出版時間:2012-3 出版社:科學出版社 作者:Jeffrey A.Stuart 頁數(shù):403
內(nèi)容概要
自本書第1版出版以來,被報道與生物能量代謝異常、細胞死亡及疾病相關的mtDNA突變在不斷增加。同樣,我們對mtDNA體細胞突變的生物學功能的了解也在繼續(xù)提高。在第2版中,來自8個國家的專家分享了他們在mtDNA研究領域各方面的專業(yè)知識和詳細的研究方法。斯圖亞特編著的《線粒體DNA(研究方法與實驗方案原著第2版導讀版)》分為三部分,涵蓋了從mtDNA分子到氧化呼吸鏈復合物合成組裝這一通路的相關研究方法、線粒體活性氧簇(ROS)產(chǎn)生及mtDNA損傷和修復、mtDNA異質性突變的鑒定和定量等內(nèi)容。本書秉承Springer《分子生物學方法》系列叢書的一貫風格,闡述明晰、便于使用,每章包括對相關問題的介紹,所需材料和試劑的清單,實驗操作的具體步驟,以及常見問題的解決方法和缺陷規(guī)避。
《線粒體DNA(研究方法與實驗方案原著第2版導讀版)》為Springer經(jīng)典實驗室指南系列《分子生物學方法》的分卷。
這本非常全面和權威的參考書,將有望幫助研究者進一步拓展我們關于細胞生物學這一重要領域的知識。
書籍目錄
前言
撰稿人
第一部分:線粒體DNA復制、轉錄、翻譯和呼吸鏈復合物組裝
1.動物細胞mtDNA核狀小體的生化提取
2.二維瓊脂糖凝膠電泳分析線粒體DNA
3.果蠅和人線粒體DNA復制蛋白:DNA聚合酶7和線粒體單鏈DNA結合蛋白的比較純化策略
4.參與人類疾病的線粒體DNA聚合酶突變體的功能分析
5.人類線粒體單鏈DNA結合蛋白的純化制備
6.評估線粒體轉錄因子A(TFAM)與DNA結合的方法
7.線粒體DNA解旋酶在人類細胞中的誘導表達、純化和體外功能分析
8.人類線粒體DNA解旋酶重組蛋白的純化策略
9.用提取的蛋白組分研究線粒體轉錄終止的方法
10.氧化磷酸化:線粒體編碼蛋白的合成以及將單獨的結構亞基組裝成具有功能的全酶復合物
第二部分:線粒體DNA的損傷和修復
11.線粒體活性氧簇的生成
12.超螺旋敏感的qPCR方法檢測mtDNA損傷
13.免疫熒光法定量分析線粒體DNA中氧化形式的鳥嘌呤(8—羥鳥嘌呤)
14.在分離的線粒體中體外檢測DNA堿基切除修復能力
15.利用穩(wěn)定轉染、瞬時轉染、病毒轉導及TAT介導的蛋白轉導方法靶向哺乳動物細胞線粒體導入修復蛋白
16.一種局限線粒體DNA而非核DNA的氧化損傷修復缺陷的細胞系的構建和功能分析
第三部分:線粒體DNA突變
17.釀酒酵母中線粒體DNA的氧化損傷和突變誘變
18.基于變性高效液相色譜(DHPLC)異源雙鏈分析法測定人類組織中DNA突變異質性
19.利用特異識別異源雙鏈錯配位點的Surveyor核酸酶快速檢測未知的異質性線粒體DNA突變
20.用于單細胞線粒體DNA突變分析的細胞分離和收集方法
21.采用單細胞單分子PcR定量分析線粒體DNA體細胞突變
22.線粒體中DNA前體庫(dNTP庫)的測定
23.構建缺乏線粒體DNA的人類細胞系
索引
圖書封面
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