單分子技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南

前言

　　20世紀(jì)90年代后期，由于科學(xué)發(fā)展的必然以及技術(shù)條件的漸臻完備，興起了以研究活細(xì)胞大分子為目的的單分子研究，有人稱(chēng)之為單分子生物學(xué)（biology in singulo），它是21世紀(jì)生命科學(xué)發(fā)展的一個(gè)重要方向，其前景非常廣闊?！　　秵畏肿蛹夹g(shù)實(shí)驗(yàn)指南》就是為了滿足這一客觀需要而出版的，它涵蓋了相關(guān)的各項(xiàng)技術(shù)，是世界范圍內(nèi)第一本較全面介紹單分子技術(shù)的技術(shù)手冊(cè)專(zhuān)著。它的特色是：①內(nèi)容新穎，都是最近幾年的實(shí)驗(yàn)資料和經(jīng)驗(yàn)總結(jié)；②內(nèi)容翔實(shí)，都是各實(shí)驗(yàn)室自己做過(guò)的實(shí)驗(yàn)資料；③有一定的理論闡述，主要見(jiàn)于各章的概論部分。所以，這本手冊(cè)將會(huì)幫助有關(guān)科研人員較快地掌握和運(yùn)用單分子技術(shù)；另外，閱讀各章節(jié)前面所寫(xiě)的理論引言，對(duì)于我們理解單分子行為也有所裨益。　　單分子研究對(duì)于我國(guó)的基礎(chǔ)科學(xué)，特別是生命科學(xué)研究具有重要意義，對(duì)于推進(jìn)我國(guó)的科學(xué)、技術(shù)發(fā)展也會(huì)有長(zhǎng)遠(yuǎn)、持久的作用?！秵畏肿蛹夹g(shù)實(shí)驗(yàn)指南》中譯本的問(wèn)世，一定會(huì)對(duì)我國(guó)單分子研究的發(fā)展起到良好的推動(dòng)作用。

內(nèi)容概要

生命過(guò)程的單分子研究是一個(gè)新興的研究領(lǐng)域，常常清晰并令人驚奇地揭示出生物大分子的精細(xì)工作。本書(shū)在世界范圍內(nèi)首次較全面地介紹廠單分子研究技術(shù)，主要涉及兩大類(lèi)技術(shù)，一是熒光成像和光譜學(xué)技術(shù)，二是基于力學(xué)的操作和檢測(cè)。全書(shū)共分21章。第1章對(duì)單分子技術(shù)的發(fā)展做了回顧和展望，其余20章均以技術(shù)為主題，除扼要介紹相關(guān)理論外，主要是結(jié)合具體的研究實(shí)例較詳細(xì)地介紹實(shí)驗(yàn)方法。本書(shū)語(yǔ)言清晰易懂，具有很強(qiáng)的實(shí)用性。    本書(shū)不僅對(duì)單分子生物學(xué)領(lǐng)域的專(zhuān)家具有重要的參考價(jià)值，更重要的是對(duì)那些想要在單分子領(lǐng)域做些研究的研究生、博士后及其他研究者也將會(huì)是極大的幫助。

書(shū)籍目錄

中譯本序前言第1章  單分子生物學(xué)的新時(shí)代第2章  采用全內(nèi)反射顯微鏡的單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)第3章  在體和離體條件下用單納米精度的熒光成像技術(shù)觀察分子馬達(dá)的第4章  熒光探針共定位：具有納米級(jí)分辨率的精準(zhǔn)定位第5章  交替激光激發(fā)的單分子檢測(cè)第6章  采用偏振全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)觀察單分子的取向和旋轉(zhuǎn)第7章  單分子水平的活細(xì)胞基因表達(dá)的成像第8章  活細(xì)胞內(nèi)單個(gè)病毒的示蹤第9章  采用熒光量子點(diǎn)進(jìn)行活細(xì)胞超敏感成像第10章  活體實(shí)時(shí)基因表達(dá)成像技術(shù)第11章  活細(xì)胞內(nèi)隨機(jī)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件的單分子成像技術(shù)第12章  離體和在體的熒光相關(guān)光譜術(shù)第13章  采用光阱技術(shù)研究分子馬達(dá)的性質(zhì)第14章  高分辨雙光阱光鑷的差分檢測(cè)第15章  肌動(dòng)球蛋白馬達(dá)的成像和納米操縱技術(shù)第16章  采用磁阱技術(shù)的單分子研究第17章  利用原子力顯微鏡進(jìn)行多糖和蛋白質(zhì)的力學(xué)探測(cè)第18章  用納米孔技術(shù)進(jìn)行核酸及DNA-蛋白質(zhì)相互作用的單分子研究第19章  無(wú)外部負(fù)載、具有高時(shí)空分辨率的單分子納米金顆粒示蹤技術(shù)第20章  基于表面的單分子檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)展第21章  液流牽張力分析法用于核酸一蛋白質(zhì)相互作用的單分子研究附錄  警示索引圖版

章節(jié)摘錄

　　有高數(shù)值孔徑（NA）的物鏡一般用于單分子監(jiān)測(cè)，一個(gè)大的收集角度可以有效檢測(cè)到來(lái)自隨意取向的熒光團(tuán)的光子。對(duì)于溶液中的μs-ALEX，油鏡頭（NA 1.3～1.45）提供最大的收集效率，但是工作距離有限（溶液中0～20μm）。高數(shù)值孔徑的水鏡（NA＝1.2）提供大的工作距離（水中達(dá)到50μm）并減少相差（接近理想的點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)）。物鏡一般從顯微鏡供應(yīng)商處訂購(gòu)以確保兼容?！　《止馄鳌　》止馄鞯哪康氖亲尲ぐl(fā)光通過(guò)物鏡的后孔徑到樣品上并把發(fā)射光傳遞到檢測(cè)路徑。對(duì)于ALEX的應(yīng)用，商業(yè)途徑得到的多色分光器（或者AOTF，見(jiàn)前文，調(diào)制部分，以及下文，毫秒級(jí)ALEX：在毫秒尺度監(jiān)測(cè)構(gòu)象的動(dòng)態(tài)）用來(lái)保證幾條激光同時(shí)被反射和傳遞?！　★@微鏡臺(tái)和溫度控制　　溶液中ALEX實(shí)驗(yàn)不需要納米方位臺(tái)和帶馬達(dá)的臺(tái)子。一個(gè)xy方向的機(jī)械顯微鏡平臺(tái)用于放置樣品，它一般放置在一個(gè)5～100μl的小空間內(nèi)，用一個(gè)打孔的塑料墊圈放置于兩個(gè)玻璃片之間構(gòu)成。溫度控制通過(guò)冷卻或加熱設(shè)備實(shí)現(xiàn)，或者通過(guò)商品化的溫度恒定的樣品室罩在顯微鏡外面。　　實(shí)驗(yàn)板　　很多情況下，熒光發(fā)射連到顯微鏡的下端口。這需要用一個(gè)帶有環(huán)形開(kāi)口的和顯微鏡低口匹配的實(shí)驗(yàn)板把顯微鏡提升30 cm，還需要光學(xué)臺(tái)上4個(gè)支腳。　　發(fā)射模塊　　離開(kāi)顯微鏡的熒光通過(guò)下部開(kāi)口到檢測(cè)模塊（圖5—4）。在顯微鏡的下部開(kāi)口之后，一個(gè)針孔位于鏡頭的焦面上（這是桶形鏡頭，焦距的長(zhǎng)度從制造商得到。通常，焦點(diǎn)接近顯微鏡的下部開(kāi)口）。針孔就位于xy方向的定位器上并帶有一個(gè)微米尺，用來(lái)定位。這對(duì)第一次的校準(zhǔn)很有用，探測(cè)器不需要針孔來(lái)校準(zhǔn)。

編輯推薦

　　本書(shū)介紹細(xì)胞生物學(xué)及其他相關(guān)領(lǐng)域重要的新實(shí)驗(yàn)技術(shù)——單分子技術(shù)，具有國(guó)際先進(jìn)水平和重要理論意義及潛在的高科技應(yīng)用價(jià)值，是國(guó)際上第一本較全面介紹單分子技術(shù)的技術(shù)手冊(cè)專(zhuān)著。本書(shū)適讀于相關(guān)領(lǐng)域研究生、教師及科研人員。

圖書(shū)封面

圖書(shū)標(biāo)簽Tags

無(wú)

評(píng)論、評(píng)分、閱讀與下載

---

    單分子技術(shù)實(shí)驗(yàn)指南 PDF格式下載

---