基因工程實(shí)驗(yàn)

出版時(shí)間:2012-3  出版社:科學(xué)出版社  作者:陳雪嵐 編  頁數(shù):97  

內(nèi)容概要

  《基因工程實(shí)驗(yàn)》包括18個(gè)實(shí)驗(yàn),分別是基因組DNA的提取、總RNA和mRNA的提取、質(zhì)粒DNA的提取、目的基因的獲得、限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)、凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離和純化、DNA片段的體外連接、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、重組子的轉(zhuǎn)化、菌落PCR篩選陽性重組子、重組質(zhì)粒的酶切鑒定、外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)、基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測分析、Western.
Blotting實(shí)驗(yàn)、Southern印跡實(shí)驗(yàn)、全長DNA文庫的構(gòu)建、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)和染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)。
  《基因工程實(shí)驗(yàn)》內(nèi)容清晰準(zhǔn)確、簡明扼要,便于指導(dǎo)操作??勺鳛榫C合性大學(xué)、師范和農(nóng)林院校生物工程、生物技術(shù)、生物制藥等專業(yè)基因工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)用書。

書籍目錄

前言
實(shí)驗(yàn)1 基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)1.1 植物基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)1.2 動(dòng)物基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)1.3 細(xì)菌基因組DNA的提?。?br />實(shí)驗(yàn)1.4 酵母菌基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)2 總RNA和mRNA的提取
實(shí)驗(yàn)2.1 Trizol法提取總RNA
實(shí)驗(yàn)2.2 異硫氰酸胍/酚一步法提取總RNA
實(shí)驗(yàn)2.3 總RNA提取試劑盒
實(shí)驗(yàn)2.4 mRNA的分離純化
實(shí)驗(yàn)3 質(zhì)粒DNA的提取
實(shí)驗(yàn)3.1 堿裂解法少量提取質(zhì)粒DNA
實(shí)驗(yàn)3.2 少量質(zhì)粒提取試劑盒
實(shí)驗(yàn)4 目的基因的獲得
實(shí)驗(yàn)4.1 PCR擴(kuò)增
實(shí)驗(yàn)4.2 反轉(zhuǎn)錄PCR
實(shí)驗(yàn)5 限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)5.1 pUC18/19質(zhì)粒DNA的EcoRI單酶解
實(shí)驗(yàn)5.2 HindⅢ和SalI對pUC18/19質(zhì)粒DNA的雙酶切
實(shí)驗(yàn)6 凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離和純化
實(shí)驗(yàn)7 DNA片段的體外連接
實(shí)驗(yàn)8 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備
實(shí)驗(yàn)9 組子的轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)10 菌落PCR篩選陽性重組子
實(shí)驗(yàn)11 重組質(zhì)粒的酶切鑒定
實(shí)驗(yàn)12 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)
實(shí)驗(yàn)13 基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測分析:SDS-PAGE
實(shí)驗(yàn)14 Western Blotting(蛋白免疫印記)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)15 Southern印跡實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)16 全長CDNA文庫的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)17 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)18 染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)
參考文獻(xiàn)
附錄一 基因工程實(shí)驗(yàn)中的常用數(shù)據(jù)和換算關(guān)系
附錄二 基因工程實(shí)驗(yàn)常用試劑、溶液和緩沖液
附錄三 PCR實(shí)驗(yàn)引物設(shè)計(jì)原則

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