細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

細(xì)胞生物學(xué)（cell biology）是從不同層次（顯微水平、亞顯微水平和分子水平）研究細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。從1665年英國(guó)學(xué)者Robert Hooke第一次用自制的顯微鏡觀察軟木薄片描述細(xì)胞構(gòu)造開(kāi)始，細(xì)胞生物學(xué)每一個(gè)重大發(fā)現(xiàn)或重大突破的獲得都是以新技術(shù)、新方法的引入作為前提的，因此細(xì)胞生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)學(xué)科，實(shí)驗(yàn)教學(xué)在細(xì)胞生物學(xué)的整個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)中起著舉足輕重的作用。為了適應(yīng)高校人才培養(yǎng)模式的變化，我們組織多所大學(xué)教學(xué)一線的骨干教師，在多年實(shí)驗(yàn)教學(xué)和教學(xué)改革的基礎(chǔ)上，編寫(xiě)了本教材，希望本教材的出版能夠在提高學(xué)生的綜合素質(zhì)、培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神與實(shí)踐能力方面發(fā)揮作用。本教材將實(shí)驗(yàn)分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)3種類型?；A(chǔ)性實(shí)驗(yàn)是經(jīng)過(guò)精選的、最基本的、最代表學(xué)科特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，使學(xué)生掌握相應(yīng)學(xué)科的基本知識(shí)與基本技能，為綜合性實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)；綜合性實(shí)驗(yàn)由多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)和多層次的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容所組成，主要訓(xùn)練學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的綜合運(yùn)用能力，為設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的順利開(kāi)展做好準(zhǔn)備；設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)是在完成基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)和綜合性實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以相應(yīng)學(xué)科的研究為主，結(jié)合其他學(xué)科的知識(shí)與技術(shù)，由學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，開(kāi)展科學(xué)研究，撰寫(xiě)課程研究論文，使學(xué)生得到科學(xué)研究的初步訓(xùn)練，為畢業(yè)論文研究工作的開(kāi)展打下基礎(chǔ)。附錄部分附有常用試劑的配制、光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡的構(gòu)造和使用方法、器械清洗方法、常用參數(shù)換算以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作方法，以備查閱。在本教材的使用過(guò)程中，各學(xué)校可根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件和教學(xué)目標(biāo)靈活選取實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。參加本教材編寫(xiě)工作的單位包括四川師范大學(xué)、西南交通大學(xué)、四川大學(xué)、電子科技大學(xué)、西華師范大學(xué)、西華大學(xué)、宜賓學(xué)院、四川教育學(xué)院、西南民族大學(xué)、綿陽(yáng)師范學(xué)院和樂(lè)山師范學(xué)院。本教材的出版得到了四川師范大學(xué)教務(wù)處專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)的資助和各參編單位的大力支持，在此一并表示最誠(chéng)摯的謝意！由于編者水平有限，教材中難免存在著不足和缺陷，希望使用本教材的教師、學(xué)生和相關(guān)科學(xué)工作者提出寶貴意見(jiàn)，以便我們及時(shí)修正。

內(nèi)容概要

本教材從基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)3個(gè)層面設(shè)置了24個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，旨在培養(yǎng)學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)技能和綜合創(chuàng)新能力，內(nèi)容涵蓋光學(xué)顯微鏡技術(shù)、細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、細(xì)胞器的分離和鑒定技術(shù)、染色體標(biāo)本制作技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)、染色體畸變檢測(cè)技術(shù)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)以及細(xì)胞生物學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的選題、設(shè)計(jì)和實(shí)施等內(nèi)容，附錄部分附有常用試劑的配制、光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡的構(gòu)造和使用方法、器械清洗方法、常用參數(shù)換算以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作方法，以備查閱。    本教材可作為高等院校生命科學(xué)、生物技術(shù)專業(yè)以及農(nóng)學(xué)、林學(xué)、醫(yī)學(xué)等相關(guān)專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)用書(shū)，也可作為相關(guān)學(xué)科科研人員的參考書(shū)。

書(shū)籍目錄

前言第一部分  基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)1 細(xì)胞的形態(tài)觀察和大小測(cè)定  實(shí)驗(yàn)2 暗視野顯微鏡的使用  實(shí)驗(yàn)3 相差顯微鏡的使用  實(shí)驗(yàn)4 熒光顯微鏡的使用  實(shí)驗(yàn)5 細(xì)胞器的活體染色  實(shí)驗(yàn)6 細(xì)胞內(nèi)核酸的原位顯示  實(shí)驗(yàn)7 細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的定位  實(shí)驗(yàn)8 細(xì)胞內(nèi)酶的定位  實(shí)驗(yàn)9 細(xì)胞內(nèi)糖類的顯示  實(shí)驗(yàn)10 細(xì)胞內(nèi)脂類的顯示  實(shí)驗(yàn)11 骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備  實(shí)驗(yàn)12 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法第二部分  綜合性實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)13 細(xì)胞器的分離和鑒定  實(shí)驗(yàn)14 完整葉綠體和葉綠體亞組分的分離及其鑒定  實(shí)驗(yàn)15 細(xì)胞膜的通透性和巨噬細(xì)胞的吞噬活動(dòng)  實(shí)驗(yàn)16 細(xì)胞骨架的顯示和光學(xué)顯微鏡觀察  實(shí)驗(yàn)17 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)18 細(xì)胞同步化  實(shí)驗(yàn)19 動(dòng)物細(xì)胞融合  實(shí)驗(yàn)20 植物原生質(zhì)體的分離、融合和培養(yǎng)第三部分  設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)  實(shí)驗(yàn)21 逆境對(duì)植物細(xì)胞膜系統(tǒng)的損傷和破壞  實(shí)驗(yàn)22 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)  實(shí)驗(yàn)23 微核的誘導(dǎo)和檢測(cè)  實(shí)驗(yàn)24 細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)和檢測(cè)附錄  附錄Ⅰ  常用染料簡(jiǎn)介和常用染色劑配方  附錄Ⅱ  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用緩沖液的配制  附錄Ⅲ  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制  附錄Ⅳ  常用生物固定液  附錄Ⅴ  封片劑和粘貼劑  附錄Ⅵ  光學(xué)顯微鏡技術(shù)  附錄Ⅶ  電子顯微鏡技術(shù)  附錄Ⅷ  器械的清洗與消毒  附錄Ⅸ  撰寫(xiě)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的要求  附錄Ⅹ  實(shí)驗(yàn)室常用技術(shù)參數(shù)參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：（2）阻斷濾片：位于物鏡上，二向色鏡和目鏡之間。其作用是吸收和阻擋沒(méi)有被標(biāo)本吸收的激發(fā)光進(jìn)入目鏡，并有選擇地透過(guò)特異的熒光，只讓純熒光達(dá)到目鏡，避免干擾熒光和損傷眼睛。阻斷濾片與激發(fā)濾片應(yīng)組合使用。（3）二向色鏡：二向色鏡是熒光顯微鏡中重要的分色鏡（chromatic beamsplitter）系統(tǒng)，位于汞燈激發(fā)濾片構(gòu)成的平行光軸與目鏡和物鏡構(gòu)成的垂直光軸的兩軸垂直相交處，斜向安裝在光路之中，由鍍膜的光學(xué)玻璃制成，其鏡面方位與上述兩光軸交角均呈45。，能透射長(zhǎng)波光線和反射短波光線，起色光分流的作用。3）光學(xué)系統(tǒng)反光鏡：鋁對(duì)紫外光和可見(jiàn)光的藍(lán)紫區(qū)吸收少，反射可達(dá)90％以上，而銀的反射只有70%，因此熒光顯微鏡的反光鏡多為鍍鋁的平面反光鏡。聚光器：熒光顯微鏡的聚光器用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成，分為明視野聚光器、.暗視野聚光器和相差熒光聚光器。（1）明視野聚光器：一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器，聚光力強(qiáng)，使用方便，特別適于低倍、中倍放大的標(biāo)本觀察。（2）暗視野聚光器：暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應(yīng)用日益廣泛。它可產(chǎn)生黑暗的背景，從而增強(qiáng)了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質(zhì)量，觀察舒適，可發(fā)現(xiàn)亮視野難以分辨的細(xì)微熒光顆粒。（3）相差熒光聚光器：相差熒光聚光器與相差物鏡配合使用，可同時(shí)進(jìn)行相差和熒光聯(lián)合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的準(zhǔn)確定位。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。物鏡：由于激發(fā)光和收集熒光都是由同一物鏡實(shí)現(xiàn)的，所以熒光顯微鏡采用的物鏡是能透過(guò)紫外光的特制物鏡。熒光效率和所用物鏡數(shù)值孔徑的4次方成正比，所以用數(shù)值孔徑較大的浸液物鏡（水浸或油浸）效果較好。一些著名廠家生產(chǎn)的數(shù)值孔徑為1.30的40×、63×熒光物鏡的使用效果較好。目鏡：熒光亮度與目鏡放大倍數(shù)的平方成反比，因此在熒光顯微鏡中多用低倍目鏡，如5×和6.3×。過(guò)去多用單筒目鏡，因?yàn)槠淞炼缺入p筒目鏡高1倍以上，但目前研究型熒光顯微鏡多用雙筒目鏡。

編輯推薦

《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》為21世紀(jì)高等院校教材之一。

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