酵母遺傳學(xué)方法實(shí)驗(yàn)指南

前言

　　酵母菌是一種單細(xì)胞真核生物。它既有一切真核細(xì)胞生命活動(dòng)最基本的重要特征，又有實(shí)驗(yàn)微生物所具備的背景清楚、生長迅速、易于操作等許多優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)今遺傳學(xué)、生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)中的許多規(guī)律性認(rèn)識(shí)都是以酵母為研究材料得出的。酵母菌是世界上首個(gè)被測(cè)出基因組DNA全序列的真核生物，在其6607個(gè)可讀框（ORF）中已有4752個(gè)得到了證實(shí)，其中許多是與細(xì)胞基本生命活動(dòng)密切相關(guān)的重要基因，在結(jié)構(gòu)與功能方面與高等真核生物有很強(qiáng)的進(jìn)化保守性。至今已發(fā)現(xiàn)有約300種蛋白質(zhì)在人與酵母中是同等功能的，其中許多與人類疾病相關(guān)蛋白是類似的。因此，以酵母為模型研究高等真核生物的重要生理功能和疾病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)理，以及尋找藥物作用靶點(diǎn)等都有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。此外，基于酵母菌研究的模式生物技術(shù)（如基因敲除、基因功能補(bǔ)償和酵母雙雜交技術(shù)等）在生命科學(xué)的研究中，尤其是在后基因組時(shí)代對(duì)基因功能的研究中，得到了廣泛的應(yīng)用。隨著當(dāng)代生命科學(xué)的發(fā)展，酵母菌作為一種模式生物的實(shí)用性和高效性在科研實(shí)踐中得到了充分體現(xiàn)?！　∶绹淙蹖?shí)驗(yàn)室（Cold Spring Harbor Laboratory）被稱為世界生命科學(xué)的圣地與分子生物學(xué)的搖籃，為全球影響最大的十大研究機(jī)構(gòu)之一}同時(shí)，冷泉港實(shí)驗(yàn)室還是國際生命科學(xué)的會(huì)議中心與培訓(xùn)基地，經(jīng)過這里培訓(xùn)的優(yōu)秀科學(xué)家如今已遍布全球各地?！督湍高z傳學(xué)方法實(shí)驗(yàn)指南》就是冷泉港實(shí)驗(yàn)室組織該領(lǐng)域知名學(xué)者合編的一本培訓(xùn)教程，迄今已有47年的歷史，其問已更新再版多次，以及時(shí)適應(yīng)這個(gè)領(lǐng)域的最新進(jìn)展。本教程最大的特點(diǎn)在于其權(quán)威性、全面性和可操作性，它將酵母經(jīng)典遺傳學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理與操作方法都做了詳盡的介紹。因此，無論對(duì)于專業(yè)科研人員還是初學(xué)者，都是一本不可多得的必備參考書?！　⑴c本書翻譯的人員主要是正在從事酵母遺傳學(xué)和分子生物學(xué)工作的研究生和博士后，由于譯者的翻譯水平有限，譯文中難免存在錯(cuò)誤和不妥之處，敬請(qǐng)讀者批評(píng)指正。

內(nèi)容概要

本書作為冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社的經(jīng)典酵母實(shí)驗(yàn)教程的第二版，收錄了酵母研究中最常用的減數(shù)分裂作圖、轉(zhuǎn)化、基因置換等11個(gè)實(shí)驗(yàn)，以及酵母蛋白抽提、活體染色、RNA分離等28種技術(shù)方法。文字簡潔明了，內(nèi)容全面而詳細(xì)，兼顧經(jīng)典和前沿，是該領(lǐng)域的權(quán)威之作。    適合于大學(xué)院校、科研單位的教師、學(xué)生及研究人員作為實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書，亦可供從事酵母相關(guān)生物制品行業(yè)的科技人員參考。

書籍目錄

譯者序原著序前言遺傳學(xué)命名法實(shí)驗(yàn)篇  實(shí)驗(yàn)一  酵母細(xì)胞的觀察  實(shí)驗(yàn)二  營養(yǎng)缺陷型、溫度敏感型和滲透壓敏感型突變株的分離和鑒別  實(shí)驗(yàn)三  減數(shù)分裂作圖  實(shí)驗(yàn)四  有絲分裂重組和隨機(jī)孢子分析  實(shí)驗(yàn)五  酵母轉(zhuǎn)化  實(shí)驗(yàn)六  合成致死突變體  實(shí)驗(yàn)七  基因置換  實(shí)驗(yàn)八  ras2抑制基因的分離  實(shí)驗(yàn)九  細(xì)胞型操作  實(shí)驗(yàn)十  用插入誘變法分離突變體  實(shí)驗(yàn)十一  利用雙雜交差異互作篩選以分離功能突變體技術(shù)和方案篇  技術(shù)和方案1  酵母的高效轉(zhuǎn)化  技術(shù)和方案2  快速粗放的酵母菌落質(zhì)粒轉(zhuǎn)化法  技術(shù)和方案3  酵母DNA分離  技術(shù)和方案4  酵母蛋白質(zhì)的抽提  技術(shù)和方案5  TAP純化方法  技術(shù)和方案6  酵母RNA的分離  技術(shù)和方案7  質(zhì)粒DNA的羥胺突變  技術(shù)和方案8  酵母β-半乳糖苷酶的測(cè)定  技術(shù)和方案9  羧肽酶Y的平板鑒定  技術(shù)和方案10  隨機(jī)孢子分析  技術(shù)和方案11  酵母活細(xì)胞染色  技術(shù)和方案12  酵母免疫熒光法  技術(shù)和方案13  已固定細(xì)胞的肌動(dòng)蛋白染色  技術(shù)和方案14  PCR介導(dǎo)基因破壞法  技術(shù)和方案15  酵母菌落PCR  技術(shù)和方案16  分光光度法測(cè)酵母細(xì)胞密度  技術(shù)和方案17  細(xì)胞同步化  技術(shù)和方案18  染色質(zhì)免疫沉淀  技術(shù)和方案19  酵母DNA流式細(xì)胞記數(shù)  技術(shù)和方案20  對(duì)數(shù)生長  技術(shù)和方案21  EMS誘變  技術(shù)和方案22  四分體解剖  技術(shù)和方案23  制備四分體解剖針  技術(shù)和方案24  挑取合子  技術(shù)和方案25  測(cè)定鋪板效率  技術(shù)和方案26  小量提取E.coli DNA  技術(shù)和方案27  E.coli感受態(tài)的制備與轉(zhuǎn)化  技術(shù)和方案28  系統(tǒng)缺失菌株的保存及操作附錄A  培養(yǎng)基附錄B  菌株保存附錄C  酵母遺傳圖譜和物理圖譜附錄D  平板劃線模板附錄E  菌株核型分析電泳的Southern印跡作圖附錄F  菌株附錄G  用標(biāo)準(zhǔn)血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)附錄H  四分孢子計(jì)分表

編輯推薦

　　美國冷泉港實(shí)驗(yàn)室被稱為世界生命科學(xué)的圣地與分子生物學(xué)的搖籃，為全球影響最大的十大研究機(jī)構(gòu)之一。《酵母遺傳學(xué)方法實(shí)驗(yàn)指南》就是冷泉港實(shí)驗(yàn)室組織該領(lǐng)域知名學(xué)者合編的一本培訓(xùn)教程，迄今已有47年的歷史，其間已更新再版多次，以及時(shí)適應(yīng)這個(gè)領(lǐng)域的最新進(jìn)展。本教程最大的特點(diǎn)在于其權(quán)威性、全面性和可操作性，它將酵母經(jīng)典遺傳學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理與操作方法都做了詳盡的介紹。因此，無論對(duì)于專業(yè)科研人員還是初學(xué)者，都是一本不可多得的必備參考書。

圖書封面

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