臨床免疫學(xué)檢驗實驗

前言

隨著21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)與社會的發(fā)展，科學(xué)技術(shù)既向縱深發(fā)展、不斷分化，又互相滲透、不斷融合；同時，新興學(xué)科與邊緣學(xué)科的興起、新技術(shù)的應(yīng)用、信息量的劇增，對醫(yī)學(xué)的發(fā)展產(chǎn)生了重大而深遠(yuǎn)的影響，這些必將促進(jìn)醫(yī)學(xué)教育的全面改革。實驗教學(xué)作為高等教育的重要組成部分，是學(xué)生實踐能力和創(chuàng)新能力培養(yǎng)的重要途徑，其重要性已受到越來越廣泛的關(guān)注。目前，傳統(tǒng)實驗教學(xué)模式仍占主導(dǎo)地位，存在不少弊端和不足：以學(xué)科為基礎(chǔ)構(gòu)建的課程體系，忽略了生命科學(xué)的整體性、系統(tǒng)性；學(xué)科體系繁多，相互孤立，學(xué)科間聯(lián)系不夠；實驗室分散，功能單一，設(shè)備重復(fù)購置，資源浪費(fèi)，效率低下，調(diào)配困難；實驗教學(xué)內(nèi)容陳舊，手段落后，方式老化，實驗內(nèi)容以驗證理論為主，缺少現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗內(nèi)容；醫(yī)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性、主動性不強(qiáng)。這些明顯滯后于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，影響教學(xué)質(zhì)量，不利于大學(xué)生創(chuàng)新意識和實踐能力的培養(yǎng)，難以培養(yǎng)出高素質(zhì)、創(chuàng)新型的醫(yī)學(xué)人才。如何改革傳統(tǒng)的實驗教學(xué)模式，培養(yǎng)具有創(chuàng)新精神、知識面廣、動手能力強(qiáng)的新型醫(yī)學(xué)人才，已成為當(dāng)務(wù)之急。教育部、衛(wèi)生部《關(guān)于加強(qiáng)醫(yī)學(xué)教育工作，提高醫(yī)學(xué)教育質(zhì)量的若干意見》（教高[2009]4號）明確提出“高等學(xué)校要積極創(chuàng)新醫(yī)學(xué)實踐教學(xué)體系，加強(qiáng)實踐能力培養(yǎng)平臺的建設(shè)。積極推進(jìn)實驗內(nèi)容和實驗?zāi)Ｊ降母母铮岣邔W(xué)生分析問題和解決問題的能力”，進(jìn)一步明確了醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)的重要性和改革的必要性。根據(jù)教育部精神，要對傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)模式進(jìn)行改革，最大限度地整合有限資源，優(yōu)化重組教學(xué)實驗室，依托相關(guān)學(xué)科優(yōu)勢，與學(xué)科建設(shè)相結(jié)合，構(gòu)建開放共享的實驗教學(xué)中心，力求突出和貫徹執(zhí)行教育部提出的“三基”、“五性”和注重實用性的要求，以培養(yǎng)學(xué)生的探索精神、科學(xué)思維、實踐能力和創(chuàng)新能力。構(gòu)建新型的醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)體系，要求我們從根本上改變實驗教學(xué)依附于理論教學(xué)的觀念，理論教學(xué)與實驗教學(xué)要統(tǒng)籌協(xié)調(diào)，既有機(jī)結(jié)合又相對獨(dú)立，建立起以能力培養(yǎng)為主線，分層次、多模塊、相互銜接的實驗教學(xué)體系。以教學(xué)內(nèi)容和課程體系改革為核心、培養(yǎng)高素質(zhì)、創(chuàng)新型人才為目標(biāo)，科學(xué)整合實驗教學(xué)內(nèi)容，打破既往學(xué)科框架，按新構(gòu)建的科學(xué)體系，編寫適合創(chuàng)新性實驗教學(xué)體系的配套實驗教材已顯非常迫切。在科學(xué)出版社的大力支持下，《全國高等院校醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)規(guī)劃教材》編委會以廣東醫(yī)學(xué)院為主體，協(xié)同重慶醫(yī)科大學(xué)、中山大學(xué)等全國33所高等醫(yī)藥院校相關(guān)專業(yè)的167名專家、教授共同編寫了這套實驗教學(xué)系列教材。

內(nèi)容概要

　　《臨床免疫學(xué)檢驗實驗》由國內(nèi)7所高等院校參與編寫，主要供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)使用。本教材在強(qiáng)調(diào)醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)基本實驗技術(shù)和操作的基礎(chǔ)上重視綜合性實驗和創(chuàng)新性實驗的開展。全書共分基本實驗技術(shù)、經(jīng)典驗證性實驗、綜合性實驗和創(chuàng)新性實驗四篇。基本實驗技術(shù)主要介紹臨床免疫學(xué)檢驗工作中常用到的樣本采集和免疫細(xì)胞分離技術(shù)以及常用實驗動物。經(jīng)典驗證性實驗主要由經(jīng)典的免疫學(xué)實驗組成。綜合性實驗中主要包括抗體的制備、ELISA方法的建立、機(jī)體免疫功能的評價、臨床免疫學(xué)檢驗以及自動化儀器和試劑盒簡介等內(nèi)容。創(chuàng)新性實驗介紹了臨床免疫學(xué)檢驗創(chuàng)新實驗設(shè)計的一般過程并列舉了部分創(chuàng)新實驗選題。本教材通過基本實驗技術(shù)和經(jīng)典驗證性實驗的教學(xué)可以達(dá)到驗證理論和培養(yǎng)學(xué)生的基本免疫學(xué)實驗技能的目的。綜合性實驗的教學(xué)一方面可以訓(xùn)練學(xué)生組織和駕馭大型綜合實驗的能力，另一方面可以使學(xué)生提前了解臨床實驗室使用的儀器和開展的實驗項目，為臨床實習(xí)和從事臨床免疫學(xué)檢驗工作打下基礎(chǔ)。創(chuàng)新性實驗設(shè)計可為醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)生進(jìn)一步開展科研工作奠定基礎(chǔ)。　　本教材也可用做臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像、醫(yī)學(xué)麻醉、法醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)以及藥學(xué)等專業(yè)實驗教學(xué)的參考用書。

書籍目錄

第一篇 基本實驗技術(shù)第一章 常用實驗動物簡介實驗一 小鼠、豚鼠、家兔的抓取、固定和處死實驗二 實驗動物的免疫接種法第二章 免疫學(xué)檢驗的標(biāo)本采集實驗三 人靜脈采血實驗四 動物血液標(biāo)本的采集第三章 免疫細(xì)胞的分離技術(shù)實驗五 外周血單個核細(xì)胞的分離實驗六 尼龍棉柱法分離人外周血T細(xì)胞實驗七 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備實驗八 人外周血中性粒細(xì)胞的分離第二篇 經(jīng)典驗證性實驗第四章 免疫沉淀實驗實驗九 雙向免疫擴(kuò)散試驗實驗十 單向免疫擴(kuò)散試驗實驗十一 對流免疫電泳試驗實驗十二 免疫電泳試驗實驗十三 免疫濁度測定第五章 免疫凝集實驗實驗十四 直接凝集試驗實驗十五 間接凝集試驗實驗十六 間接凝集抑制試驗第六章 免疫標(biāo)記技術(shù)實驗十七 酶聯(lián)免疫吸附試驗實驗十八 酶免疫組織化學(xué)技術(shù)實驗十九 免疫熒光抗體技術(shù)實驗二十 時間分辨熒光免疫分析實驗二十一 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)實驗二十二 斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗實驗二十三 膠體金免疫層析試驗第七章 細(xì)胞免疫功能檢測技術(shù)實驗二十四 淋巴細(xì)胞增殖試驗實驗二十五 T細(xì)胞亞型分析第八章 天然免疫功能測定實驗二十六 中性粒細(xì)胞趨化功能測定實驗二十七 中性粒細(xì)胞吞噬殺菌功能測定實驗二十八 單核／巨噬細(xì)胞功能測定實驗二十九 NK細(xì)胞功能檢測實驗三十 溶菌酶測定實驗三十一 C-反應(yīng)蛋白檢測第九章 超敏反應(yīng)的檢測實驗三十二 豚鼠過敏反應(yīng)實驗三十三 皮膚速發(fā)型超敏反應(yīng)檢測實驗三十四 血清總IgE的檢測實驗三十五 特異性IgE的測定第三篇 綜合性實驗第十章 多克隆抗體的制備實驗三十六 免疫血清的制備、純化及鑒定第十一章 單克隆抗體的制備實驗三十七 單克隆抗體的制備第十二章 ELIsA檢測方法的建立實驗三十八 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測IL-2方法的建立第十三章 機(jī)體免疫功能的評價實驗三十九 機(jī)體免疫功能的綜合評價第十四章 臨床免疫學(xué)檢驗實驗四十 感染性疾病的免疫學(xué)檢驗實驗四十一 自身免疫性疾病的免疫學(xué)檢驗實驗四十二 腫瘤標(biāo)志物的檢測第十五章 免疫自動化分析系統(tǒng)和試劑盒簡介實驗四十三 免疫自動化分析系統(tǒng)簡介實驗四十四 常見免疫檢驗試劑盒簡介第四篇 創(chuàng)新性實驗第十六章 實驗選題、設(shè)計、實施與總結(jié)第十七章 創(chuàng)新性實驗選題參考參考文獻(xiàn)附錄

章節(jié)摘錄

插圖：（2）標(biāo)記試管：在試管上貼標(biāo)簽，注明病人姓名、項目名稱、采集日期、門診或住院號。（3）消毒雙手：采血前，操作人員應(yīng)用肥皂（或消毒液）和水洗手。（4）選擇靜脈：靜脈采血多采用位于體表的淺靜脈，通常采用肘部靜脈、手背靜脈等。小兒可采頸外靜脈血液，成人采血位置多用肘前靜脈，因其粗大、容易辨認(rèn)（圖2-3）。采血前，要求受檢者端坐在實驗臺前，將前臂放在實驗臺上，掌心向上，并在肘下放一枕墊。臥床受檢者要求前臂伸展，暴露穿刺部位。（5）檢查注射器：打開一次性注射器包裝，左手持針頭下座，右手持針筒，將針頭和針筒緊密連接，并使針頭斜面對準(zhǔn)針筒刻度，抽拉針?biāo)z查有無阻塞和漏氣，最后排盡注射器中的空氣并保持針頭無菌狀態(tài)。（6）消毒：用30g／L碘酊棉簽自所選靜脈穿刺處順時針方向，從內(nèi)向外消毒皮膚，待碘酊揮發(fā)后，再用75％酒精棉簽以同樣方式拭去碘跡。（7）扎壓脈帶：在采血部位上端5～10cm處，將壓脈帶繞手臂一圈打一活結(jié)，壓脈帶末端向上。囑病人握拳，使靜脈隆起。如靜脈不明顯時，可囑病人握緊和放松拳頭幾次，使其充盈后采血，對于較肥胖病人，可用左手食指消毒后在肘前輕壓，再抬起如觸到有波動感，即為肘前靜脈（圖2-4）。（8）穿刺：取下針頭無菌帽，以左手拇指固定靜脈穿刺部位下端，右手持注射器，食指固定針頭下座，使針頭斜面和針筒刻度向上，沿靜脈走向使針頭與皮膚成30。角斜行快速刺人皮膚，然后成5。向前穿破靜脈壁進(jìn)入靜脈腔。見回血后，將針頭順勢探入少許，以免采血時針頭滑出，但不可用力深刺，以免造成血腫，同時立即去掉壓脈帶。（9）抽血：用左手緩緩向后拉注射器針?biāo)ǎ竭_(dá)采血量刻度后停止。若使用一次性真空采血裝置，當(dāng)針頭進(jìn)入血管后會見少量回血，將真空采血管插入試管托內(nèi)采血針中，因試管內(nèi)負(fù)壓作用，血液自動流人試管，到達(dá)采血量刻度后拔出試管即可（圖2-4）。（10）止血：囑受檢者松拳，用消毒棉簽壓住進(jìn)針部位，迅速向后拔出針頭。繼續(xù)以適當(dāng)壓力按住消毒棉簽3分鐘至止血為止。（11）放血：從注射器上取下針頭。將血液沿試管壁緩緩注人，到達(dá)標(biāo)記處。含抗凝劑試管需迅速輕輕顛倒混勻幾次。（12）采血完畢，應(yīng)再次核對病人姓名和編號。用過的器材應(yīng)放在固定的回收箱內(nèi)，不能隨意丟棄，污染環(huán)境。

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《臨床免疫學(xué)檢驗實驗》：全國高等院校醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)規(guī)劃教材。

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