超微細(xì)胞化學(xué)的原理與技術(shù)

內(nèi)容概要

　　《全國高等農(nóng)林院校研究生教材·超微細(xì)胞化學(xué)的原理與技術(shù)》是在華中農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生課程“生物電鏡技術(shù)與超微細(xì)胞化學(xué)”和生物學(xué)同家理科基地班課程“細(xì)胞化學(xué)”講義的基礎(chǔ)上編寫而成的。分為上、下兩篇，共10章。上篇系統(tǒng)介紹了超微細(xì)胞化學(xué)的常用儀器和樣品制備技術(shù)，包括透射電子顯微鏡、掃捕電子顯微鏡、掃捕隧道顯微鏡、原子力顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡等的工作原理和樣品制備技術(shù)；另外，還對分析電鏡技術(shù)、冷凍電鏡技術(shù)、冷凍電鏡三維重構(gòu)技術(shù)等作了簡單說明。下篇詳細(xì)介紹了超微細(xì)胞化學(xué)的原理和技術(shù)，同時(shí)舉例說明了相應(yīng)技術(shù)在農(nóng)業(yè)和生命科學(xué)研究中的應(yīng)用，主要包括生物大分子及離子的常規(guī)定位技術(shù)、免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、電鏡放射自顯影技術(shù)、顯微細(xì)胞化學(xué)概述、超微和顯微細(xì)胞化學(xué)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用等內(nèi)容。

書籍目錄

前言上篇 超微細(xì)胞化學(xué)的常用儀器和樣品制備技術(shù)第一章 緒論第一節(jié) 細(xì)胞化學(xué)的定義和發(fā)展一、細(xì)胞化學(xué)的定義二、細(xì)胞化學(xué)的發(fā)展第二節(jié) 超微細(xì)胞化學(xué)的研究內(nèi)容一、生物超微結(jié)構(gòu)的定義二、超微細(xì)胞化學(xué)的定義三、超微細(xì)胞化學(xué)的研究內(nèi)容第三節(jié) 超微細(xì)胞化學(xué)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用一、生物科學(xué)二、農(nóng)林科學(xué)三、醫(yī)學(xué)科學(xué)第二章 透射電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和樣品制備技術(shù)第一節(jié) 透射電子顯微鏡的發(fā)展過程一、從光學(xué)顯微術(shù)到電子顯微術(shù)二、電子顯微鏡發(fā)展簡史三、電子顯微鏡的分類四、電鏡技術(shù)發(fā)展概況第二節(jié) 透射電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理一、透射電子顯微鏡的成像原理二、提高生物樣品反差的方法三、透射電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)第三節(jié) 透射電子顯微鏡樣品制備與觀察一、取樣二、固定三、脫水四、滲透五、包埋六、切片七、電子染色八、透射電鏡觀察第三章 掃描電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和樣品制備技術(shù)第一節(jié) 掃描電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理一、掃描電子顯微鏡的原理二、掃描電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)第二節(jié) 掃捕電子顯微鏡樣品的制備一、常規(guī)制樣方法二、直接觀察樣品的制備方法第三節(jié) 環(huán)境掃描電鏡技術(shù)簡介一、環(huán)境掃捕電鏡概述二、環(huán)境掃描電鏡結(jié)構(gòu)特點(diǎn)三、環(huán)境掃描電鏡在生命科學(xué)中的應(yīng)川第四章 新型的電子顯微技術(shù)第一節(jié) 分析電子顯微鏡技術(shù)一、分析電子顯微鏡概述二、分析電子顯微鏡X射線顯微化學(xué)原理三、分析電子顯微鏡樣品制備步驟四、分析電子顯微鏡的應(yīng)用第二節(jié) 冷凍電子顯微鏡技術(shù)一、生物樣品的快速冷凍二、冷凍同定方法簡介三、冷凍置換四、冷凍超薄切片技術(shù)五、冷凍斷裂和蝕刻技術(shù)第三節(jié) 冷凍電子顯微鏡三維重構(gòu)技術(shù)一、冷凍電子顯微鏡三維重構(gòu)技術(shù)發(fā)展過程二、冷凍電子顯微鏡三維重構(gòu)原理三、幾種常用的電子顯微鏡三維重構(gòu)技術(shù)及其應(yīng)用第五章 其他相關(guān)儀器的結(jié)構(gòu)原理和應(yīng)用第一節(jié) 掃描隧道顯微鏡一、掃描隧道顯微鏡結(jié)構(gòu)原理二、掃捕隧道顯微鏡的生物樣品制備三、掃捕隧道顯微鏡在生命科學(xué)巾的應(yīng)用第二節(jié) 原子力顯微鏡一、原子力顯微鏡工作原理二、原子力顯微鏡樣品的制備三、原子力顯微鏡在生命科學(xué)中的應(yīng)用第三節(jié) 激光共聚焦顯微鏡一、激光共聚焦顯微鏡成像原理二、激光共聚焦顯微鏡基本特征三、激光掃捕共聚焦顯微鏡圖像模式四、標(biāo)本制備和圖像采集五、激光共聚焦顯微鏡存生命科學(xué)中的應(yīng)用下篇 超微細(xì)胞化學(xué)的原理和技術(shù)第六章 生物大分子及離子的常規(guī)超微細(xì)胞化學(xué)技術(shù)第一節(jié) 蛋白質(zhì)超微細(xì)胞化學(xué)定位一、結(jié)構(gòu)蛋白的定位技術(shù)二、功能蛋——生物酶的定位原理和方法第二節(jié) 主要生物酶的超微細(xì)胞化學(xué)定位一、水解酶二、氧化還原酶三、其他酶類四、細(xì)胞中一些重要細(xì)胞器的標(biāo)志酶定位第三節(jié) 核酸的超微細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、乙酸雙氧鈾染色法二、孚爾根一六亞甲四胺銀染色法三、孚爾根-席夫-乙醇鉈染色法四、乙酸雙氧鈾-EDTA染色法五、核酸酶抽提定位法第四節(jié) 糖類的超微細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、過碘酸氧化法二、靜電結(jié)合法三、凝集素顯示細(xì)胞中糖類四、淀粉酶消化法檢測糖原第五節(jié) 脂類的電鏡細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、保存脂類的包埋劑二、保存膽同醇的毛地黃皂苷法三、保存磷脂的鐵氰化鉀法第六節(jié) 細(xì)胞巾相關(guān)離子定位技術(shù)一、陽離子的超微細(xì)胞化學(xué)定位二、陰離子的超微細(xì)胞化學(xué)定位三、自由基的超微細(xì)胞化學(xué)定位第七章 免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)技術(shù)第一節(jié) 免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)原理一、免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)發(fā)展過程二、免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)相關(guān)概念三、免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)原理第二節(jié) 免疫電鏡細(xì)胞化學(xué)制樣方法一、樣品的前期處理二、樣品包埋第三節(jié) 膠體金標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)一、膠休金的性質(zhì)二、膠體金的制帑三、蛋白質(zhì)-膠體金的制備四、膠體金標(biāo)記免疫電鏡制樣第四節(jié) 酶標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)一、酶標(biāo)記抗體方法二、酶標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)制樣舉例第五節(jié) 鐵蛋白標(biāo)記免疫電鏡技術(shù)一、鐵蛋白制備二、鐵蛋白和抗體的結(jié)合三、鐵蛋白標(biāo)記抗體的純化四、鐵蛋白標(biāo)記抗體的應(yīng)用第六節(jié) 其他免疫電鏡技術(shù)和發(fā)展一、冷凍超薄切片免疫電鏡技術(shù)二、冷凍蝕刻免疫電鏡技術(shù)三、掃描免疫電鏡技術(shù)四、免疫細(xì)胞化學(xué)與圖像分析簡介第八章 電鏡放射自顯影技術(shù)第一節(jié) 電鏡放射自顯影技術(shù)的原理一、放射性同位素二、核射線三、核乳膠四、有關(guān)參數(shù)五、電鏡放射自顯影基本原理第二節(jié) 電鏡放射自顯影的樣品制備一、放射自顯影樣品制備過程和電鏡觀察二、圖像的分析三、放射性防護(hù)第三節(jié) 電鏡放射自顯影技術(shù)在生命科學(xué)巾的應(yīng)用第九章 顯微細(xì)胞化學(xué)概述第一節(jié) 常規(guī)細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、核酸的細(xì)胞定位二、蛋白質(zhì)的細(xì)胞定位三、碳水化合物的細(xì)胞定位四、脂類的細(xì)胞定位五、無機(jī)物質(zhì)的細(xì)胞定位第二節(jié) 酶細(xì)胞化學(xué)一、過氧化物酶二、細(xì)胞色素氧化酶三、琥珀酸脫氫酶四、堿性磷酸酶五、酸性磷酸酶六、三磷酸腺苷酶第三節(jié) 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、免疫膠體金細(xì)胞化學(xué)二、免疫膠休鐵細(xì)胞化學(xué)三、免疫酶細(xì)胞化學(xué)四、免疫熒光細(xì)胞化學(xué)第十章 超微和顯微細(xì)胞化學(xué)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用第一節(jié) 生物大分子展層技術(shù)一、蛋白質(zhì)大分子展層和電鏡觀察二、核酸大分子展層和電鏡觀察第二節(jié) DNA及DNA結(jié)合蛋白的電子顯微術(shù)一、掃描電鏡和掃捕透射電鏡下的DNA及DNA結(jié)合蛋白成像二、透射電鏡下的DNA及DNA結(jié)合蛋白成像第三節(jié) 核酸和核蛋白復(fù)合物的快速印跡法一、電鏡載網(wǎng)的制備二、樣品制備及電泳三、核蛋白復(fù)合物轉(zhuǎn)移同定到載網(wǎng)上四、載網(wǎng)旋轉(zhuǎn)金屬投影及電鏡成像第四節(jié) 電鏡原位核酸分子雜交的原理與技術(shù)一、電鏡原位雜交的種類二、電鏡原位核酸分子雜交制樣步驟概述第五節(jié) 電鏡原位核酸分子雜交技術(shù)的應(yīng)用一、應(yīng)用生物素標(biāo)記DNA探針電鏡原位雜交技術(shù)二、應(yīng)用地高辛標(biāo)記rRNA探針的電鏡原位雜交技術(shù)第六節(jié) 顯微細(xì)胞化學(xué)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用一、光鏡水平的核酸分子原位雜交二、原位PCR方法參考文獻(xiàn)附錄Ⅰ 常用試劑的配制附錄Ⅱ 縮略語對應(yīng)表圖版

章節(jié)摘錄

　　一、細(xì)胞化學(xué)的定義　　細(xì)胞化學(xué)是研究細(xì)胞的化學(xué)成分及其在細(xì)胞活動(dòng)中的變化和定位的科學(xué)。它在不破壞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的情況下，用生化和物理技術(shù)對各種組分做定性和定量分析，研究其動(dòng)態(tài)變化，了解細(xì)胞代謝過程中各種細(xì)胞組分的作用。而組織化學(xué)是指以常用的組織化學(xué)技術(shù)對細(xì)胞內(nèi)主要化學(xué)成分和活性的一般性的研究。細(xì)胞化學(xué)和組織化學(xué)的發(fā)展是密不可分的，它們都建立在細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)及生物化學(xué)的基礎(chǔ)上。對細(xì)胞中的不同組分進(jìn)行區(qū)別著色是細(xì)胞化學(xué)中最基礎(chǔ)的工作?！　《?、細(xì)胞化學(xué)的發(fā)展　　19世紀(jì)初，法國植物學(xué)家拉斯帕伊在研究禾本科植物受精作用時(shí)，首次發(fā)現(xiàn)了淀粉的碘反應(yīng)。此后他還建立了蛋白質(zhì)的黃色反應(yīng)、硫酸對于糖醛及蛋白質(zhì)醛基的反應(yīng)等鑒定方法，因此被認(rèn)為是組織化學(xué)的創(chuàng)始人。　　1867年，珀?duì)査褂闷蒸斒克{(lán)顯示細(xì)胞中的鐵質(zhì)。1868年，克文克用黃色硫化胺溶液與細(xì)胞中的鐵質(zhì)反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵，進(jìn)行顯色反應(yīng)鑒定細(xì)胞中的鐵質(zhì)。1844年，米利翁敘述了蛋白質(zhì)反應(yīng)中一種測定酪氨酸的方法。1862年，本克首次將苯胺作為組織化學(xué)染料應(yīng)用于生物組織結(jié)構(gòu)的研究，這是組織學(xué)方法上的一次革命。在1868年和1872年，克萊布斯和施特魯韋分別通過實(shí)驗(yàn)顯示出組織中酶的存在。1895年，埃爾利希用“納笛”反應(yīng)首次顯示細(xì)胞色素氧化酶?！　?0世紀(jì)40年代，隨著細(xì)胞形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)的發(fā)展，組織化學(xué)、細(xì)胞化學(xué)迅速發(fā)展。1936年，比利時(shí)組織化學(xué)家利松的《動(dòng)物組織化學(xué)》一書總結(jié)了組織化學(xué)的優(yōu)缺點(diǎn)及發(fā)展方向，把組織化學(xué)推向高潮。　　當(dāng)前，發(fā)展比較快的是定量細(xì)胞化學(xué)，其目的是對細(xì)胞、細(xì)胞組分和細(xì)胞產(chǎn)物在其原位上和生活情況下進(jìn)行定量化學(xué)分析，主要包括細(xì)胞光度學(xué)和原位定量測量兩個(gè)方面。細(xì)胞光度學(xué)是對細(xì)胞內(nèi)某些化學(xué)物質(zhì)在光學(xué)上的數(shù)量進(jìn)行分析，最常用的方法有吸收量度法、熒光測定法、干涉量度法、反射量度法等。原位定量測量包括對切片厚度的測定、對一個(gè)特定細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)區(qū)域的定量測量，以及對放射自顯影顆粒的計(jì)數(shù)和自動(dòng)影像分析。定量細(xì)胞化學(xué)雖是細(xì)胞化學(xué)發(fā)展的主要方向，但仍有不少困難。有關(guān)儀器方面的問題已逐漸得到解決，但在固定細(xì)胞、反應(yīng)的化學(xué)計(jì)算方法和反應(yīng)產(chǎn)物的彌散等方面仍存在不少困難。 ……

編輯推薦

　　《全國高等農(nóng)林院校研究生教材·超微細(xì)胞化學(xué)的原理與技術(shù)》既可作為農(nóng)林院校、醫(yī)學(xué)院校和綜合性大學(xué)研究生生物技術(shù)相關(guān)課程的教材，也可作為相關(guān)專業(yè)本科生細(xì)胞生物學(xué)等課程的參考書，同時(shí)還可作為農(nóng)學(xué)、生物學(xué)科教師、科研人員及研究生的參考用書。

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