生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

前言

生物化學(xué)是當(dāng)今生命科學(xué)研究領(lǐng)域中最為活躍的學(xué)科之一，生物化學(xué)的發(fā)展和深入與其實(shí)驗(yàn)技術(shù)的迅速發(fā)展密不可分。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)不僅是生物化學(xué)的重要內(nèi)容和理論基礎(chǔ)，也已成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域中非常重要的研究手段，滲透到農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、食品等各個(gè)方面。因此學(xué)習(xí)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，掌握生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的基本原理和方法，不僅可以加強(qiáng)學(xué)生對(duì)生物化學(xué)基本理論的進(jìn)一步理解，而且可以為以后的專業(yè)課學(xué)習(xí)以及生產(chǎn)、科研工作打下一個(gè)較為牢固的基礎(chǔ)。本書(shū)是在使用多年的實(shí)驗(yàn)講義的基礎(chǔ)上編寫的，根據(jù)我們多年的教學(xué)、科研經(jīng)驗(yàn)和兄弟院校的建議，對(duì)內(nèi)容進(jìn)行了必要的調(diào)整和修改，并補(bǔ)充了許多新的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。本教材主要側(cè)重于訓(xùn)練學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)技能，使學(xué)生了解并掌握生物化學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法。在編寫過(guò)程中力求做到簡(jiǎn)明、扼要、實(shí)用性強(qiáng)。本書(shū)分為5章，精選了28個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括生物化學(xué)的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)和綜合性實(shí)驗(yàn)，還增加了部分分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)本教材的學(xué)習(xí)，要求學(xué)生掌握蛋白質(zhì)、酶、核酸、糖類及脂類的分離提取、定性鑒定或定量測(cè)定的方法；掌握分光光度法、層析、電泳、離心、透析等的基本原理及實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在附錄中，主要介紹了一些實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)注意事項(xiàng)、緩沖液配制、儀器使用說(shuō)明等，方便使用者查閱有關(guān)資料和數(shù)據(jù)。由于我們的經(jīng)驗(yàn)和水平有限，在本書(shū)編寫過(guò)程中仍有不少倉(cāng)促之處，有些實(shí)驗(yàn)內(nèi)容尚需進(jìn)一步充實(shí)完善，我們真誠(chéng)希望廣大讀者在參考使用過(guò)程中不斷向我們反饋對(duì)本書(shū)所提出的寶貴批評(píng)和建議，使本書(shū)臻趨完善。

內(nèi)容概要

　　本書(shū)是在使用多年的實(shí)驗(yàn)講義的基礎(chǔ)上編寫的，根據(jù)我們多年的教學(xué)、科研經(jīng)驗(yàn)和兄弟院校的建議，對(duì)內(nèi)容進(jìn)行了必要的調(diào)整和修改，并補(bǔ)充了許多新的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。在編寫過(guò)程中力求做到簡(jiǎn)明、扼要、實(shí)用性強(qiáng)?！　∪珪?shū)分為5章，精選了28個(gè)實(shí)驗(yàn)，除了生物化學(xué)的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)外，還增加了有關(guān)酶分離純化的綜合性實(shí)驗(yàn)及基本的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。在附錄中，主要介紹了實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)知識(shí)、常用試劑和溶液的配制、常規(guī)儀器使用說(shuō)明及常用數(shù)據(jù)列表等內(nèi)容?！　”緯?shū)適合高等院校相關(guān)學(xué)科的本科生和研究生使用。

書(shū)籍目錄

前言第一章 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)一 氨基酸的紙層析法實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)測(cè)定和沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)三 考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)四 紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量實(shí)驗(yàn)五 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量實(shí)驗(yàn)六 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)七 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳法第二章 核酸實(shí)驗(yàn)一 植物基因組DNA提取(CTAB法)實(shí)驗(yàn)二 DNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)三 酵母核糖核酸的提取及組分鑒定實(shí)驗(yàn)四 酵母核糖核酸的提制（濃鹽法）實(shí)驗(yàn)五 薄層層析法分離AMP、ADP和ATP實(shí)驗(yàn)六 質(zhì)粒DNA的分離、純化和酶切鑒定實(shí)驗(yàn)七 PCR擴(kuò)增小麥持家基因Tubulin第三章 酶實(shí)驗(yàn)一 脲酶Km值的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離小麥幼苗過(guò)氧化物酶同工酶實(shí)驗(yàn)三 酵母醇脫氫酶的分離、提純實(shí)驗(yàn)四 苯丙氨酸解氨酶的純化及活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)五 過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)六 維生素C含量的測(cè)定第四章 糖實(shí)驗(yàn)一 糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定實(shí)驗(yàn)二 還原糖和總糖含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)三 蔗糖含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)四 植物組織中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白質(zhì)的系列測(cè)定第五章 脂實(shí)驗(yàn)一 粗脂肪的定量測(cè)定——索氏提取法實(shí)驗(yàn)二 植物組織中丙二醛含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)三 脂肪碘值的測(cè)定實(shí)驗(yàn)四 卵黃中卵磷脂的提取和鑒定主要參考文獻(xiàn)附錄一附錄二

章節(jié)摘錄

插圖：第一章 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)一 氨基酸的紙層析法一、目的色層分析法已廣泛用于氨基酸、核酸、激素、維生素、糖類等物質(zhì)的分離與分析。其優(yōu)點(diǎn)是能夠分離與分析在組成、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)上極為相似的物質(zhì)，并且設(shè)備簡(jiǎn)單、操作容易、樣品用量少、結(jié)果也較準(zhǔn)確。 本實(shí)驗(yàn)的目的在于掌握紙層析法的一般原理和操作技術(shù)。二、原理紙層析法是以濾紙作為支持物的分配層析法。分配層析法利用物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同達(dá)到分離的目的。通常用。表示分配系數(shù)。在一定條件下，一種物質(zhì)在某溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)是一個(gè)常數(shù)。a=溶質(zhì)在流動(dòng)相的濃度（CL）/溶質(zhì)在靜止相的濃度（Cs）本實(shí)驗(yàn)的層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成。由于濾紙纖維與水有較強(qiáng)的親和力（紙上有很多-OH基與水以氫鍵相連），吸附很多水分，一般達(dá)濾紙重的22％左右（其中約有6％的水與纖維素結(jié)合成復(fù)合物），因此使這部分水的擴(kuò)散作用降低形成靜止相。而濾紙對(duì)有機(jī)溶劑的親和力較弱，有機(jī)溶劑可以在濾紙中因毛細(xì)管作用自由流動(dòng)，因此便形成了流動(dòng)相。層析時(shí)，將濾紙一端浸入層析溶液中。有機(jī)溶劑連續(xù)不斷地通過(guò)點(diǎn)有樣品的原點(diǎn)處，其中的溶質(zhì)因?yàn)楸旧矸峙湎禂?shù)的不同在兩相間進(jìn)行分配。分配過(guò)程為：一部分溶質(zhì)隨有機(jī)相移動(dòng)離開(kāi)原點(diǎn)而進(jìn)入無(wú)溶質(zhì)區(qū)，并重新分配，即一部分溶質(zhì)從有機(jī)相又進(jìn)入水相。隨著有機(jī)相不斷向前移動(dòng)，溶質(zhì)不斷地在兩相間進(jìn)行可逆的分配，不斷向前移動(dòng)。各種物質(zhì)在分配層析系統(tǒng)中兩相間的分配系數(shù)不同，分配系數(shù)小的溶質(zhì)在流動(dòng)相中分配的數(shù)量少，移動(dòng)的速率慢，所以各種溶質(zhì)在層析過(guò)程中由于移動(dòng)的速率不同便可以彼此分開(kāi)。

編輯推薦

《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》適合高等院校相關(guān)學(xué)科的本科生和研究生使用。由科學(xué)出版社出版。

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