生物化學(xué)實驗指導(dǎo)

前言

生物化學(xué)是當(dāng)今生命科學(xué)研究領(lǐng)域中最為活躍的學(xué)科之一，生物化學(xué)的發(fā)展和深入與其實驗技術(shù)的迅速發(fā)展密不可分。生物化學(xué)實驗技術(shù)不僅是生物化學(xué)的重要內(nèi)容和理論基礎(chǔ)，也已成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域中非常重要的研究手段，滲透到農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、食品等各個方面。因此學(xué)習(xí)生物化學(xué)實驗技術(shù)，掌握生物化學(xué)實驗技術(shù)的基本原理和方法，不僅可以加強學(xué)生對生物化學(xué)基本理論的進(jìn)一步理解，而且可以為以后的專業(yè)課學(xué)習(xí)以及生產(chǎn)、科研工作打下一個較為牢固的基礎(chǔ)。本書是在使用多年的實驗講義的基礎(chǔ)上編寫的，根據(jù)我們多年的教學(xué)、科研經(jīng)驗和兄弟院校的建議，對內(nèi)容進(jìn)行了必要的調(diào)整和修改，并補充了許多新的實驗內(nèi)容。本教材主要側(cè)重于訓(xùn)練學(xué)生的基本實驗技能，使學(xué)生了解并掌握生物化學(xué)的基本實驗方法。在編寫過程中力求做到簡明、扼要、實用性強。本書分為5章，精選了28個實驗，包括生物化學(xué)的基礎(chǔ)性實驗和綜合性實驗，還增加了部分分子生物學(xué)實驗。通過本教材的學(xué)習(xí)，要求學(xué)生掌握蛋白質(zhì)、酶、核酸、糖類及脂類的分離提取、定性鑒定或定量測定的方法；掌握分光光度法、層析、電泳、離心、透析等的基本原理及實驗技術(shù)。在附錄中，主要介紹了一些實驗室的常規(guī)注意事項、緩沖液配制、儀器使用說明等，方便使用者查閱有關(guān)資料和數(shù)據(jù)。由于我們的經(jīng)驗和水平有限，在本書編寫過程中仍有不少倉促之處，有些實驗內(nèi)容尚需進(jìn)一步充實完善，我們真誠希望廣大讀者在參考使用過程中不斷向我們反饋對本書所提出的寶貴批評和建議，使本書臻趨完善。

內(nèi)容概要

　　本書是在使用多年的實驗講義的基礎(chǔ)上編寫的，根據(jù)我們多年的教學(xué)、科研經(jīng)驗和兄弟院校的建議，對內(nèi)容進(jìn)行了必要的調(diào)整和修改，并補充了許多新的實驗內(nèi)容。在編寫過程中力求做到簡明、扼要、實用性強?！　∪珪譃?章，精選了28個實驗，除了生物化學(xué)的基礎(chǔ)性實驗外，還增加了有關(guān)酶分離純化的綜合性實驗及基本的分子生物學(xué)實驗。在附錄中，主要介紹了實驗室的安全防護(hù)知識、常用試劑和溶液的配制、常規(guī)儀器使用說明及常用數(shù)據(jù)列表等內(nèi)容?！　”緯m合高等院校相關(guān)學(xué)科的本科生和研究生使用。

書籍目錄

前言第一章 蛋白質(zhì)實驗一 氨基酸的紙層析法實驗二 蛋白質(zhì)的等電點測定和沉淀反應(yīng)實驗三 考馬斯亮藍(lán)G-250法測定蛋白質(zhì)含量實驗四 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量實驗五 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量實驗六 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測定蛋白質(zhì)的等電點實驗七 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳法第二章 核酸實驗一 植物基因組DNA提取(CTAB法)實驗二 DNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗三 酵母核糖核酸的提取及組分鑒定實驗四 酵母核糖核酸的提制（濃鹽法）實驗五 薄層層析法分離AMP、ADP和ATP實驗六 質(zhì)粒DNA的分離、純化和酶切鑒定實驗七 PCR擴增小麥持家基因Tubulin第三章 酶實驗一 脲酶Km值的測定實驗二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離小麥幼苗過氧化物酶同工酶實驗三 酵母醇脫氫酶的分離、提純實驗四 苯丙氨酸解氨酶的純化及活性測定實驗五 過氧化物酶活性的測定實驗六 維生素C含量的測定第四章 糖實驗一 糖酵解中間產(chǎn)物的鑒定實驗二 還原糖和總糖含量的測定實驗三 蔗糖含量的測定實驗四 植物組織中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白質(zhì)的系列測定第五章 脂實驗一 粗脂肪的定量測定——索氏提取法實驗二 植物組織中丙二醛含量的測定實驗三 脂肪碘值的測定實驗四 卵黃中卵磷脂的提取和鑒定主要參考文獻(xiàn)附錄一附錄二

章節(jié)摘錄

插圖：第一章 蛋白質(zhì)實驗一 氨基酸的紙層析法一、目的色層分析法已廣泛用于氨基酸、核酸、激素、維生素、糖類等物質(zhì)的分離與分析。其優(yōu)點是能夠分離與分析在組成、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)上極為相似的物質(zhì)，并且設(shè)備簡單、操作容易、樣品用量少、結(jié)果也較準(zhǔn)確。 本實驗的目的在于掌握紙層析法的一般原理和操作技術(shù)。二、原理紙層析法是以濾紙作為支持物的分配層析法。分配層析法利用物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同達(dá)到分離的目的。通常用。表示分配系數(shù)。在一定條件下，一種物質(zhì)在某溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)是一個常數(shù)。a=溶質(zhì)在流動相的濃度（CL）/溶質(zhì)在靜止相的濃度（Cs）本實驗的層析溶劑由有機溶劑和水組成。由于濾紙纖維與水有較強的親和力（紙上有很多-OH基與水以氫鍵相連），吸附很多水分，一般達(dá)濾紙重的22％左右（其中約有6％的水與纖維素結(jié)合成復(fù)合物），因此使這部分水的擴散作用降低形成靜止相。而濾紙對有機溶劑的親和力較弱，有機溶劑可以在濾紙中因毛細(xì)管作用自由流動，因此便形成了流動相。層析時，將濾紙一端浸入層析溶液中。有機溶劑連續(xù)不斷地通過點有樣品的原點處，其中的溶質(zhì)因為本身分配系數(shù)的不同在兩相間進(jìn)行分配。分配過程為：一部分溶質(zhì)隨有機相移動離開原點而進(jìn)入無溶質(zhì)區(qū)，并重新分配，即一部分溶質(zhì)從有機相又進(jìn)入水相。隨著有機相不斷向前移動，溶質(zhì)不斷地在兩相間進(jìn)行可逆的分配，不斷向前移動。各種物質(zhì)在分配層析系統(tǒng)中兩相間的分配系數(shù)不同，分配系數(shù)小的溶質(zhì)在流動相中分配的數(shù)量少，移動的速率慢，所以各種溶質(zhì)在層析過程中由于移動的速率不同便可以彼此分開。

編輯推薦

《生物化學(xué)實驗指導(dǎo)》適合高等院校相關(guān)學(xué)科的本科生和研究生使用。由科學(xué)出版社出版。

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