間接法——單抗隆抗體篩選2.5.2.3 免疫酶染色——IL-2受體陽性細(xì)胞檢測2.6 放射免疫分析2.6.1 放射性同位素標(biāo)記抗原2.6.2 放射免疫分析技術(shù)2.6.3 免疫放射測定2.7 免疫組織化學(xué)技術(shù)2.7.1 常用的免疫組化技術(shù)2.7.1.1 免疫酶組織化學(xué)技術(shù)2.7.1.2 膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白（GFAP）的免疫組化染色分析2.7.2 免疫熒光組化技術(shù)2.7.2.1 直接法2.7.2.2 間接法2.7.2.3 補體法2.7.2.4 雙重免疫熒光染色法2.7.3 親合組織化學(xué)技術(shù)2.7.3.1 生物素一抗生物素免疫細(xì)胞組織化學(xué)染色技術(shù)2.7.3.2 葡萄球菌A蛋白（SPA）法2.7.3.3 凝集素法2.7.4 免疫金銀細(xì)胞組織化學(xué)技術(shù)2.7.4.1 免疫金法（IGs）2.7.4.2 免疫銀法（IGSS）2.7.5 免疫膠體鐵細(xì)胞組織化學(xué)技術(shù)2.8 超敏反應(yīng)檢測技術(shù)2.8.1 血清總IgE測定2.8.1.1 反向間接血凝法測定人血清總IgE2.8.1.2 EGIsA雙抗體夾心法測定人血清總IgE2.8.2 特異性IgE的測定2.8.3 過敏性皮膚試驗2.8.4 免疫復(fù)合物測定2.8.4.1 聚乙二醇沉淀試驗2.8.4.2 I標(biāo)記的clq結(jié)合試驗2.8.5 Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚試驗2.8.5.1 結(jié)核菌素試驗2.8.5.2 鏈激酶一鏈導(dǎo)酶（sK-sD）皮膚試驗參考文獻(xiàn)3 醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)技術(shù)3.1 細(xì)胞遺傳學(xué)實驗技術(shù)3.1.1 人的x染色質(zhì)和鼓槌3.1.2 人類的染色體及核仁形成區(qū)3.1.3 人類的染色體核型3.1.4 小白鼠骨髓細(xì)胞的染色體3.1.5 人類外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備技術(shù)3.1.6 人類染色體G顯帶技術(shù)及染色體G顯帶的鑒別3.1.7 人類染色體c顯帶技術(shù)3.1.8 人類高分辨顯帶染色體標(biāo)的制備技術(shù)3.1.9 實體瘤細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備技術(shù)3.1.10 羊水細(xì)胞的培養(yǎng)及其染色體標(biāo)本的制備技術(shù)3.1.11 絨毛細(xì)胞的培養(yǎng)及其染色體標(biāo)本的制備技術(shù)3.1.12 x，Y性染色質(zhì)的檢查3.1.13 x染色體脆性部位顯示法3.2 遺傳毒理學(xué)實驗技術(shù)3.2.1 姐妹染色單體互換試驗3.2.1.1 小鼠骨髓細(xì)胞姐妹染色單體互換試驗3.2.1.2 人外周血淋巴細(xì)胞姐妹染色單體互換試驗3.2.2 染色體畸變試驗3.2.3 小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗3.2.4 人外周血淋巴細(xì)胞微核試驗3.2.5 精子畸形試驗3.2.6 非程序DNA合成參考文獻(xiàn)4 分子生物學(xué)技術(shù)4.1 基因診斷技術(shù)4.1.1 慢性粒細(xì)胞白血病的基因易位與基因診斷4.1.1.1 基因組DNA的提取4.1.1.2 DNA樣品的純化、定量和濃縮4.1.1.3 人染色體DNA的限制性酶切4.1.1.4 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段4.1.1.5 Southern印記轉(zhuǎn)移DNA片段4.1.1.6 分子雜交和放射自顯影4.1.2 用PcR擴增法檢測性別4.1.2.1 微量外周血標(biāo)本制備模板DNA4.1.2.2 PCR檢測性別4.1.3 PCR-SSCF，診斷法4.1.4 基因診斷的實驗設(shè)計4.2 免疫分子生物學(xué)檢測技術(shù)4.2.1 免疫PCR檢測rhIL34.2.2 TNFamRNA表達(dá)的測定4.3 HPV基因的克隆及初步鑒定4.3.1 提取組織DNA4.3.2 核酸定量4.3.3 PCR擴增4.3.4 PCR產(chǎn)物回收4.3.5 連接反應(yīng)4.3.6 轉(zhuǎn)化4.3.7 陽性重組體篩選及初步鑒定參考文獻(xiàn)5 細(xì)菌分析技術(shù)5.1 細(xì)菌染色技術(shù)5.1.1 細(xì)菌的革蘭染色法5.1.2 細(xì)菌莢膜染色法（Hiss法）5.1.3 細(xì)菌鞭毛染色法5.1.4 細(xì)菌芽胞染色法5.1.5 抗酸染色法5.1.6 奈瑟染色法5.2 細(xì)菌的分離培養(yǎng)5.2.1 常用培養(yǎng)基的制備5.3 細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)和生長現(xiàn)象示教5.3.1 平板劃線分離培養(yǎng)法5.3.2 純種細(xì)菌移種技術(shù)5.3.2.1 斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)5.3.2.2 液體培養(yǎng)基移種技術(shù)5.3.2.3 半固體培養(yǎng)基移種6 其他原核微生物的微生物學(xué)檢查7 真菌學(xué)8 病毒學(xué)9 人體寄生蟲學(xué)實驗技術(shù)10 疫苗研究技術(shù)

章節(jié)摘錄

　　②乙醚麻醉法是用棉花蘸些乙醚，覆蓋在兔的鼻孔上，使其麻醉致死。注意麻醉的時間不宜過短，但要因家兔體重增加而適當(dāng)增加，以免解剖時家兔蘇醒。另外為了防止乙醚揮發(fā)影響人體健康，在麻醉時，應(yīng)在通風(fēng)條件好的環(huán)境中進(jìn)行，最好選用一只大小適中的燒杯，套在家兔的口鼻處。　?。?）解剖　?、賹⑻幩赖募彝酶姑娉戏庞诮馄拾迳?，并用寸帶將四肢固定。用濕布將腹中線處的毛向兩側(cè)展開，再用鑷子將腹后部皮膚拉起，用剪刀剪一橫口，并從橫口處沿腹中線向前剪開皮膚，直到下頜，接著以腹中線為中心分別向前后肢基部橫剪，然后左手持解剖鑷將皮膚提起，右手持解剖刀，以刀口向皮膚縱切，使皮膚和肌肉分離，最后用圖釘將皮膚固定于解剖板上?！　、谟媒馄始粞馗怪芯€從后向前剪開腹壁，至胸骨時，沿胸廓后緣向兩側(cè)橫剪以暴露腹腔，然后用鑷子提起胸骨的劍突，剪開膈肌，以骨剪沿胸骨兩側(cè)剪斷肋骨，提起胸骨，并小心分離與胸腔相連的結(jié)締組織，最后將胸骨前端橫向剪斷，取下胸廓，暴露胸腔。注意在剪最前面的兩對肋骨時，切勿剪斷血管，以免影響觀察。　　（5）給藥家兔的給藥方式主要有口服、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射、腹腔注射和耳緣靜脈注射等?！　「戒沜細(xì)胞生物學(xué)繪圖方法和注意事項　　繪圖是細(xì)胞生物學(xué)實驗報告的一種重要形式，它所記錄的是普通光學(xué)顯微鏡下所觀察到的標(biāo)本形態(tài)。細(xì)胞生物學(xué)繪圖的基本要求如下：　?。?）自備黑色繪圖鉛筆、橡皮、格尺、削筆刀及繪圖紙。　?。?）繪圖必須真實、明了，按標(biāo)本繪制，不得抄襲。這就需要在繪圖前對標(biāo)本進(jìn)行仔細(xì)觀察并正確理解?！　。?）繪圖時，要用左眼注視目鏡，右眼看圖紙繪圖?！　。?）要將每幅圖的大小、位置及各部比例分配適宜，然后用鉛筆輕輕描出輪廓，經(jīng)修正后再正式繪圖?！　。?）要用粗線表示范圍，用密集小圓點表示濃暗，用疏點表示淡或明?！　。?）要輪廓清楚，線條光滑，不得涂顏色和陰影，濃淡襯托要適宜，點線不重復(fù)?！　。?）要在每幅圖的下方用鉛筆寫出該圖名稱，并在該圖的右側(cè)引出等長的平行線，注明各部名稱（不得已時可在左側(cè)注字）?！　。?）鉛筆應(yīng)經(jīng)常保持尖銳，最好用稍硬號的筆，紙面應(yīng)力求整潔?！　。?）每次實驗結(jié)束，將圖送交老師審閱并記入平時成績?！　「戒汥無菌操作技術(shù)及注意事項　　1．玻璃器皿的消毒和清潔　　（1）新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應(yīng)用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1％～2％鹽酸溶液浸泡，以除去游離堿，再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少許，慢慢轉(zhuǎn)動，使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸，再用水沖洗。

圖書封面

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