DNA小分子檢測技術(shù)及其應(yīng)用

內(nèi)容概要

本書分七章介紹了熒光定量PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、焦磷酸測序技術(shù)、變性高效液相色譜技術(shù)、變性梯度凝膠電泳技術(shù)、肽核酸探針技術(shù)、基因芯片技術(shù)等DNA小分子檢測技術(shù)及其應(yīng)用。概述了每一項(xiàng)DNA小分子檢測技術(shù)的產(chǎn)生及其發(fā)展，重點(diǎn)闡述了它們的原理、操作流程、應(yīng)用進(jìn)展及其發(fā)展前景，涵蓋了相關(guān)領(lǐng)域的最新研究成果。
本書可供生命科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域高等院校教師和學(xué)生、科研院所研究人員及相關(guān)檢測機(jī)構(gòu)人員參考閱讀。

書籍目錄

第一章　熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用
 第一節(jié)　定量PCR技術(shù)產(chǎn)生及其發(fā)展
 一、定量PCR技術(shù)產(chǎn)生背景
 二、定量PCR技術(shù)現(xiàn)狀及進(jìn)展
 三、定量PCR技術(shù)的展望
 第二節(jié)　熒光定量PCR的原理與特點(diǎn)
 一、熒光定量PCR定量的理論模式
 二、熒光閾值和Ct值
 三、熒光定量PCR技術(shù)的特點(diǎn)
 第三節(jié)　熒光定量PCR的類型
 一、熒光內(nèi)參染料法
 二、序列特異性探針
 三、絕對(duì)定量與相對(duì)定量
 四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
 第四節(jié)　防污染的控制策略
 一、PCR污染的原因
 二、污染的監(jiān)測
 三、防范污染的方法
 第五節(jié)　熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用
 一、腫瘤相關(guān)基因的檢測
 二、轉(zhuǎn)基因檢測
 三、基因突變檢測
 四、病毒檢測
 五、病原菌檢測
 六、寄生蟲檢測
 七、基因表達(dá)的相對(duì)定量分析
第二章　環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)及其應(yīng)用
 第一節(jié)　環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法的原理
 第二節(jié)　引物設(shè)計(jì)及操作步驟
 一、引物設(shè)計(jì)
 二、反應(yīng)體系
 三、結(jié)果判斷
 第三節(jié)　環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用
 一、細(xì)菌檢測
 二、病毒檢測
 三、寄生蟲檢測
第三章　焦磷酸測序技術(shù)及其應(yīng)用
 第一節(jié)　焦磷酸測序技術(shù)的產(chǎn)生及其發(fā)展
 一、測序技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀
 二、測序技術(shù)的發(fā)展瓶頸
 三、焦磷酸測序技術(shù)的產(chǎn)生及發(fā)展
 四、焦磷酸測序技術(shù)的前景
 第二節(jié)　焦磷酸測序技術(shù)的原理及流程
 一、焦磷酸測序技術(shù)的一般原理
 二、焦磷酸測序技術(shù)的一般流程
 三、焦磷酸測序反應(yīng)過程的具體原理
 第三節(jié)　焦磷酸測序技術(shù)引物的設(shè)計(jì)及結(jié)果分析
 一、利用軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)的流程
 二、焦磷酸測序的結(jié)果分析
 第四節(jié)　焦磷酸測序技術(shù)的應(yīng)用
 一、焦磷酸測序技術(shù)在各領(lǐng)域中的應(yīng)用
 二、焦磷酸測序技術(shù)的深度測序優(yōu)勢
第四章　變性高效液相色譜及其應(yīng)用
 第一節(jié)　變性高效液相色譜的產(chǎn)生及其發(fā)展
 第二節(jié)　變性高效液相色譜的分析原理
 一、長度多態(tài)性分析原理
 二、單核苷酸多態(tài)性分析原理
 三、基因型多態(tài)性分析原理
 四、溫度工作原理
 第三節(jié)　變性高效液相色譜實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及影響要素
 一、變性高效液相色譜推薦優(yōu)化設(shè)計(jì)
 二、DHPLC基本操作流程
 第四節(jié)　變性高效液相色譜的應(yīng)用
 一、DHPLC的應(yīng)用技術(shù)
 二、DHPLC的應(yīng)用領(lǐng)域
 第五節(jié)　變性高效液相色譜的標(biāo)準(zhǔn)化管理
第五章　變性梯度凝膠電泳技術(shù)及其應(yīng)用
 第一節(jié)　變性梯度凝膠電泳技術(shù)的原理
 一、變性梯度凝膠電泳的衍生技術(shù)
　……

章節(jié)摘錄

　　人類對(duì)于核酸的研究已經(jīng)有100多年的歷史。20世紀(jì)60年代末70年代初，人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。但是，由于核酸的含量較少，一定程度上限制了DNA的體外操作。而聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechainreaction，PCR）技術(shù)的出現(xiàn)有效地解決了這個(gè)瓶頸問題，使該技術(shù)成為遺傳與分子生物學(xué)分析的根本性基石?！　CR技術(shù)是由美國科學(xué)家穆利斯提出的一種體外簡化條件下模擬DNA體內(nèi)復(fù)制DNA快速擴(kuò)增的方法，此技術(shù)獲得1993年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。在以后的幾十年里，PCR方法被不斷改進(jìn)：它從一種定性的分析方法發(fā)展到定量測定；從原先只能擴(kuò)增幾千個(gè)堿基對(duì)的基因到目前已能擴(kuò)增長達(dá)幾萬個(gè)堿基對(duì)的DNA片段。到目前為止，PCR技術(shù)已有十幾種之多，定量PCR是在定性技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的核酸定量技術(shù)。自1985年Saiki等首次描述定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)以來，因其展現(xiàn)了前所未有的敏感性和特異性，受到了人們的高度重視。如今各種各樣以PCR為基礎(chǔ)的DNA序列的擴(kuò)增和控制方法得到了迅猛發(fā)展，幾乎已應(yīng)用于基礎(chǔ)研究的各個(gè)領(lǐng)域。但在許多情況下，研究者們已不再滿足于得知某一特異DNA序列的存在與否，他們更著眼于對(duì)其進(jìn)行精確的核酸定量。因而，借助PCR對(duì)基因快速、敏感、特異而準(zhǔn)確的定量成為目前分子生物學(xué)技術(shù)研究的熱點(diǎn)之一。目前已廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究、病原體定量檢測、藥物療效考核、疾病分類及其發(fā)病機(jī)制的研究、新藥驗(yàn)證等領(lǐng)域。下面，我們將走進(jìn)這項(xiàng)“革命性”的生物技術(shù)。 　  ……

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