實用細胞生物學實驗

內容概要

　　薛雅蓉、張晶、華子春編著的《實用細胞生物學實驗》是一本內容豐富、編排新穎、語言通俗易懂的細胞生物學實驗教材。內容包括三大部分：第一篇為細胞生物學現(xiàn)代儀器介紹，主要介紹細胞生物學實驗所涉及的一些先進的實驗儀器的原理與使用領域、使用方法；第二部分為細胞生物學常用實驗技術，包括細胞制片技術，細胞分離、純化技術，免疫組化技術等；第三部分為實用細胞生物學實驗，內容涵蓋了細胞結構與組成、細胞分離、細胞組分分離、細胞生理與病理、細胞遺傳、細胞培養(yǎng)與細胞工程等精選的代表性實驗，特點是用時較短、步驟翔實、結果可控、能夠在正常教學時間段完成、可用作日常教學學生實驗。
　　《實用細胞生物學實驗》主要針對高等院校生物學相關專業(yè)本科生細胞生物學實驗教學編寫，可用作教師及學生的細胞生物學實驗教材或參考書。

書籍目錄

叢書序
叢書前言
前言
第一篇 細胞生物學現(xiàn)代儀器介紹
第1章 相差顯微鏡的工作原理及應用
第2章 透射電子顯微鏡的原理及其在細胞生物學中的應用
第3章 流式細胞儀原理及應用
第4章 激光掃描共聚焦顯微鏡原理及應用
第二篇 細胞生物學常用實驗技術
第5章 細胞制片技術
第6章 細胞分離純化技術
第7章 細胞培養(yǎng)技術
第三篇 實用細胞生物學實驗
一、細胞結構與組成顯示實驗
實驗1 動物細胞血涂片的制備、瑞氏染色及細胞觀察
實驗2 細胞大小的顯微測量
實驗3 線粒體及液泡系的活體染色
實驗4 甲基綠-派洛寧染色法顯示細胞中的DNA和RNA
實驗5 洋蔥鱗莖內表皮細胞DNA的福爾根顯示
實驗6 細胞中多糖和脂肪的染色顯示
實驗7 考馬斯亮藍染色法顯示細胞骨架
實驗8 免疫熒光染色法顯示培養(yǎng)細胞的微管
實驗9 巨噬細胞酸性磷酸酶的顯示
實驗10 細胞中過氧化氫酶的顯示
二、細胞分離實驗
實驗11 聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度分離液分離血液單個核細胞
實驗12 Percoll不連續(xù)密度梯度離心法分離NK細胞
三、細胞組分分離實驗
實驗13 紅細胞質膜的制備
實驗14 肝細胞質膜的制備
實驗15 植物葉綠體的分離、觀察及活性檢測
實驗16 動物肝組織線粒體的分離實驗
實驗17 大豆葉片細胞線粒體的分離純化
實驗18 細胞中期染色體的分離
四、細胞生理與病理檢測實驗
實驗19 哺乳動物紅細胞膜的通透性
實驗20 質壁分離法測定植物基態(tài)滲透值
實驗21 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現(xiàn)象觀察及吞噬活性檢測
實驗22 臺盼藍(trypan blue)染料排除法鑒定死活細胞
實驗23 MTT比色法檢測細胞活力與細胞數(shù)量的關系
實驗24 涂片染色法觀察骨髓自然凋亡細胞
實驗25 Hoechst-PI染色法檢測抗癌藥物誘導的腹水瘤凋亡細胞
實驗26 Annexin V-FITC／PI雙染色法檢測凋亡細胞
實驗27 細胞微核檢測實驗
五、細胞染色體制備與分析實驗
實驗28 壓片法制備植物根尖細胞有絲分裂標本
實驗29 花粉母細胞減數(shù)分裂標本制備
實驗30 壓片法制備動物精巢組織減數(shù)分裂染色體標本
實驗31 滴片法制備動物單細胞懸液染色體標本
實驗32 去壁低滲法制備植物細胞染色體分散標本
實驗33 人類染色體的G顯帶實驗
實驗34 植物根尖染色體的Giemsa C顯帶實驗
實驗35 人類染色體核型分析實驗
六、細胞培養(yǎng)相關實驗
實驗36 雞胚成纖維細胞的原代培養(yǎng)實驗
實驗37 外周血淋巴細胞的原代培養(yǎng)實驗
實驗38 雞胚成纖維細胞的傳代培養(yǎng)實驗
實驗39 腹水瘤細胞凍存與解凍復蘇實驗
實驗40 植物原生質體的制備與培養(yǎng)實驗
七、細胞融合及細胞轉基因實驗
實驗41 PEG介導的細胞融合實驗
實驗42 哺乳動物細胞基因轉染實驗
附錄 縮略語對照表

章節(jié)摘錄

版權頁：   插圖：   3.金屬用品 用質量好的清潔劑刷洗，再用自來水和蒸餾水沖洗干凈。 7.2.2消毒 1.包裝 器材經(jīng)清洗、干燥后，應先嚴格包裝，然后再進行消毒滅菌處理，以防止消毒滅菌后再次遭受污染。包裝材料最常用的有牛皮紙、平紋棉布、不銹鋼飯盒等。若為干熱消毒，一般用牛皮紙包裝；若為濕熱消毒，這幾種包裝材料都可以用。包裝不可太大，大的用品可單獨包裝，小用品可放在飯盒里，飯盒外再用布或牛皮紙包裹。容器內的物品不宜放置過多，之間最好有空隙；盒蓋不能太緊；注射器的針筒和針芯要分開放；吸管的管口應放入少許脫脂棉，松緊適宜。 2.消毒 消毒滅菌隨物品的不同，而采用不同的方法。 1）紫外線 該方法主要用于消毒實驗室空氣、工作臺面和一些不能使用其他方法消毒的培養(yǎng)器皿。進無菌室前或做完實驗后，均應開燈照射超凈工作臺30 min進行消毒。地面消毒時間應延長，至少消毒1h。紫外線照射60 min可以消滅空氣中大部分細菌。 2）消毒劑 操作者的皮膚、培養(yǎng)瓶的蓋和外壁常用碘酒、70％酒精消毒。無菌室內桌椅和物體的消毒可用0.1％新潔爾滅、過氧乙酸、來蘇兒等擦拭或浸泡。實驗室、無菌室空間的消毒可采用甲醛熏蒸法按每立方米空間用高錳酸鉀5～7.5 9、10～15 mL 37％甲醛。 消毒方法：提前用紙糊等方式封閉欲消毒空間的大部分開口處縫隙；然后將一個耐熱容器放入適當位置，先倒入甲醛溶液，再快速倒入放在大口徑器皿或紙包里（便于倒出）的高錳酸鉀，立即可見白色甲醛煙霧升起，隨后會充滿整個空間；將出口處再用膠帶或紙糊封閉，消毒24 h即可。（操作者要注意，倒高錳酸鉀時應戴口罩，且頭歪向一邊，倒完后迅速撤離現(xiàn)場。） 3）干熱消毒 該方法多用于玻璃器皿及金屬器械消毒，180℃烤箱中消毒2 h。 4）濕熱消毒 橡膠制品、塑料器皿、平衡鹽等用高壓蒸汽消毒鍋濕熱消毒，在121℃（103kPa）條件下消毒15～20min即可。 5）濾過消毒 用孔徑22μm的濾膜可除去培養(yǎng)液和試劑中的細菌和霉菌等。濾過兩次，可使支原體達到某種程度的去除，但不能除去病毒。濾器種類很多，分手動和電動、負壓和正壓幾種。過濾的液體量較少時，可選用針筒式過濾器過濾。

圖書封面

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