醫(yī)學免疫學實驗教程

出版時間:2012-8  出版社:科學出版社  作者:廖紀元,王希君 著  

內(nèi)容概要

  《醫(yī)學免疫學實驗教程》作為高等醫(yī)藥院校實驗教材使用,內(nèi)容主要介紹免疫細胞與免疫分子的檢測,涉及部分經(jīng)典免疫學實驗,如沉淀反應、凝集反應、免疫標記技術;科研基礎性實驗,如免疫細胞分離、培養(yǎng)以及功能測定技術以及動物模型建立、創(chuàng)新研究型實驗的立題等內(nèi)容。

書籍目錄

第一篇概述 一、實驗室規(guī)則 二、實驗意外事故的緊急處理 三、油鏡的使用與保護 第二篇分子免疫學實驗 實驗一特異性抗體的制備 一、兔抗羊紅細胞免疫血清(溶血素)的制備 二、兔抗人IgG免疫血清的制備 實驗二免疫血清的鑒定與純化 一、兔抗SRBC免疫血清(溶血素)的鑒定 二、免疫血清的純化一 實驗三凝集反應 一、直接凝集反應 二、間接凝集反應 實驗四沉淀反應 一、單向免疫擴散試驗 二、雙向免疫擴散試驗 三、對流免疫電泳試驗 四、火箭免疫電泳試驗 五、免疫電泳試驗 六、免疫比濁試驗 實驗五免疫標記技術 一、免疫熒光技術 二、酶聯(lián)免疫吸附實驗(間接法) 三、酶聯(lián)免疫吸附實驗(雙抗原夾心法) 四、酶聯(lián)免疫吸附實驗(雙抗體夾心法) 五、放射免疫技術 實驗六補體參與的免疫反應 一、補體溶血反應 二、血清總補體溶血活性(CH50)測定 實驗七溶血空斑形成試驗 實驗八細胞因子檢測 白細胞介素—2的誘生與生物學活性檢測 第三篇細胞免疫學實驗 實驗九細胞計數(shù)方法 實驗十人外周血單個核細胞的分離 實驗十一小鼠脾細胞的制備 實驗十二小鼠腹腔巨噬細胞的分離與制備 實驗十三T細胞、B細胞的分離 一、E花環(huán)分離法 二、尼龍棉柱法分離法 實驗十四E花環(huán)形成實驗 實驗十五淋巴細胞亞群的檢測 實驗十六淋巴細胞增殖反應 一、MTT比色法 二、3H—TdR摻入法 實驗十七混合淋巴細胞培養(yǎng) 實驗十八NK細胞活性的檢測 一、乳酸脫氫酶釋放法 二、放射性核素51Cr釋放法 實驗十九中性粒細胞吞噬功能測定 第四篇動物免疫學實驗 實驗二十 免疫實驗相關動物模型的建立 一、免疫功能低下動物模型的建立 二、荷瘤動物模型的建立 實驗二十一豚鼠過敏反應的觀察 第五篇設計性實驗 一、設計性實驗的選題、設計與實施 二、設計性實驗參考選題 附錄免疫學實驗常用試劑的配制 參考文獻

章節(jié)摘錄

版權頁:   插圖:   (二)實驗設計的原則及步驟 設計性實驗的一個重要組成部分是實驗設計。實驗設計是關于實驗研究的計劃和方案的制定,是對實驗研究所涉及的各項基本問題的合理安排,是實驗研究能否獲得預期結(jié)果的重要保證。 1:實驗設計原則 (1)對照與均衡原則:對照即對比。在設立實驗組同時,須設立作為比較參照的對照組。對照的意義在于:①鑒別處理因素與非處理因素之間的差異;處理因素效應的大小,重要的不是其本身,而是通過對比后得出的結(jié)論,所以要做到正確的鑒別,設立對照必不可少。②消除和減少實驗誤差;在某些實驗中,自然環(huán)境和實驗條件等對實驗結(jié)果有很大影響,同時實驗動物的個體差異也使實驗條件難以完全統(tǒng)一,設立對照有利于使實驗組和對照組的非處理因素基本處于相同狀態(tài),從而減少或消除實驗誤差。 對照有多種形式,根據(jù)實驗研究目的予以選擇,注意對照設置盡量要全面: 1)空白對照:亦稱正常對照,對照組不加任何處理因素。如觀察某降脂藥的作用時,實驗組動物服用降脂藥,對照組動物不服藥或服安慰劑。 2)自身對照:指對照組與實驗組是在同一動物上進行。例如,用藥前后的對比,即為自身對照。 3)相互對照:又稱組間對照。指在幾個實驗組之間相互對照。如用幾種不同降壓藥物處理動物,對比這幾種藥物的效果,即為相互對照。 4)標準對照:指實驗結(jié)果與標準值對比。 在醫(yī)學實驗中,一般不僅要求設置合理的對照,而且要遵循均衡原則。所謂均衡,就是在相互比較的各組間(實驗組與對照組間、實驗組與實驗組間),除了要研究的處理因素外,其余因素特別是可能影響實驗結(jié)果的因素需要盡量相同,這樣才能有效減少實驗誤差。 (2)隨機原則:分配于實驗組或?qū)φ战M的對象是由實驗對象的總體中任意抽取的。如果在同一實驗中存在數(shù)個處理因素(如先后觀察多種藥物的作用),則各處理因素施加順序的機會也是均等的。通過隨機化,一是盡量使抽取的樣本能夠代表總體,減少抽樣誤差;二是使各組樣本的條件盡量一致,消除或減少組間誤差,從而使處理因素產(chǎn)生的效應更加客觀,便于得出正確的實驗結(jié)果。 (3)重復原則:重復是保證科研結(jié)果可靠性的重要措施。由于實驗中的主客觀原因,一次實驗結(jié)果往往不夠確實可靠,需要多次重復實驗方能獲得可靠的結(jié)果。具有重復性的實驗結(jié)果具備更強的說服力。 2.實驗設計的步驟 (1)明確實驗目的:明確實驗要解決什么問題,預期要取得何種成果。其理論依據(jù)是什么,有何意義(必要性和重要性),還存在什么問題需要解決。 (2)選擇合理的實驗對象:實驗對象選擇合適與否與實驗誤差大小甚至實驗成敗有很大關系。

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