生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程

前言

進(jìn)入21世紀(jì)以來，生物化學(xué)及分子生物學(xué)領(lǐng)域發(fā)展迅速，新進(jìn)展層出不窮，例如蛋白質(zhì)組系、RNA組系等新技術(shù)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，而它們的基礎(chǔ)技術(shù)，仍離不開核酸、蛋白質(zhì)以及糖類、脂類的研究方法。岡此，為了跟上時(shí)代發(fā)展的步伐，極有必要對(duì)本教材修訂再版?！渡锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》作為高等醫(yī)藥院校主干課必修課程生物化學(xué)與分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教材，在各兄弟院校的支持下已走過了四個(gè)多年頭，為了跟上學(xué)科發(fā)展的需要，也結(jié)合我們參加兩次教學(xué)評(píng)估（2002年，2007年）的經(jīng)驗(yàn)，遵科學(xué)出版社意見，我們對(duì)教材進(jìn)行了適當(dāng)修訂，主要是增補(bǔ)了微量移液器使用和離心機(jī)原理等，特別對(duì)綜合性創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)部分作了修訂增加。但考慮到各兄弟院校沿用習(xí)慣，對(duì)總體框架和主要內(nèi)容均未作變動(dòng)。本教材修訂再版中得到科學(xué)出版社鼓勵(lì)支持，參編單位蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)系、南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室及江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院生物化學(xué)教研室編寫教師的認(rèn)真參與，特別是增補(bǔ)修訂部分，均由從美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院進(jìn)修歸來的徐嵐老師主持定稿，在此一并致謝。希望各位同仁應(yīng)用后多提寶貴意見，以待再版時(shí)改正。

內(nèi)容概要

　　《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》內(nèi)容包括總論和各論，總論介紹生物化學(xué)的基本操作技術(shù)，當(dāng)前生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究常用的電泳、層析、離心分離、印跡技術(shù)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)的原理、種類、應(yīng)用和前沿；各論共有40個(gè)實(shí)驗(yàn)，其中蛋白質(zhì)與核酸、酶學(xué)、糖、脂和生物氧化部分的實(shí)驗(yàn)是比較成熟的生物化學(xué)基本實(shí)驗(yàn)；核酸部分的實(shí)驗(yàn)主要是分子生物學(xué)常用技術(shù)的實(shí)驗(yàn)，是近幾年在研究生實(shí)驗(yàn)課中開設(shè)并有部分實(shí)驗(yàn)選用到本科生實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的；最后部分有8個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)，在基本技能訓(xùn)練的基礎(chǔ)上，對(duì)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和科研入門訓(xùn)練。

書籍目錄

第1篇 總論實(shí)驗(yàn)須知第1章 基本操作技術(shù)第1節(jié) 玻璃器皿的清洗第2節(jié) 吸量管的種類和使用第3節(jié) 溶液的混勻、過濾及離心第4節(jié) 實(shí)驗(yàn)樣品的制備第5節(jié) 分光光度法第2章 電泳技術(shù)第1節(jié) 電泳的基本原理第2節(jié) 影響電泳的主要因素第3節(jié) 區(qū)帶電泳的分類第4節(jié) 幾種常見的電泳方法第5節(jié) 二維電泳第3章 層析技術(shù)第1節(jié) 層析技術(shù)的分類第2節(jié) 層析中的常用術(shù)語第3節(jié) 紙層析第4節(jié) 薄層層析第5節(jié) 離子交換層析第6節(jié) 凝膠層析第7節(jié) 親和層析第4章 離心分離技術(shù)第1節(jié) 離心分離技術(shù)的原理第2節(jié) 離心機(jī)的分類與特點(diǎn)第5章 印跡技術(shù)第1節(jié) Southern印跡第2節(jié) Northern印跡第3節(jié) 斑點(diǎn)雜交第4節(jié) Western印跡第6章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)第1節(jié) PCR技術(shù)概述第2節(jié) PCR技術(shù)的基本原理第3節(jié) PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化第4節(jié) PCR技術(shù)的擴(kuò)展第5節(jié) PCR中應(yīng)注意的問題第6節(jié) PCR在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第2篇 各論第7章 蛋白質(zhì)與氨基酸實(shí)驗(yàn)1 蛋白質(zhì)含量的測定實(shí)驗(yàn)2 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳定量測定實(shí)驗(yàn)3 凝膠層析法分離血紅蛋白和DNP-魚精蛋白（或DNP-酪蛋白）實(shí)驗(yàn)4 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量實(shí)驗(yàn)5 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)6 酪蛋白等電點(diǎn)的測定實(shí)驗(yàn)7 氨基酸的薄層層析實(shí)驗(yàn)8 DNS-氨基酸聚酰胺薄膜雙向?qū)游龅?章 酶學(xué)實(shí)驗(yàn)9 影響酶活性的因素實(shí)驗(yàn)10 蔗糖酶的專一性實(shí)驗(yàn)11 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性的測定實(shí)驗(yàn)12 乳酸脫氫酶同工酶的分離實(shí)驗(yàn)13 轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)實(shí)驗(yàn)14 琥珀酸脫氫酶的作用及競爭性抑制實(shí)驗(yàn)15 米氏常數(shù)的測定第9章 糖、脂和生物氧化實(shí)驗(yàn)16 饑餓和飽食對(duì)肝糖原含量的影響實(shí)驗(yàn)17 脂蛋白的分離和提純實(shí)驗(yàn)18 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)19 血清三酰甘油測定實(shí)驗(yàn)20 高密度脂蛋白中膽固醇含量測定實(shí)驗(yàn)21 血清總膽固醇含量測定實(shí)驗(yàn)22 乳酸測定實(shí)驗(yàn)23 血中葡萄糖含量的測定第10章 核酸實(shí)驗(yàn)24 細(xì)胞核的分離和純化實(shí)驗(yàn)25 核酸含量的測定實(shí)驗(yàn)26 酵母RNA的提取及組分鑒定實(shí)驗(yàn)27 真核細(xì)胞基因組DNA的制備與定量實(shí)驗(yàn)28 DNA的限制性酶切反應(yīng)實(shí)驗(yàn)29 Southern印跡實(shí)驗(yàn)30 Northern印跡實(shí)驗(yàn)31 PCR擴(kuò)增技術(shù)實(shí)驗(yàn)32 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)第11章 綜合性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)33 家兔免疫血清γ-球蛋白的分離與純度鑒定實(shí)驗(yàn)34 蛋白質(zhì)的分離、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳圾Western印跡實(shí)驗(yàn)35 脂蛋白的分離、提純和電泳鑒定實(shí)驗(yàn)36 大腸埃希菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及質(zhì)粒DNA分子導(dǎo)人原核細(xì)胞、提取、純化鑒定實(shí)驗(yàn)37 堿性磷酸酶的提取、比活性及km值的測定實(shí)驗(yàn)38 RT-PCR實(shí)驗(yàn)39 細(xì)菌雙雜交質(zhì)粒DNA的提取、純化及鑒定實(shí)驗(yàn)40 apoE基因多態(tài)性分析主要參考資料附錄

章節(jié)摘錄

插圖：第1章　基本操作技術(shù)第1節(jié)　玻璃器皿的清洗生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用各種玻璃器皿，其清潔程度直接影響測量樣品的可靠性和反應(yīng)的準(zhǔn)確性。因此玻璃器皿的清潔不僅是實(shí)驗(yàn)前后的常規(guī)工作，而且是一項(xiàng)重要的基本技術(shù)。玻璃器皿的清洗方法很多，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求以及污物性質(zhì)，選用不同的方法。洗滌的玻璃器皿要求清潔透明，玻璃表面不含可溶解的物質(zhì)，水沿器壁自然下流時(shí)不掛水珠。一、新購器皿的清洗新購器皿表面附著油污和灰塵，特別是附著可游離的金屬離子。因此，新購器皿需要用肥皂水刷洗，流水沖凈后，浸于0.93mol/L Na2CO3溶液中煮沸。用流水沖凈后，再浸泡于0.3-0.6mol/L HCI溶液中過夜。流水洗凈酸液，用蒸餾水少量多次蕩洗后，干燥備用。二、用過玻璃器皿的清洗1.一般非計(jì)量玻璃器皿或粗容量器皿（如試管、燒杯、量筒等）先用肥皂水刷洗，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水蕩洗2～3次后，倒置于清潔處晾干。2.容量分析器皿（如吸量管、滴定管、容量瓶等）先用自來水沖洗，晾干后浸于鉻酸洗液中浸泡數(shù)小時(shí)，然后用自來水和蒸餾水沖洗干凈并干燥備用。3.比色杯用畢立即用自來水反復(fù)沖洗，如有污物黏附于杯壁，宜用鹽酸或適當(dāng)溶劑清洗。然后用自來水、蒸餾水沖洗干凈。切忌用刷子、粗糙的布或?yàn)V紙等擦拭。洗凈后，倒置晾干備用。

編輯推薦

《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》語言簡練，實(shí)用性強(qiáng)。不僅適合醫(yī)學(xué)院校5年制、7年制及8年制學(xué)生使用，也適合相關(guān)人員參考。

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