生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

本書(shū)第一版問(wèn)世后，承蒙讀者厚愛(ài)，不少大專(zhuān)院校選用該書(shū)作為實(shí)驗(yàn)教材，本書(shū)已重印6次。許多任課教師和讀者反映，該教材的編寫(xiě)風(fēng)格簡(jiǎn)明、實(shí)驗(yàn)方案順暢以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果明顯；同時(shí)，對(duì)不足之處也提出了許多寶貴的意見(jiàn)。在此，全體編者向各位同仁表示衷心的感謝！在新版教材中，我們根據(jù)讀者的反饋意見(jiàn)和學(xué)科發(fā)展的特點(diǎn)，剔除了個(gè)別采用率低的實(shí)驗(yàn)，為更好地配合生物化學(xué)課堂教學(xué)內(nèi)容，又新增了酶動(dòng)力學(xué)和有關(guān)糖類(lèi)的實(shí)驗(yàn)，同時(shí)引入少量易操作的現(xiàn)代生物化學(xué)簡(jiǎn)明實(shí)驗(yàn)。修訂后的教材除繼續(xù)保持第一版的簡(jiǎn)明風(fēng)格外，更加注重了內(nèi)容上的嚴(yán)謹(jǐn)性和適用性。新版教材雖經(jīng)全體編者悉心勘校，疏漏和不妥之處仍在所難免，懇請(qǐng)讀者繼續(xù)給予熱忱的關(guān)注和支持，并提出寶貴意見(jiàn)。

內(nèi)容概要

　　《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程（第2版）》比較系統(tǒng)、全面地介紹了生物化學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法。全書(shū)共分為三部分，第一部分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，介紹生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理和技術(shù)。第二部分為綜合性實(shí)驗(yàn)，主要介紹蛋白質(zhì)的純化和鑒定及部分分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。這兩部分內(nèi)容涵蓋蛋白質(zhì)、核酸、酶、維生素、糖、脂、激素的分離、制備、性質(zhì)功能及定性和定量分析技術(shù)，包括層析法、分光光度法、電泳法、離心分離法及物質(zhì)代謝研究法等。第三部分為研究性實(shí)驗(yàn)，以培養(yǎng)獨(dú)立科研能力為主要目的。　　《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程（第2版）》的實(shí)驗(yàn)方法嚴(yán)謹(jǐn)可靠，可操作性強(qiáng)，可供高等師范院校生命科學(xué)專(zhuān)業(yè)的本、專(zhuān)科學(xué)生使用，也可供非師范院校相關(guān)專(zhuān)業(yè)的學(xué)生、生命科學(xué)研究工作者和中學(xué)生物學(xué)教師參考。

書(shū)籍目錄

再版說(shuō)明 第二版前言 第一部分 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)1 氨基酸的分離鑒定——紙層析法 實(shí)驗(yàn)2 凝膠層析法使蛋白質(zhì)脫鹽 實(shí)驗(yàn)3 蛋白質(zhì)的沉淀與透析 實(shí)驗(yàn)4 膜分離技術(shù)——離心超濾法純化和濃縮蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)5 微量凱氏(Micro-Kjeldahl)定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 實(shí)驗(yàn)6 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 實(shí)驗(yàn)7 考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量 實(shí)驗(yàn)8 紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 實(shí)驗(yàn)9 乙酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白 實(shí)驗(yàn)10 聚丙烯酰胺凝膠圓盤(pán)電泳分離血清蛋白 實(shí)驗(yàn)11 酶的特異性 實(shí)驗(yàn)12 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)——pH、溫度、激活劑、抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 實(shí)驗(yàn)13 琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制 實(shí)驗(yàn)14 脲酶Km值的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)15 過(guò)氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳分離及鑒定 實(shí)驗(yàn)16 酵母RNA的提取與組分鑒定 實(shí)驗(yàn)17 動(dòng)物肝臟DNA的提取與檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)18 RNA定量測(cè)定——改良苔黑酚法 實(shí)驗(yàn)19 核酸的定量測(cè)定——紫外分光光度法 實(shí)驗(yàn)20 乙酸纖維素薄膜電泳分離核苷酸 實(shí)驗(yàn)21 維生素C的定量測(cè)定——2，6—二氯酚靛酚滴定法 實(shí)驗(yàn)22 血糖含量的測(cè)定(Folin-Wu法) 實(shí)驗(yàn)23 植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定(蒽酮法) 實(shí)驗(yàn)24 飽食、饑餓、腎上腺素、胰島素對(duì)肝糖原含量的影響 實(shí)驗(yàn)25 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活性的比較 實(shí)驗(yàn)26 脂肪酸的β—氧化 實(shí)驗(yàn)27 血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的測(cè)定 第二部分 綜合性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)28 細(xì)胞色素C的提取制備與含量測(cè)定 實(shí)驗(yàn)29 凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量 實(shí)驗(yàn)30 質(zhì)粒的提取、酶切與電泳分析 實(shí)驗(yàn)31 聚合酶鏈反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)32 蛋白質(zhì)印跡(Western—Blottong) 第三部分 研究性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)33 轉(zhuǎn)基因植物的PCR鑒定 實(shí)驗(yàn)34 植物熱激蛋白的Western—Blotting分析 實(shí)驗(yàn)35 讀碼框架影響融合蛋白表達(dá)正確性 附錄 實(shí)驗(yàn)報(bào)告范例一 實(shí)驗(yàn)報(bào)告范例二 參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

插圖：一般是用100g該物質(zhì)（干重）中所含氮的克數(shù)來(lái)表示（％）。因此在消化前，應(yīng)先將固體樣品中的水分除掉。一般樣品烘干的溫度都采用105度，因?yàn)榉怯坞x的水都不能在100度以下烘干。取一定量磨細(xì)的樣品放入已稱(chēng)重的稱(chēng)量瓶?jī)?nèi)，然后置于105度：的烘箱內(nèi)持續(xù)干燥4h。用坩堝鉗將稱(chēng)量瓶取出放人干燥器內(nèi)，待降至室溫后稱(chēng)重。按上述操作繼續(xù)烘干樣品，每干燥1h重復(fù)稱(chēng)量一次，直至兩次稱(chēng)量數(shù)值不變，即達(dá)到恒重。精確稱(chēng)量已達(dá)恒重的面粉0.1g作為本實(shí)驗(yàn)的樣品。3.消化（1）編號(hào)取清潔干燥100ml凱氏燒瓶4個(gè)，標(biāo)號(hào)后各加數(shù)粒玻璃珠。（2）加樣在1、2號(hào)瓶中各加樣品0.1g，混合催化劑0.2g，消化液5ml。注意加樣品時(shí)應(yīng)直接送人瓶底，而不要黏在瓶口和瓶頸上。在3及4號(hào)瓶中各加蒸餾水0.1ml代替樣品，其他試劑同樣品瓶，作為對(duì)照，用以測(cè)定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì)。（3）加熱消化每個(gè)瓶口放一漏斗，在通風(fēng)櫥內(nèi)，于電爐上加熱消化。開(kāi)始消化時(shí)應(yīng)以微火加熱，不要使液體沖到瓶頸或沖出瓶外，否則將嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果。待瓶?jī)?nèi)水汽蒸完，H2SO4開(kāi)始分解并放出SQ白煙后，適當(dāng)加強(qiáng)火力，使瓶?jī)?nèi)液體微微沸騰而不致跳蕩。繼續(xù)消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。（4）定容消化完畢，靜置，待燒瓶中液體冷卻后，緩慢沿瓶壁加蒸餾水10ml，隨加隨搖。冷卻后將瓶?jī)?nèi)液體傾人50m1的容量瓶中，并以少量蒸餾水洗燒瓶數(shù)次，將洗液并人容量瓶中，并加水稀釋到刻度，混勻備用。4.蒸餾（1）蒸餾器的洗滌1）接通冷凝水，打開(kāi)自由夾②。先向蒸汽發(fā)生器中加入一定量的水（以排水管的高度為宜），并關(guān)閉自由夾②，用酒精燈將其加熱燒開(kāi)。2）將蒸餾水由加樣漏斗加人反應(yīng)室，關(guān)閉自由夾①，移開(kāi)酒精燈片刻，可使反應(yīng)室中的水自動(dòng)吸出，如此反復(fù)清洗3-5次。

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