神經生物學實驗原理與技術

內容概要

神經生物學是生命科學的前沿，是應用神經解剖學、神經生理學、神經化學和分子生物學等多學科現(xiàn)代技術，對神經系統(tǒng)進行多層次綜合研究的實驗性科學?！渡窠浬飳W實驗原理與技術》(呂國蔚和李云慶編寫)作為《生命科學實驗指南系列》的重要分冊，遵循理性思維與實際操作相結合的原則，全面而系統(tǒng)地介紹了神經生物學實驗研究的方法學(第1篇)，并將編著者20余年的有關科研成果轉化為可操作的實驗指導(第2篇)，以及提供可供參考的有關實驗研究信息(第3篇)。
《神經生物學實驗原理與技術》適合高等醫(yī)學院校研究生、七年制和五年制醫(yī)學生及從事神經生物學的研究人員使用，對于普通高等院校生物系研究生與本科生及生物學工作者亦有很好的參考價值。

書籍目錄

序
前言
1 神經生物學實驗方法學
 1.1 科學思維方法學
 1.1.1 科學技術的歷史動力
 1.1.2 辯證地去求索
 1.1.3 辯證地去思考
 1.1.4 辯證地去驗證
 1.1.5 辯證地去訓練
 1.2 實驗設計方法學
 1.2.1 選題
 1.2.2 專業(yè)設計
 1.2.3 對照設計
 1.2.4 統(tǒng)計設計
 1.3 實驗分析方法學
 1.3.1 數(shù)據(jù)整理
 1.3.2 統(tǒng)計分析
 1.3.3 專業(yè)分析
 1.3.4 論文書寫
 1.4 電刺激方法學
 1.4.1 電刺激的基本原理
 1.4.2 電刺激的物理特性
 1.4.3 神經制備的生物特性
 1.4.4 選擇性刺激
 1.4.5 刺激電流擴散
 1.5 電記錄方法學
 1.5.1 容積導體內記錄
 1.5.2 誘發(fā)電位記錄
 1.5.3 單單位記錄
 1.5.4 計算機輔助的記錄
 1.5.5 細胞內記錄
 1.5.6 膜片鉗記錄
 1.5.7 神經纖維速度譜測定
 1.5.8 軸突分叉點位置測定
 1.5.9 壓腳痛閾測定法
 1.6 神經化學方法學
 1.6.1 組織細胞破碎法
 1.6.2 突觸體制備
 1.6.3 電泳法
 1.6.4 色譜法
 1.6.5 高效液相色譜法
 1.6.6 微透析技術
 1.7 化學神經解剖學方法學
 1.7.1 免疫細胞化學技術
 1.7.2 原位雜交組織化學技術
 1.7.3 受體定位技術
 1.7.4 免疫電子顯微鏡技術
 1.8 神經形態(tài)學方法學
 1.8.1 辣根過氧化物酶示蹤技術
 1.8.2 熒光素示蹤技術
 1.8.3 放射性核素示蹤技術
 1.8.4 順行示蹤技術
 1.8.5 激光掃描共焦顯微鏡技術
 1.8.6 定量及分析細胞學技術
 1.9 分子神經生物學方法學
 1.9.1 核酸分子雜交技術
 1.9.2 蛋白質印跡法
 1.9.3 DNA重組技術
 1.9.4 聚合酶鏈反應技術
 1.9.5 DNA序列測定技術
 1.9.6 mRNA差異顯示技術
 1.9.7 基因芯片技術
 1.9.8 轉基因動物技術
 1.10 神經行為學實驗方法學
 1.10.1 行為學實驗的神經基礎及常用動物
 1.10.2 常用的高級腦功能研究方法
 1.10.3 常用痛行為研?方法
 1.11 腦成像
 1.11.1 計算機輔助體層攝影
 1.11.2 磁共振成像
 1.11.3 放射性核素斷層成像
 1.11.4 超聲成像
2 神經生物學實驗與示教
 2.1 神經生理學實驗
 2.1.1 家兔外周神經干復合動作電位記錄
 2.1.2 家兔后肢傳人神經纖維速度譜
 2.1.3 擴張肛門對貓骶?經后根放電的影響
 2.1.4 大鼠脊髓節(jié)段性及下行性誘發(fā)電位記錄
 2.1.5 脊髓節(jié)段性缺血時脊髓誘發(fā)電位的變化
 2.1.6 家兔大腦皮質體感誘發(fā)電位記錄
 2.1.7 腦缺血對家兔大腦皮質誘發(fā)電位的變化
 2.1.8 蟾蜍離體脊神經節(jié)神經元靜息膜電位與動作電位記錄
 2.1.9 大鼠培養(yǎng)腦細胞膜的電學特性
 2.1.10 大鼠在體脊神經節(jié)神經元動作電位的細胞內記錄
 2.1.11 貓脊髓背索突觸后神經元的細胞內與細胞外記錄
 2.1.12 貓脊頸束一背索突觸后神經元的順、逆向反應
 2.1.13 大鼠脊髓背角神經元電活動的細胞內記錄：
 2.1.14 大鼠脊孤束一背索突觸后神經元對軀體與內臟傳人的反應
 2.1.15 家兔中縫大核對外周傳入刺激的反應
 2.1.16 家兔丘腦腹后外側核電活動的細胞外記錄
 2.1.17 軀體內臟傳入在脊髓背角的相互作用
 2.1.18 缺氧預適應鼠腦提取液對ATP敏感性鉀電流的作用
 2.2 神經化學實驗
 2.2.1 缺氧耐受小鼠腦勻漿提取液的抗缺氧作用
 2.2.2 急性重復缺氧小鼠腦單胺類含量的變化。
 2：2.3 不同強度軀體刺激對家兔腦脊液中□、M□含量的影響
 2.2.4 不同強度軀體刺激對家兔腦脊液中單胺類含量的影響
 2.2.5 兔腦內腺苷的微透析法測定
 2.2.6 缺氧對小鼠大腦皮質突觸體LDH透出率的影響
 2.2.7 低氧預適應小鼠腦勻漿提取液對PCI2細胞的保護效應
 2.3 神經組織免疫細胞化學實驗
 2.3.1
延髓背角和中縫大核內的P物質樣陽性結構——免疫細胞化學或免疫熒光細胞化學染色法
 2.3.2
大鼠三叉神經節(jié)內阿片弘受體與降鈣素基因相關肽共存的陽性神經元——免疫熒光細胞化學雙重?記染色法
 2.3.3
大鼠延髓背角淺層內P物質樣陽性終末與含鈣結合蛋白神經元的聯(lián)系——免疫熒光細胞化學雙標染色及激光掃描共焦顯微鏡觀察
 2.3.4
面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角內的FOS樣陽性神經元觀察——免疫細胞化學染色法
 2.3.5
大鼠中縫核簇內5-羥色胺樣陽性神經元表達FOS蛋白——免疫細胞化學雙標染色法
 2.3.6
大鼠延髓背角內向丘腦投射的FOS樣陽性神經元——逆行標記與免疫細胞化學雙標染色法
 2.3.7
大鼠三叉神經節(jié)內鈣結合索mRNA陽性神經元的分布——放射性核素標記的原位雜交組織化學法
 2.3.8
大鼠中腦導水管周圍灰質內的5-羥色胺樣陽性亞微結構——免疫電鏡法
 2.3.9
大鼠孤束核內CABA能纖維終末與P物質受體樣陽性神經元的突觸聯(lián)系——包埋前與包埋后免疫電鏡雙標記法
 2.3.10
大鼠延髓背角內GABA能神經元與P物質能纖維終末的突觸聯(lián)系——包埋前免疫電鏡雙標記法
 2.4 神經形態(tài)學實驗
 2.4.1 大鼠脊髓灰質向孤束核的投射
 2.4.2 貓脊髓背角神經元向外側頸核和背索核的分支投射
 2.4.3 大鼠脊孤束-背索突觸后神經元的超(亞)微結構
 2.4.4
大鼠脊孤束-背索突觸后神經元對軀體感覺核與內臟感覺核的分支投射
 2.4.5 大鼠脊髓立體定位磁控過半夾斷模型
 2.4.6 大鼠臂旁核向杏仁中央核的投射——HRP逆行追蹤方法‘
 2.4.7
大鼠中腦導水管周圍灰質向伏核的5-羥色胺能投射——HRP逆行追蹤與免疫細胞化學染色相結合的雙標記法
 2.4.8
大鼠延髓背角內P物質受體樣陽性神經元向丘腦膠狀質核投射——熒光素逆行追蹤與免疫熒光染色相結合的雙標記方法
 2.4.9 大鼠中縫大核向脊髓背角和延髓背角的分支投射——熒光素雙標記法
 2.4.10
中腦導水管周圍灰質和中縫背核內5-羥色胺能神經元的下行分支投射——熒光素雙標記與免疫熒光染色相結合的三標記法
 2.4.11
大鼠三叉神經脊束核吻側亞核向三叉神經運動核的投射一植物凝集素(PHA-L)順行示蹤法.-‘
 2.4.12
大鼠延髓背角淺層向臂旁外側核及丘腦腹后內側核的投射——BDA順行示蹤法
 2.4.13
大鼠中腦導水管周圍灰質-中縫大核-三叉神經感覺核簇的間接投射——PHA-L順行示蹤與HRP逆行追蹤相結合的雙標記法的光鏡觀察
 2.4.14
大鼠中腦導水管周圍灰質-中縫大核-三叉神經脊束核尾側亞核的間接投射——PHA-L順行示蹤與ItRP逆行追蹤相結合的雙標記法的電鏡觀察
 2.4.15
大鼠延髓背角向丘腦投射神經元與5-羥色胺陽性終末的突觸聯(lián)系——HRP逆行追蹤與免疫細胞化學染色雙標記法
 2.4.16
大鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核的間接投射通路——潰變與}tRP逆行追蹤相結合的雙標記法“
 2.5 分子神經生物學實驗
 2.5.1 用差異顯示法分離特異表達的基因片段
 2.5.2 慢性缺氧培養(yǎng)細胞中缺氧誘導因子-1的提取與檢測
 2.5.3 大鼠三叉神經節(jié)總RNA的提取及cDNA的制備
 2：5.4 5-HT3受體亞型mRNA在大鼠三叉神經節(jié)的表達
 2.5.5 乙酰膽堿轉移酶在大鼠紋狀體的表達及其DNA片段的回收
 2.5.6 乙酰膽堿轉移酶DNA片段的亞克隆
 2.5.7 ChAT-pGEM重組質粒DNA的制備及限制性酶酶切分析
 2.5.8 ChAT-pGEM重組質粒DNA序列的測定
 2.5.9 乙酰膽堿轉移酶表達蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
 2.5.10 乙酰膽堿轉移酶在大鼠紋狀體分布的Western印跡檢測
 2.5.11
性激素對周圍傷害性刺激誘導脊髓PPDmRNA表達上調的影響
 2.5.12
坐骨神經部分切斷后初級感覺神經元(背根節(jié))的差異表達基因克隆
 2.6 神經行為學實驗
 2.6.1 一足致炎大鼠雙足痛感受性的變化
 2.6.2 甲醛溶液致炎大鼠疼痛行為的觀察
 2.6.3 神經反射在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
 2.6.4 體液因素在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
 2.6.5 急性缺氧預適應對小鼠缺氧耐受性的影響
 2.6.6 麻醉與興奮小鼠缺氧耐受性的變化
 2.6.7 大鼠脊髓橫斷及半橫斷模型的復制
 2.6.8 慢性束縛應激對大鼠空間學習記憶能力的影響^
 2.6.9 創(chuàng)傷后應激障礙模型大鼠的自發(fā)活動和焦慮水平檢測
3 神經生物學資料
 3.1 神經生物學常見概念
 3.1.1 生物電學常見概念
 3.1.2 生物化學常見詞匯
 3.1.3 細胞培養(yǎng)常見詞匯
 3.1.4 分子生物學常見詞匯
 3.2 常用的實驗方法
 3.2.1 電生理學儀器方法
 3.2.2 動物實驗的實施
 3.3 實驗動物常用數(shù)據(jù)
 3.3.1 實驗動物常用生理數(shù)據(jù)
 3.3.2 實驗動物常用麻醉劑與肌肉松弛劑
 3.4 常用試劑、緩沖液、貯存液與酶的配制
 3.4.1 組織培養(yǎng)常用試劑
 3.4.2 電泳緩沖劑
 3.4.3 常用貯存液
 3.4.4 常用酶的配制
 3.5 常用限制性酶識別序列
 3.6 常用細胞系、細胞培養(yǎng)基、抗生素
 3.6.1 細胞系
 3.6.2 常用培養(yǎng)液成分及配方
 3.6.3 抗生素
 3.7 核酸、蛋白質常用數(shù)據(jù)及相對分子質量標準參照物
 3.7.1 常用核酸的長度與相對分子質量
 3.7.2 常用蛋白質分子質量標準參照物
 3.8 赫爾辛基宣言Ⅱ

章節(jié)摘錄

版權頁：插圖：第三，科學技術之所以會對生產力具有如此巨大的推動力量，是由于所有科學技術本身都具有一種內在的自我驅動的動力和機制，是一種“最高意義上的革命力量”。科學的目的是不斷地發(fā)現(xiàn)新的自然和社會規(guī)律；技術的作用在于無限能動地改造和發(fā)展社會生產?？茖W技術只有第一、沒有第二?？茖W技術沒有永恒的或終極的目的，總是不斷地追求新的目標和高峰。從第一件原始工具起，到現(xiàn)代計算機的問世，科學技術幾乎是本能的進取，將越來越廣泛地創(chuàng)造奇跡，極大地增強人們駕馭自然的力量。第四，科學技術不僅極大地提高社會生產力，也必將引起上層建筑的深刻變化。如果說，過去的科學技術多少是針對物質世界——人們賴以生存和發(fā)展的大自然；那么，現(xiàn)代的科學技術將在了解和干預自然的同時，扎扎實實地介入到人的心理、道德、智能等意識形態(tài)和精神領域?，F(xiàn)代科學技術與社會主義制度的結合，必將創(chuàng)造出更為高尚的社會文明，更廣闊地開拓人們的視野，更有效地掃除迷信、愚昧和落后?？茖W技術不僅興企業(yè)、興農業(yè)，還應該興教育、興醫(yī)療。通過科學振興的教學和醫(yī)療，又會反過來促進科學技術的進步與提高。如果說“沒有科學技術，企業(yè)就不能生存”，那么“沒有科學技術，教學和醫(yī)療就不能發(fā)展”。一切有遠見卓識的教師、醫(yī)生無不在努力更新自己的知識，無不在努力跟蹤科學技術發(fā)展的前沿。名副其實的高校教師必須具備良好的科學技術工作者的素質。第五，科學技術的發(fā)展不僅影響上層建筑，而且也影響生產關系。當今世界的大事是科學技術和科技人才的競爭?？茖W技術越來越成為判斷綜合國力的最重要標準。沒有科學技術，就意味著一個民族、一個國家、一種社會制度的垮臺或衰亡。正是基于科學技術作為第一生產力對人類社會生死存亡的強大作用，世界各發(fā)達國家，無不加強對科學技術的國家干預，并借以維護他們的社會制度。1989年，美國第101次國會破天荒地通過一項決議，將20世紀90年代定為“腦的10年”。美國總統(tǒng)隨即批準了這個決議，世界各國也競相響應。“腦的10年”實際上是以美國為首的發(fā)達國家向21世紀-_一生物世紀的進軍號。不難設想，腦的工作原理一旦被揭示，將決不限于影響人們對語言、意識、情緒和思維等本身的理解，而且完全可能從根本上改變人類社會的生產面貌。一個用微電子學、光電子學和量子電子學組裝的人工智能系統(tǒng)，再裝配上按仿生學原理研制出來的最敏銳的視、聽、嗅、觸等感官以及骨骼和肌肉，這樣的機器人甚至可以是以納米為單位的極微小的機器人，將會使社會生產和醫(yī)學診療變得面目一新。第六，歸根結底，科學技術還是要由人來創(chuàng)造和開拓的。當代科學技術的競爭歸根結底是科技人才的競爭。人，歷來是第一位的。沒有用現(xiàn)代科學武裝起來的人，科學技術對生產力以及生產關系的影響，就無從實現(xiàn)。英國科學家赫胥黎在談到法國科學家巴斯德時說：“巴斯德一個人的發(fā)現(xiàn)足以抵償1870年（法國）付給德國50億法郎的戰(zhàn)爭賠款?！泵绹囊晃粚④?，從軍事的角度談到海森堡時說：“得到海森堡這樣的科學家足以比得上德國10個師的軍隊?！薄扒к娨椎?，一將難求”，這就是生產力第一要素、勞動力或科技人才的巨大物質力量。

編輯推薦

《神經生物學實驗原理與技術》：“十一五”國家重點圖書出版規(guī)劃項目·生命科學實驗指南系列

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