基因工程

內(nèi)容概要

《基因工程》系統(tǒng)介紹了基因工程的原理、策略、技術(shù)方法和應(yīng)用等方面的內(nèi)容，具有較強(qiáng)的前瞻性和實(shí)用性?！痘蚬こ獭贩譃榛蚬こ袒A(chǔ)、基因工程操作方法和基因工程應(yīng)用技術(shù)3篇，共13章，內(nèi)容包括基因工程的概況、核酸操作技術(shù)、工具酶、載體與宿主系統(tǒng)、DNA的克隆策略、聚合酶鏈反應(yīng)、DNA序列分析、重組子的篩選、目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)、目的蛋白的純化與分析、基因操作技術(shù)在醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用、轉(zhuǎn)基因生物和基因工程的安全性與發(fā)展前景。
《基因工程》可作為高等院校生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物工程、生物制藥等相關(guān)專業(yè)本科生的教學(xué)用書(shū)，也可供相關(guān)的科研、技術(shù)和管理人員參考。

作者簡(jiǎn)介

郭江峰、于威

書(shū)籍目錄

前言第一篇 基因工程基礎(chǔ)第一章 基因工程概況第一節(jié) 基因與基因工程一、基因的概念二、基因工程的概念三、基因工程的操作流程四、人類基因組計(jì)劃第二節(jié) 基因工程的發(fā)展與意義一、基因工程的發(fā)展二、基因工程的研究意義參考文獻(xiàn)第二章 核酸操作技術(shù)第一節(jié) 核酸操作的基本原理一、DNA雙螺旋的變性與復(fù)性二、基因操作的工具第二節(jié) DNA和RNA的分離提取一、DNA的提取二、RNA的提取第三節(jié) 核酸標(biāo)記一、末端標(biāo)記二、缺口平移三、引物原位標(biāo)記法第四節(jié) 核酸的處理、定量與保存一、核酸的分離純化二、凝膠電泳法分離核酸三、核酸的定量和保存參考文獻(xiàn)第三章 工具酶第一節(jié) 限制性內(nèi)切核酸酶一、限制性內(nèi)切核酸酶的發(fā)現(xiàn)二、限制性內(nèi)切核酸酶的命名方法三、限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別特點(diǎn)四、限制性內(nèi)切核酸酶的切割方式五、內(nèi)切酶星號(hào)活性六、內(nèi)切酶反應(yīng)的影響因素第二節(jié) 其他常用工具酶一、DNA連接酶二、DNA聚合酶三、修飾性工具酶參考文獻(xiàn)第二篇 基因工程操作方法第四章 載體與宿主系統(tǒng)第一節(jié) 載體的種類一、質(zhì)粒載體二、噬菌體載體三、動(dòng)物細(xì)胞載體第二節(jié) 宿主系統(tǒng)一、原核宿主二、真核宿主參考文獻(xiàn)第五章 DNA的克隆策略第一節(jié) 化學(xué)法合成DNA一、短片段直接連接法組裝DNA二、長(zhǎng)片段部分重疊法組裝DNA第二節(jié) 構(gòu)建文庫(kù)法克隆基因一、構(gòu)建基因組文庫(kù)克隆目的基因二、構(gòu)建cDNA文庫(kù)克隆目的基因第三節(jié) 依據(jù)特定的DNA序列或表達(dá)產(chǎn)物特性克隆基因一、用核酸探針篩選目的DNA二、用寡核苷酸探針篩選目的DNA三、表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)法篩選目的DNA四、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法克隆DNA五、依據(jù)表達(dá)產(chǎn)物特性篩選目的DNA第四節(jié) 基于mRNA反轉(zhuǎn)錄的差異的基因分離一、RACE方法分離基因二、差異雜交篩選目的DNA三、mRNA差異顯示技術(shù)四、代表性差別分析法分離目的基因五、抑制差減雜交法分離目的基因第五節(jié) DNA微陣列法分離基因一、DNA微陣列的分類二、DNA微陣列法分離基因的原理參考文獻(xiàn)第六章 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)第一節(jié) 概述一、PCR反應(yīng)中的主要成分二、PCR反應(yīng)過(guò)程三、PCR產(chǎn)物的克隆第二節(jié) 影響PCR的主要因素一、循環(huán)溫度設(shè)計(jì)二、引物設(shè)計(jì)三、DNA聚合酶四、擴(kuò)增平臺(tái)期第三節(jié) PCR反應(yīng)的應(yīng)用模式一、兼并引物PCR二、套式引物PCR三、復(fù)合PCR四、反向PCR五、不對(duì)稱PCR六、加端PCR七、錨定PCR八、玻片PCR九、標(biāo)記PCR和彩色PCR十、反轉(zhuǎn)錄PCR十一、定量PCR參考文獻(xiàn)第七章 DNA序列分析第一節(jié) 傳統(tǒng)的DNA測(cè)序方法一、Sanger雙脫氧鏈終止法二、Maxam-Gilbert化學(xué)降解法第二節(jié) DNA的自動(dòng)化測(cè)序一、DNA自動(dòng)化測(cè)序的基本原理二、DNA自動(dòng)測(cè)序的步驟三、DNA自動(dòng)分析儀第三節(jié) DNA測(cè)序策略一、定向測(cè)序策略二、隨機(jī)測(cè)序策略三、多路測(cè)序策略四、引物步移測(cè)序策略第四節(jié) 新一代測(cè)序儀一、SOLiD測(cè)序儀二、454測(cè)序儀三、Solexa高通量測(cè)序儀四、HeliScope測(cè)序儀五、新型納米孔測(cè)序技術(shù)六、新一代測(cè)序技術(shù)的前景第五節(jié) 其他DNA測(cè)序技術(shù)一、質(zhì)譜法二、雜交測(cè)序法三、原子探針顯微鏡測(cè)序法四、流式細(xì)胞儀測(cè)序法五、超薄水平凝膠電泳測(cè)序法參考文獻(xiàn)第八章 重組子的篩選第一節(jié) 載體表型選擇法一、抗藥性標(biāo)記及其插入失活選擇法二、β-半乳糖苷酶顯色反應(yīng)選擇法三、噬菌斑篩選法第二節(jié) 根據(jù)插入基因的表型選擇第三節(jié) DNA電泳檢測(cè)法一、快速裂解菌落鑒定法二、酶切電泳篩選法三、PCR擴(kuò)增檢測(cè)法第四節(jié) 核酸雜交檢測(cè)法一、核酸探針二、核酸雜交檢測(cè)方法三、DNA-蛋白質(zhì)篩選法第五節(jié) 免疫化學(xué)檢測(cè)法一、放射性抗體測(cè)定法二、免疫沉淀測(cè)定法三、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法四、免疫印跡第六節(jié) 轉(zhuǎn)譯篩選法一、無(wú)細(xì)胞翻譯系統(tǒng)二、轉(zhuǎn)譯篩選第七節(jié) 幾種常用的真核生物重組基因選擇方法一、利用遺傳選擇標(biāo)記篩選哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因細(xì)胞二、利用報(bào)告基因篩選植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞參考文獻(xiàn)第九章 目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)第一節(jié) 目的基因表達(dá)的條件一、啟動(dòng)子與轉(zhuǎn)錄起始二、mRNA的有效延伸和轉(zhuǎn)錄終止三、mRNA的穩(wěn)定性四、有效的翻譯起始五、遺傳密碼應(yīng)用的偏倚性六、mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)七、RNA的加工八、mRNA序列上終止密碼子的選擇九、表達(dá)質(zhì)粒的拷貝數(shù)及穩(wěn)定性十、外源蛋白的穩(wěn)定性十一、減少基因沉默第二節(jié) 目的基因在大腸桿菌細(xì)胞中的表達(dá)一、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)二、大腸桿菌表達(dá)載體的構(gòu)成三、目的基因在大腸桿菌中的表達(dá)形式四、影響目的基因表達(dá)的因素五、pET系統(tǒng)第三節(jié) 目的基因在酵母中的表達(dá)一、酵母系統(tǒng)的生物學(xué)特性二、酵母表達(dá)系統(tǒng)的組成三、酵母表達(dá)載體的類型和宿主菌第四節(jié) 目的基因在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的表達(dá)一、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)二、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)成三、重組病毒載體的篩選和改進(jìn)四、外源基因在BEVS中的表達(dá)水平及影響因素五、桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的缺點(diǎn)六、家蠶生物反應(yīng)器第五節(jié) 目的基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞的表達(dá)載體二、哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞三、提高哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的策略參考文獻(xiàn)第三篇 基因工程應(yīng)用技術(shù)第十章 目的蛋白的純化與分析第一節(jié) 目的蛋白的分離純化一、離心法二、沉淀法三、膜分離四、電泳法五、色譜法第二節(jié) 目的蛋白的分析一、紫外-可見(jiàn)分光光度法二、HPLC法和CE法三、質(zhì)譜法參考文獻(xiàn)第十一章 基因操作技術(shù)在醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用第一節(jié) 基因治療一、基因治療的概念和策略二、基因治療的基本過(guò)程三、基因治療的臨床應(yīng)用研究第二節(jié) 基因診斷一、基因診斷的概念及特點(diǎn)二、基因診斷的主要技術(shù)方法三、基因診斷的應(yīng)用第三節(jié) 基因工程制藥一、基因工程藥物的分類二、基因工程藥物的發(fā)展三、基因工程藥物產(chǎn)業(yè)化狀況參考文獻(xiàn)第十二章 轉(zhuǎn)基因生物第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)的基本原理二、常用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法三、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的檢測(cè)四、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用五、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究中存在的問(wèn)題與展望第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因植物一、轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)的基本原理二、植物轉(zhuǎn)基因的常用方法三、轉(zhuǎn)基因植物的篩選與檢測(cè)四、轉(zhuǎn)基因植物的應(yīng)用第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因生物食品一、轉(zhuǎn)基因食品分類二、轉(zhuǎn)基因食品的發(fā)展?fàn)顩r參考文獻(xiàn)第十三章 基因工程的安全性與發(fā)展前景第一節(jié) 基因工程的安全性一、轉(zhuǎn)基因生物的安全性二、與基因工程產(chǎn)品安全性有關(guān)的重要事件三、生物安全政策、法規(guī)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估四、轉(zhuǎn)基因生物與國(guó)際貿(mào)易和社會(huì)經(jīng)濟(jì)問(wèn)題五、轉(zhuǎn)基因生物的社會(huì)倫理問(wèn)題第二節(jié) 基因工程的發(fā)展前景一、基因工程在農(nóng)業(yè)中應(yīng)用的發(fā)展前景二、基因工程在生物醫(yī)藥中應(yīng)用的發(fā)展前景三、基因工程在工業(yè)中應(yīng)用的發(fā)展前景四、基因工程在其他領(lǐng)域中應(yīng)用的發(fā)展前景參考文獻(xiàn)

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