免疫學(xué)技術(shù)及其應(yīng)用

前言

　　免疫學(xué)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重要的基礎(chǔ)學(xué)科和前沿學(xué)科，與人類(lèi)健康與重大疾病防治密切相關(guān)。免疫學(xué)理論的發(fā)展和突破離不開(kāi)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的支撐和免疫學(xué)技術(shù)的革新。隨著生命科學(xué)和生物高技術(shù)的發(fā)展與交叉融合，高端儀器設(shè)備和技術(shù)手段不斷應(yīng)用于免疫學(xué)領(lǐng)域，免疫學(xué)技術(shù)得到了非常迅速的發(fā)展，新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，在眾多免疫學(xué)研究領(lǐng)域取得了很好的應(yīng)用效果，極大地促進(jìn)了免疫學(xué)的整體發(fā)展，也推動(dòng)了免疫學(xué)理論、技術(shù)在臨床疾病診斷、治療與預(yù)防中的應(yīng)用?；仡櫳镝t(yī)學(xué)發(fā)展史，許多重大突破性進(jìn)展與技術(shù)創(chuàng)新密切相關(guān)，每一次實(shí)驗(yàn)技術(shù)體系的突破往往推動(dòng)了生物醫(yī)學(xué)重要學(xué)術(shù)觀點(diǎn)、理論體系，甚至科學(xué)思想的進(jìn)步與發(fā)展?？v觀國(guó)內(nèi)生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展，尚缺乏真正意義上的具有革命性的技術(shù)創(chuàng)新，也鮮有得到國(guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的獨(dú)創(chuàng)性理論體系。在國(guó)內(nèi)外這種大背景下，系統(tǒng)、全面地介紹免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的原理、方法和應(yīng)用，從一個(gè)側(cè)面推動(dòng)國(guó)內(nèi)免疫學(xué)的整體發(fā)展，顯得十分迫切和必要。本書(shū)正是在這樣的背景下醞釀而成，旨在闡釋免疫學(xué)技術(shù)理論背景和基本原理的基礎(chǔ)上，以典型實(shí)驗(yàn)技術(shù)為例，比較詳細(xì)地介紹常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)操作流程和方法。使讀者在理解實(shí)驗(yàn)原理的基礎(chǔ)上，可以比較不同技術(shù)方法的優(yōu)勢(shì)和局限性，結(jié)合自身實(shí)驗(yàn)條件，靈活有效地加以選擇應(yīng)用，為科研提供技術(shù)方法的支撐，解決實(shí)際問(wèn)題。　　本書(shū)包括以下七部分內(nèi)容：　　免疫細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹單核巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞，以及這些細(xì)胞亞群（如pDC、DCreg、Th1、Th2、Th17、Treg、B細(xì)胞亞群等）的理論背景、相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理和具體方法。　　免疫分子相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹抗原（包括抗原肽）、抗體（包括單抗、多抗、基因工程抗體）、補(bǔ)體、細(xì)胞因子及其受體、HLA、TLR等的背景知識(shí)、相關(guān)研究技術(shù)的原理和實(shí)驗(yàn)方法。

內(nèi)容概要

　　本書(shū)首先介紹了天然免疫和獲得性免疫中免疫細(xì)胞(包括單核巨噬細(xì)胞、DC、NK、T細(xì)胞、B細(xì)胞等)、免疫分子(包括抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子、HLA、TLR等)的理論背景和研究方法。然后介紹廠免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如免疫標(biāo)記技術(shù)、流式細(xì)胞檢測(cè)和分選技術(shù)、免疫相關(guān)分子生物學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)電泳技術(shù)、凋亡檢測(cè)技術(shù)等的原理和應(yīng)用，并融合了免疫學(xué)最新前沿技術(shù)，如RNA干擾技術(shù)、miRNA技術(shù)、蛋白質(zhì)相互作用、BIAcore技術(shù)、激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)、動(dòng)物疾病模型、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。全書(shū)理論性、實(shí)用性和前沿性緊密結(jié)合，在闡述免疫學(xué)基本技術(shù)、經(jīng)典實(shí)驗(yàn)的同時(shí)，更注重免疫學(xué)技術(shù)的最新發(fā)展與在實(shí)際科研工作中的合理應(yīng)用。本書(shū)貫穿理論聯(lián)系實(shí)際的原則，力求原理清晰、簡(jiǎn)明規(guī)范、通俗易懂、要點(diǎn)突出、指導(dǎo)性強(qiáng)，強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)的影響因素和關(guān)鍵的注意事項(xiàng)，以減少讀者在實(shí)驗(yàn)方法選擇上的失誤和操作上的差錯(cuò)。本書(shū)編者大多是有著豐富的免疫學(xué)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，且在一線從事免疫學(xué)科研工作的中青年教師。　　本書(shū)適合免疫學(xué)及相關(guān)專(zhuān)業(yè)的本科生，特別是研究生學(xué)習(xí)與研究使用，對(duì)廣大醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)工作者也有極大的參考價(jià)值。

書(shū)籍目錄

第一章　單核吞噬細(xì)胞 第二章　樹(shù)突狀細(xì)胞 第三章　NK與NKT細(xì)胞 第四章　T淋巴細(xì)胞 第五章　B淋巴細(xì)胞 第六章　抗原制備的原理及應(yīng)用 第七章　抗體 第八章　補(bǔ)體 第九章　細(xì)胞因子及細(xì)胞因子受體 第十章　人白細(xì)胞抗原分型技術(shù) 第十一章　模式識(shí)別受體 第十二章　免疫熒光技術(shù) 第十三章　放射免疫技術(shù) 第十四章　免疫酶技術(shù) 第十五章　發(fā)光免疫分析技術(shù) 第十六章　免疫磁珠技術(shù) 第十七章　PCR和定量PCR 第十八章　基因克隆和表達(dá)技術(shù) 第十九章　RNA干擾技術(shù) 第二十章　miRNA技術(shù) 第二十一章　蛋白質(zhì)電泳和鑒定技術(shù) 第二十二章　蛋白質(zhì)印跡 第二十三章　蛋白質(zhì)相互作用 第二十四章　免疫學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 第二十五章　流式細(xì)胞術(shù) 第二十六章　細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的檢測(cè) 第二十七章　免疫組織化學(xué)技術(shù) 第二十八章　免疫細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究技術(shù) 第二十九章　激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù) 第三十章　自身免疫病和炎癥性疾病動(dòng)物模型 第三十一章　感染性疾病動(dòng)物模型 第三十二章　移植排斥實(shí)驗(yàn)研究的小動(dòng)物模型 第三十三章　腫瘤動(dòng)物模型 第三十四章　轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的建立 第三十五章　基因敲除動(dòng)物的建立 附錄 　附錄A　常用緩沖液與試劑 　附錄B　免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 　參考文獻(xiàn) 　附錄C　常用術(shù)語(yǔ)（中英文對(duì)照） 彩圖

章節(jié)摘錄

　　一、免疫酶技術(shù)的原理　　20世紀(jì)中期，以放射免疫技術(shù)為代表的各種標(biāo)記免疫技術(shù)相繼問(wèn)世，主要原理是將某種可微量或超微量測(cè)定的物質(zhì)（如酶、放射性核素、熒光素、化學(xué)發(fā)光劑等）標(biāo)記于抗原（抗體）上制成標(biāo)記物，加入到抗原（抗體）的反應(yīng)體系中與相應(yīng)的抗體（抗原）反應(yīng)，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物的有無(wú)及含量而間接反映被檢測(cè)物的存在與多少。這種將標(biāo)記技術(shù)與抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來(lái)的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)以其敏感性高、準(zhǔn)確性好、操作簡(jiǎn)便、易于商品化和自動(dòng)化等特點(diǎn)逐漸廣泛應(yīng)用于抗原、抗體、補(bǔ)體、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子等免疫相關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)，也用于酶、微量元素、激素、微量蛋白等體液中各種微量物質(zhì)的檢查。其中，免疫酶技術(shù)作為經(jīng)典的三大標(biāo)記技術(shù)（熒光抗體技術(shù)、放射免疫分析和免疫酶技術(shù)）之一，在免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)及其他相關(guān)學(xué)科的研究中得到最為廣泛的應(yīng)用并不斷得以發(fā)展。　　免疫酶技術(shù)是把抗原一抗體的特異性免疫學(xué)結(jié)合反應(yīng)與酶的高效催化作用原理有機(jī)結(jié)合起來(lái)的一種方法，即把具有高效催化活性的酶類(lèi)分子通過(guò)化學(xué)的方法和抗體（或抗原）結(jié)合起來(lái)成為酶標(biāo)記物，而所結(jié)合的酶分子并不影響其標(biāo)記的抗原（或抗體）的免疫反應(yīng)性，使得酶標(biāo)記物同時(shí)具有免疫反應(yīng)性和化學(xué)反應(yīng)性，將其與待測(cè)的抗原（或抗體）結(jié)合后，通過(guò)酶的活性降解相應(yīng)底物呈現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的顏色反應(yīng)，從而顯示出該免疫學(xué)反應(yīng)的存在，達(dá)到檢測(cè)抗原（或抗體）的目的。酶的活性、被降解的底物的多少與最終顯色反應(yīng)的程度呈一定的比例關(guān)系，顯色越深，說(shuō)明酶降解底物的量越大，與酶標(biāo)抗體（或抗原）相結(jié)合的對(duì)應(yīng)的待測(cè)抗原（或抗體）量也就越多。此技術(shù)廣泛用于已知或未知抗原、抗體的定性和（或）定量檢測(cè)，也可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學(xué)技術(shù)（參見(jiàn)第二十七章）。

圖書(shū)封面

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