組織學(xué)實驗技術(shù)

前言

　　本書是為全國中醫(yī)藥院校研究生和7年制學(xué)生學(xué)習(xí)組織學(xué)實驗技術(shù)而編寫的專用教材。本教材是由上海中醫(yī)藥大學(xué)以及山東、廣西、湖北、福建、遼寧等全國9所中醫(yī)藥大學(xué)參加編寫，參加教材編寫的均為上述中醫(yī)藥院校教學(xué)和科研第一線的教師，具有豐富的實踐經(jīng)驗?！　〗M織學(xué)實驗技術(shù)是醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)重要的研究手段，伴隨著科技進(jìn)步，新的技術(shù)和方法層出不窮。從浩瀚的組織學(xué)技術(shù)中選出實用的部分，作為中醫(yī)藥院校7年制學(xué)生和研究生的教學(xué)內(nèi)容，使學(xué)生在有限的學(xué)時內(nèi)能掌握組織學(xué)技術(shù)的基本方法，為從事科研工作和撰寫科研論文打下良好的基礎(chǔ)，是編寫本教材的目的?！　「鶕?jù)中醫(yī)藥院校開設(shè)本課程課時相對較少的特點，本教材遵循的編寫原則是：理論與實踐相結(jié)合，簡明、實用，并體現(xiàn)先進(jìn)性和科學(xué)性。先進(jìn)性體現(xiàn)在選入本教材的技術(shù)和方法能代表當(dāng)前本領(lǐng)域內(nèi)較先進(jìn)的水平；實用性指選入本教材的技術(shù)和方法必須具有很強的可操作性。本書除對每一種技術(shù)方法的實驗原理進(jìn)行簡要的敘述外，主要指導(dǎo)學(xué)生怎樣進(jìn)行實驗操作、如何判斷實驗結(jié)果，并指出實驗過程中應(yīng)注意的事項。其中不乏編者多年科研工作中的實踐經(jīng)驗。附錄中介紹了一些常用試劑和緩沖液的配制、專用名詞的中英文對照；彩圖部分為各種實驗結(jié)果的顯微鏡圖像，可供學(xué)生在實驗操作過程中參考?！　∠Ｍㄟ^本課程的學(xué)習(xí)，能提高學(xué)生獨立操作的實踐能力，掌握組織學(xué)實驗技術(shù)的基本原理和操作，并應(yīng)用于研究課題之中。在實際工作中能靈活運用所學(xué)技能，觸類旁通，拓寬思路而不至于拘泥不化，以達(dá)到提高科研能力和啟發(fā)創(chuàng)新的目的。

內(nèi)容概要

　　《組織學(xué)實驗技術(shù)（供研究生和7年制各專業(yè)用）》涵蓋了組織形態(tài)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)經(jīng)典的組織學(xué)切片技術(shù)和近年來新發(fā)展的、有較高實用價值的新技術(shù)。其主要內(nèi)容包括組織學(xué)的制片過程及常用特殊染色方法，核酸、糖、脂類和酶的組織化學(xué)方法，免疫組織化學(xué)和熒光組織化學(xué)技術(shù)，核酸分子原位雜交技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，電鏡技術(shù)，激光共聚焦顯微鏡技術(shù)和顯微圖像分析技術(shù)等；并對各種技術(shù)方法的實驗原理、具體操作及應(yīng)用價值等作了較為全面的介紹，并附有各種實驗結(jié)果的彩色顯微圖片以供參考。《組織學(xué)實驗技術(shù)》實用性、可操作性強，可作為中醫(yī)類研究生和7年制學(xué)生的教材，也可供科研人員、臨床病理醫(yī)務(wù)工作者參考。

書籍目錄

前言第1章　組織學(xué)常規(guī)制片基本技術(shù)第一節(jié)　組織學(xué)制片方法分類第二節(jié)　組織切片標(biāo)本制作程序第三節(jié)　常用的特殊染色方法第2章　組織化學(xué)第一節(jié)　核酸的組織化學(xué)第二節(jié)　脂類的組織化學(xué)第三節(jié)　糖類的組織化學(xué)第四節(jié)　酶的組織化學(xué)第3章　免疫組織化學(xué)第一節(jié)　抗原和抗體第二節(jié)　樣品的制備第三節(jié)　免疫組織化學(xué)基本原理第四節(jié)　免疫組織化學(xué)染色步驟第4章　原位雜交組織化學(xué)第一節(jié)　原位雜交的基本原理第二節(jié)　原位雜交組織化學(xué)的基本程序第三節(jié)　常用原位雜交的操作程序第5章　熒光組織化學(xué)第一節(jié)　熒光顯微鏡第二節(jié)　組織和細(xì)胞熒光分類第三節(jié)　生物胺熒光組織化學(xué)第四節(jié)　一般熒光組織化學(xué)技術(shù)第五節(jié)　免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)第6章　組織細(xì)胞培養(yǎng)第一節(jié)　組織細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)第二節(jié)　常用的儀器設(shè)備與器材第三節(jié)　清洗、包裝和滅菌第四節(jié)　基本培養(yǎng)技術(shù)第五節(jié)　細(xì)胞凍存和復(fù)蘇第六節(jié)　細(xì)胞培養(yǎng)的污染與控制第7章　電子顯微鏡技術(shù)第一節(jié)　透射電子顯微鏡技術(shù)第二節(jié)　掃描電子顯微鏡技術(shù)第三節(jié)　免疫電子顯微鏡技術(shù)第8章　激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)第一節(jié)　激光掃描共聚焦顯微鏡概述第二節(jié)　激光共聚焦顯微鏡的基本功能第三節(jié)　熒光探針的選擇第四節(jié)　激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用第9章　顯微圖像分析技術(shù)第一節(jié)　顯微圖像分析系統(tǒng)的基本原理第二節(jié)　顯微圖像分析系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)第三節(jié)　顯微圖像分析的基本程序附錄1　實驗室常用試劑及緩沖液的配制方法附錄2　英漢名稱對照表附錄3　漢英名稱對照表參考文獻(xiàn)

章節(jié)摘錄

　　二、固定和固定液　?。ㄒ唬┕潭ǖ哪康暮鸵饬x　　制作標(biāo)本的關(guān)鍵在于取材后盡可能接近活體的正常狀態(tài)。機體死亡或組織離開機體后，細(xì)胞會逐漸死亡，如果不立即處理，則細(xì)胞內(nèi)的酶（水解酶）會使蛋白質(zhì)分解為氨基酸滲出細(xì)胞，使細(xì)胞溶解破壞，結(jié)構(gòu)消失，因此不利于形態(tài)學(xué)的觀察。在無冷藏條件的情況下，更可因其病原微生物的迅速繁殖而腐敗。為防止組織成分的自溶、消失，必須使其轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘奈镔|(zhì)以便于保存，因此需要對組織立即進(jìn)行固定。所謂固定，即借助化學(xué)試劑使組織和細(xì)胞中的有機和無機成分凝固或沉淀，停止發(fā)生死后組織變化，盡量保持其活體狀態(tài)的過程。用于固定組織的化學(xué)試劑稱為固定劑，由固定劑配制的溶液稱為固定液?！　」潭煞乐辜?xì)胞發(fā)生自溶或組織變化，使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等各種成分轉(zhuǎn)變成不溶性物質(zhì)；固定除了可保持組織和細(xì)胞與正常生活時的形態(tài)相似，還可使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來而產(chǎn)生不同的折射率，造成光學(xué)上的差異，有利于組織著色和染色后的鑒別與觀察；固定過的組織還有利于切片的進(jìn)行，因為固定液兼有硬化作用，可使組織硬化，增加組織硬度，因此便于組織切片；固定還可防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)；有的固定液還具有媒染作用，如重鉻酸鉀、鉻酸等，媒染可使細(xì)胞易于著色。及時和適當(dāng)?shù)墓潭▽τ跍?zhǔn)備用于做免疫組織化學(xué)或原位雜交的標(biāo)本是非常重要的，它可使組織細(xì)胞的抗原性、DNA、RNA等不被破壞?！　。ǘ┕潭ǖ姆椒ā　「鶕?jù)需要進(jìn)行固定的組織的大小、性質(zhì)等的不同，應(yīng)選用不同的固定方法，常用的固定方法有：　　1.浸泡固定法將切取的小塊材料，直接投入固定液中固定。此種方法取的組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透，特別是某些致密組織的中央部分，待固定液完全滲透，其中央部分的細(xì)胞可能已經(jīng)變性，影響固定的效果?！　?.注射、灌注固定法　　某些組織塊由于體積過大或固定液極難流入內(nèi)部或需要對整個臟器或整個動物進(jìn)行固定，就可采用注射或灌注固定法。固定時將固定液直接注入動物的血管，經(jīng)血管分支到達(dá)整個組織或全身，從而使之得以充分的固定?！　?.蒸汽固定法一些比較細(xì)小而薄的標(biāo)本，可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。此法主要用于血液或細(xì)胞涂片、印片以及某些薄膜組織的固定?！　。ㄈ┕潭▌┑男再|(zhì)　　固定劑的種類很多，有的是還原劑，有的是氧化劑，它們對組織的固定作用各有優(yōu)缺點，但無論是哪種固定劑，都以具備下列性質(zhì)者為佳：　?。?）具備較強的滲透力，能較迅速地滲入組織內(nèi)部，使組織保持與活體時相似的狀態(tài)。對組織各部分的滲透力相等，使組織內(nèi)外完全固定，便于保存?！　。?）盡可能避免使組織過度膨脹或收縮而變形，不至于因固定引起人為的改變?！　。?）能迅速使細(xì)胞或組織中的成分（糖、蛋白質(zhì)等）凝固成不溶性的物質(zhì)而保存下來。

編輯推薦

　　本教材遵循的編寫原則是：理論與實踐相結(jié)合，簡明、實用，并體現(xiàn)先進(jìn)性和科學(xué)性。本書除對每一種技術(shù)方法的實驗原理進(jìn)行簡要的敘述外，主要指導(dǎo)學(xué)生怎樣進(jìn)行實驗操作、如何判斷實驗結(jié)果，并指出實驗過程中應(yīng)注意的事項。附錄中介紹了一些常用試劑和緩沖液的配制、專用名詞的中英文對照；彩圖部分為各種實驗結(jié)果的顯微鏡圖像，可供學(xué)生在實驗操作過程中參考?！　∠Ｍㄟ^本課程的學(xué)習(xí)，能提高學(xué)生獨立操作的實踐能力，掌握組織學(xué)實驗技術(shù)的基本原理和操作，并應(yīng)用于研究課題之中。在實際工作中能靈活運用所學(xué)技能，觸類旁通，拓寬思路而不至于拘泥不化，以達(dá)到提高科研能力和啟發(fā)創(chuàng)新的目的。

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