醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

　　醫(yī)學(xué)是一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的科學(xué)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)是高等醫(yī)學(xué)教育的重要內(nèi)容。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，可以培養(yǎng)學(xué)生認(rèn)真的觀察與深入的思考以及提出問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力，在培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力的同時(shí)也可進(jìn)一步的啟發(fā)和培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維與綜合素質(zhì)。而生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)是醫(yī)學(xué)各專(zhuān)業(yè)的學(xué)生必修的課程之一，也是醫(yī)學(xué)許多學(xué)科進(jìn)行科學(xué)研究的重要手段。　　隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，生物化學(xué)特別是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展更是突飛猛進(jìn)。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)教學(xué)中越來(lái)越感到原有的實(shí)驗(yàn)教材有待進(jìn)一步的更新與完善。因此，我們?cè)诳偨Y(jié)了多年實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，參照現(xiàn)有的教學(xué)大綱，聯(lián)合編寫(xiě)了這本生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教材?！　”窘滩膬?nèi)容主要有以下幾個(gè)方面?！　。?）醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)，這部分內(nèi)容除了介紹一些基本實(shí)驗(yàn)室規(guī)則外，主要介紹本學(xué)科的基本技術(shù)和一些常用的儀器設(shè)備?！　。?）醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基本技術(shù)原理，本篇介紹了生物化學(xué)的四大基本技術(shù)：分光光度技術(shù)、離心技術(shù)、電泳技術(shù)及層析技術(shù)；分子生物學(xué)的基本技術(shù)：核酸分離純化技術(shù)、PCR技術(shù)、轉(zhuǎn)移印跡和分子雜交技術(shù)及基因工程技術(shù)等基本原理?！　。?）醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，主要以驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)為主，以掌握實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)和驗(yàn)證現(xiàn)有理論為目的。　?。?）醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，這篇有兩部分構(gòu)成：①綜合實(shí)驗(yàn)，主要綜合運(yùn)用所學(xué)習(xí)多種知識(shí)解決一個(gè)相對(duì)較為復(fù)雜的問(wèn)題；②設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，主要通過(guò)提出問(wèn)題、解決問(wèn)題培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維?！　”窘滩倪m用于醫(yī)學(xué)，衛(wèi)生，藥學(xué)口腔檢驗(yàn)，生物技術(shù)，法醫(yī)學(xué)等專(zhuān)業(yè)五年制，七年制本科和研究生實(shí)驗(yàn)教學(xué)使用，也可供相關(guān)專(zhuān)業(yè)的科研人員和研究生使用。　　本教材的編寫(xiě)大多是由有著多年生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的老師親自執(zhí)筆編寫(xiě)的，字里行間凝聚了他們對(duì)教學(xué)事業(yè)的熱愛(ài)和熱情，也是對(duì)多年實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)和積累。在本教材的編寫(xiě)過(guò)程中還得到了各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)和相關(guān)部門(mén)的大力支持與幫助，在此表示由衷的感謝。此外，安徽醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室的羅欣、顧芳、黃海良老師除了參與部分內(nèi)容的編寫(xiě)，在校對(duì)及插圖等方面做了大量的工作、在此一并表示感謝?！　∮捎诰帉?xiě)的時(shí)間倉(cāng)促，編者的水平有限，本教材有可能還存在著一些不足之處甚至錯(cuò)誤，懇請(qǐng)同行專(zhuān)家和讀者批評(píng)、指正，以便于我們今后進(jìn)一步的提高和完善。

內(nèi)容概要

　　實(shí)驗(yàn)教學(xué)是醫(yī)學(xué)教育的重要組成部分，是培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力的主要部分。生物化學(xué)與分子生物學(xué)是生物醫(yī)學(xué)的前沿學(xué)科也是各醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)的基礎(chǔ)，因此，我們結(jié)合現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展和醫(yī)學(xué)教育的特點(diǎn)編寫(xiě)了這本教材。本教材分為四篇，第一篇醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)，共分為三章；第二篇是醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基本技術(shù)原理，共分為八章；第三篇為醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，共分為六章；第四篇是醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，主要通過(guò)循序漸進(jìn)的方式，培養(yǎng)學(xué)生的綜合創(chuàng)新能力和創(chuàng)新思維?！　”窘滩倪m合醫(yī)藥院校各專(zhuān)業(yè)的本專(zhuān)科學(xué)生及研究生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，同時(shí)也可以作為青年教師的參考書(shū)。

書(shū)籍目錄

第一篇 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)第一章 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般知識(shí)第一節(jié) 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本特點(diǎn)第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室安全及規(guī)則第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告書(shū)寫(xiě)第二章 基本實(shí)驗(yàn)操作第一節(jié) 洗滌和干燥第二節(jié) 常用的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第三章 實(shí)驗(yàn)儀器簡(jiǎn)介第一節(jié) 分光光度計(jì)第二節(jié) 離心機(jī)第三節(jié) 高效液相色譜儀第四節(jié) 電泳儀第五節(jié) PCR儀第六節(jié) 真空冷凍干燥機(jī)第七節(jié) 高壓蒸汽滅菌鍋第八節(jié) 恒溫培養(yǎng)箱第九節(jié) 生物安全柜第二篇 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基本技術(shù)原理第四章 分光光度技術(shù)第一節(jié) 分光光度技術(shù)基本原理第二節(jié) （722型）分光光度計(jì)的簡(jiǎn)介第五章 離心技術(shù)第一節(jié) 離心技術(shù)基本原理第二節(jié) 離心機(jī)的組成第三節(jié) 離心方法第六章 電泳技術(shù)第一節(jié) 電泳技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史第二節(jié) 電泳基本原理第三節(jié) 影響電泳分離的主要因素第四節(jié) 電泳分類(lèi)第五節(jié) 常見(jiàn)電泳技術(shù)第七章 層析（色譜）技術(shù)第一節(jié) 層析（色譜）技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史第二節(jié) 層析的分類(lèi)第三節(jié) 層析方法的一般原理第四節(jié) 常見(jiàn)的層析技術(shù)第八章 核酸的分離與純化第一節(jié) 核酸分離的原則第二節(jié) 核酸分離的主要步驟第三節(jié) 核酸的純化第四節(jié) 核酸濃度的測(cè)定第五節(jié) 核酸的保存第九章 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）第一節(jié) PCR的基本原理第二節(jié) PCR反應(yīng)條件第三節(jié) 常見(jiàn)的幾種PCR技術(shù)第四節(jié) PCR技術(shù)的應(yīng)用及其注意事項(xiàng)第十章 印跡技術(shù)第十一章 基因工程第一節(jié) 基因工程發(fā)展簡(jiǎn)史第二節(jié) 基因工程基本原理第三節(jié) 基因工程的基本過(guò)程第三篇 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)第十二章 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的定性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)二 離子交換層析分離氨基酸實(shí)驗(yàn)三 凝膠層析法分離蛋白實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)定量分析實(shí)驗(yàn)五 血清蛋白的乙酸纖維薄膜電泳第十三章 酶學(xué)實(shí)驗(yàn)一 酶定性實(shí)驗(yàn)二 丙二酸抑制琥珀酸脫氫酶實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三 瓊脂糖凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶實(shí)驗(yàn)四 堿性磷酸酶Km測(cè)定實(shí)驗(yàn)五 3-磷酸甘油醛脫氫酶偶聯(lián)法測(cè)定血清醛縮酶活性第十四章 糖代謝實(shí)驗(yàn)一 運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌糖代謝的影響實(shí)驗(yàn)二 血糖濃度測(cè)定實(shí)驗(yàn)三 腎上腺素和胰島素對(duì)家兔血糖濃度的影響實(shí)驗(yàn)四 肝糖原的提取和鑒定第十五章 脂代謝實(shí)驗(yàn)一 磷酸甘油氧化酶法測(cè)定血清甘油三酯測(cè)定實(shí)驗(yàn)二 血清總膽固醇氧化酶法測(cè)定血清總膽固醇實(shí)驗(yàn)三 血清總膽固醇的測(cè)定——鄰苯二甲醛直接顯色法實(shí)驗(yàn)四 酮體的生成及鑒定實(shí)驗(yàn)五 瓊脂糖凝膠電泳分離血清脂蛋白第十六章 氨基酸代謝實(shí)驗(yàn)一 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)二 氨基移換及精氨酸酶在尿素形成中的作用第十七章 分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌質(zhì)粒DNA的提取及紫外吸收法測(cè)定核酸的含量實(shí)驗(yàn)二 質(zhì)粒DNA提?。ㄙ|(zhì)粒小量提取試劑盒）實(shí)驗(yàn)三 PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)四 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA實(shí)驗(yàn)五 肝組織中核酸的提取和核酸組分的鑒定實(shí)驗(yàn)六 真核基因組DNA的提取實(shí)驗(yàn)七 真核細(xì)胞RNA提取實(shí)驗(yàn)八 RT-PCR方法實(shí)驗(yàn)九 熒光定量PCR測(cè)定培養(yǎng)Hela細(xì)胞中GAPDH的含量第四篇 醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)第十八章 蛋白質(zhì)和酶的純化實(shí)驗(yàn)一 血清中IgG的分離純化實(shí)驗(yàn)二 紅細(xì)胞中SOD分離純化及活性鑒定第十九章 IL-29基因亞克隆及其在大腸埃希菌中表達(dá)實(shí)驗(yàn)一 PCR擴(kuò)增目的基因及其瓊脂糖凝膠電泳回收實(shí)驗(yàn)二 質(zhì)粒DNA及目的基因的限制性內(nèi)切酶酶切實(shí)驗(yàn)三 質(zhì)粒DNA與目的基因的連接實(shí)驗(yàn)四 感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)五 陽(yáng)性克隆的篩選實(shí)驗(yàn)六 克隆基因的誘導(dǎo)表達(dá)第二十章 原核表達(dá)IL-29分離純化實(shí)驗(yàn)一 包涵體的制備、洗滌實(shí)驗(yàn)二 包涵體的裂解和洗滌實(shí)驗(yàn)三 目的蛋白質(zhì)Ni2+金屬離子螯合層析分離純化實(shí)驗(yàn)四 Westlern-blot鑒定第二十一章 IL-29復(fù)性及活性鑒定實(shí)驗(yàn)一 純化蛋白的復(fù)性實(shí)驗(yàn)二 IL-29誘導(dǎo)Hela細(xì)胞中25-寡聚腺苷酸合成酶（25-OAS）的熒光定量PCR分析第二十二章 自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一 凋亡細(xì)胞DNA片斷的瓊脂糖電泳分析實(shí)驗(yàn)二 酪蛋白等電點(diǎn)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)三 雙熒光報(bào)告基因重組體的轉(zhuǎn)染及熒光顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)四 牛血清白蛋白聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳實(shí)驗(yàn)五 完全自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)附錄附一 常用緩沖溶液的配制附二 常用酸堿摩爾溶液的配制附三 常用酸堿指示劑的配制附四 常用抗凝試劑的配制附五 國(guó)際單位制的基本單位

章節(jié)摘錄

　　第一章　醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般知識(shí)　　第二節(jié)　實(shí)驗(yàn)室安全及規(guī)則　　一、實(shí)驗(yàn)室工作管理人員規(guī)則　?。?）實(shí)驗(yàn)室建立安全員制度，安全員由負(fù)責(zé)人兼任。安全員全面負(fù)責(zé)本中心的安全工作，如發(fā)現(xiàn)安全隱患，安全員有權(quán)隨時(shí)終止實(shí)驗(yàn)。　?。?）定期對(duì)全體工作人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)教育，增強(qiáng)安全意識(shí)，嚴(yán)格進(jìn)行管理，預(yù)防和避免各類(lèi)事故的發(fā)生。　?。?）定期檢查實(shí)驗(yàn)室水管、電路、氣體管路等，發(fā)現(xiàn)后及時(shí)向有關(guān)部門(mén)反映，積極采取措施解決。對(duì)長(zhǎng)期不用的管路和電源要采取可靠的安全措施。消防器材應(yīng)置于固定位置，由專(zhuān)人管理。工作人員應(yīng)熟悉和掌握其特性和正確使用方法，發(fā)生意外情況能進(jìn)行緊急處理。　?。?）保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣流通。凡對(duì)人體有害氣體的實(shí)驗(yàn)均應(yīng)要求在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，并根據(jù)其特性戴上眼鏡、手套或防護(hù)面罩等，操作后及時(shí)清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面?！　。?）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器和藥品應(yīng)分類(lèi)登記保管，特別是易燃易爆和劇毒藥品必須妥善保管，設(shè)立危險(xiǎn)品標(biāo)志，統(tǒng)一張貼或此類(lèi)藥品集中存放，使用時(shí)應(yīng)注意規(guī)范操作?！　。?）凡涉及使用毒麻藥品和危險(xiǎn)性試劑時(shí)，遵照《危險(xiǎn)性試劑及毒麻藥品使用管理規(guī)定》執(zhí)行。　?。?）對(duì)參加實(shí)驗(yàn)操作的人員要進(jìn)行安全知識(shí)及相關(guān)儀器設(shè)備使用的指導(dǎo)，對(duì)于大型儀器設(shè)備要有專(zhuān)人負(fù)責(zé)操作。

圖書(shū)封面

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