分子克隆實驗指南(套裝上下冊)

出版時間:2002-8  出版社:科學出版社  作者:J.薩姆布魯克  頁數(shù):1949  譯者:黃培堂  
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前言

  《分子克隆實驗指南》第一版寫于約20年前,當時分子克隆的基本方法遠未成熟,僅在少數(shù)幾個實驗室建立了起來?!斗肿涌寺嶒炛改稀返某霭娲蟠蟾淖兞诉@種局面,其指南性的特點使20世紀70年代后期和80年代早期對這些技術(shù)仍感到陌生的讀者獲得了信心。本書第二版于第一版出版后的第7年出版,通俗易懂,內(nèi)容更豐富。此時,個別方法日益通用和簡化,但是在多步驟的實驗環(huán)節(jié)中仍然難以把它們成功地串在一起。作為第二版的修訂本,第三版反映出的是一種成熟的操作規(guī)程,可靠性高,十分有利于科技人員的使用操作。在20世紀90年代,為滿足科技人員的要求許多枯燥且重復性強的分子生物學技術(shù)已經(jīng)實現(xiàn)自動化了。為滿足科技人員的要求,多步驟的實驗環(huán)節(jié)已被轉(zhuǎn)換成試劑盒?,F(xiàn)在很容易從商業(yè)制造商那里買到高質(zhì)量的基因組和cDNA文庫。而且包括核酸在內(nèi)的所有手工操作也極大地受益于試劑和酶的質(zhì)量的提高。伴隨著這些進步及其他方面的發(fā)展,合格的實驗室工作者現(xiàn)在能夠輕易避免許多實驗方面的問題,而這些問題在幾年前還曾困擾著最熟練的研究人員。并非表明每一細節(jié)都盡善盡美,也不是說技術(shù)不可能有進一步的發(fā)展了。然而,現(xiàn)在通過認真仔細地實驗設(shè)計并應(yīng)用已有知識,比反復試驗?zāi)軌蚋菀椎乇苊饫щy?!  斗肿涌寺嶒炛改稀匪邪姹镜闹饕康木褪墙o科研人員提供最新的重復性好的技術(shù)方法。前兩版的使用者將會發(fā)現(xiàn)本版實驗部分具有組織良好的特征。不僅如此。本版內(nèi)容更為全面而詳盡。老方法被現(xiàn)代化了,而新的方法也被增加進來,從而使分子克隆技術(shù)幾乎滲透到生物醫(yī)學研究的絕大多數(shù)領(lǐng)域。同樣重要的是我們希望提供合理的依據(jù),證明在可供選擇的程序中,特定方法為什么及如何起作用。因此這個版本不僅包含了對于實驗方法中要點的說明,還將豐富的材料以信息欄的形式列示出來,放在每章的末尾和附錄9中。我們希望貫穿在本書中的115個信息欄可以對為什么某些技術(shù)方法中要用某些方式,以及某些技術(shù)怎樣逐步發(fā)展等問題予以清晰的說明。最后,我們提供了豐富的參考文獻,以便感興趣的讀者可以對這些方法和觀點追根求源。很少有人會從頭到尾讀這本書,但我們希望對于分子克隆感興趣的人員將會從這些書頁中找到許多有助于他們思考和有助于他們手頭工作的內(nèi)容。

內(nèi)容概要

本書在第三版中,作者對圖書內(nèi)容進行了完全的升級,修訂了實驗的每條方案,增加了大量新的材料,拓寬了它涉及的領(lǐng)域,內(nèi)容豐富而詳細。使其具有用于學習遺傳學、分子細胞生物學、發(fā)育生物學、微生物學、神經(jīng)科學和免疫學等學科的重要指導和參考價值。 本書可供生物學、醫(yī)藥衛(wèi)生,以及農(nóng)、林、牧等方面有關(guān)的科研、教學與技術(shù)人員參考。

書籍目錄

中譯本序譯者的話   第三版前言 上冊   第1章 質(zhì)粒及其在分子克隆中的應(yīng)用   第2章 λ噬菌體及其載體   第3章 M13噬菌體載體   第4章 高容量載體的應(yīng)用   第5章 DNA凝膠電泳和脈沖場瓊脂糖凝膠電泳   第6章 真核基因組DNA的制備和分析   第7章 真核細胞mRNA的提取、純化和分析   第8章 聚合酶鏈式反應(yīng)體外擴增DNA   第9章 放射性標記DNA探針與RNA探針的制備   第10章 合成寡核苷酸探針   第11章 cDNA文庫制備及其基因鑒定 下冊   第12章 DNA測序   第13章 誘變   第14章 表達文庫的篩選   第15章 在大腸桿菌中表達克隆化基因   第16章 哺乳動物培養(yǎng)細胞中導入克隆化基因   第17章 哺乳動物培養(yǎng)細胞的基因表達分析   第18章 蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)附錄  附錄1 分子克隆中使用的緩沖液和試劑的配制  附錄2 培養(yǎng)基  附錄3 載體和細菌菌株  附錄4 分子克隆所用的酶  附錄5 酶的抑制物  附錄6 核酸  附錄7 密碼子和氨基酸  附錄8 分子克隆中的常用技術(shù)  附錄9 檢測系統(tǒng)  附錄10 DNA陣列技術(shù)  附錄11 生物信息學  附錄12 告誡  附錄13 供應(yīng)商  附錄14 商標 索引 編輯致謝

章節(jié)摘錄

  傳統(tǒng)的高拷貝數(shù)質(zhì)粒載體攜帶有各種colEl復制子;相反地,低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體帶有如R1之類的復制子,因而只能在非常嚴謹?shù)臈l件下維持質(zhì)粒I)NA的合成?! 〉谝淮牡涂截愝d體,按今天的標準而言可算是相當巨大而粗糙,它們曾被用來解決特定的外源基因和DNA序列克隆到質(zhì)粒中后出現(xiàn)的毒性問題。編碼膜蛋白和DNA結(jié)合蛋白的許多基因?qū)儆诖祟?,某些啟動子和調(diào)節(jié)序列也是如此(參見Fill et a1。1979;HIansen and vorl Meyenberg 1979;Little 1979;Murray and Kelley 1979;Beck andBremer 1980;Claverie。Martin et a1。1989)。有時這些I)NA序列和基因產(chǎn)物對宿主菌的毒性太大,以至于用高拷貝數(shù)的載體分離轉(zhuǎn)化的菌株簡直是不可能的。即使獲得了轉(zhuǎn)化子,它們的生長速率通常極低,克隆化的外源I)NA序列也不穩(wěn)定。為解決這類問題,已經(jīng)建立了多用途的低拷貝數(shù)載體,它們不僅帶有受到嚴格調(diào)控的原核啟動子,僅維持低水平本底表達(如pET系列載體),而且攜有防止外源DNA序列從上游質(zhì)粒啟動子過多轉(zhuǎn)錄的原核轉(zhuǎn)錄終止子?,F(xiàn)在這些低拷貝數(shù)的載體被添上了多克隆位點、單鏈噬菌體的復制起點、T3和T7的啟動子和其他有用的調(diào)節(jié)子?,F(xiàn)有的多數(shù)低拷貝數(shù)載體也攜帶par基因座,它在細胞分裂過程中促進質(zhì)粒分子在子細胞中的精確分配?! ?hellip;…

編輯推薦

  《分子克隆實驗指南(上下)(第3版)》可供生物學、醫(yī)藥衛(wèi)生,以及農(nóng)、林、牧等方面有關(guān)的科研、教學與技術(shù)人員參考。

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用戶評論 (總計107條)

 
 

  •   分子生物學專業(yè)教師、研究生的經(jīng)典參考書,實驗必備工具書。
  •   分子克隆實驗指南用書質(zhì)量好,值得買 值得讀
  •   分子生物學的圣經(jīng),工具書,內(nèi)容全面,實用
  •   這書很詳細 老早就想買一本 之前借的學校圖書館 在分子克隆方面可以說是相當于漢語新華字典 質(zhì)量也很好 絕對正版 做分子不可缺少的工具書
  •   分子生物學實驗的寶典
  •   購買此書的都知道——分子生物學實驗的金標準,而且價格相當?shù)暮竦馈?/li>
  •   此書是分子生物學實驗用書的經(jīng)典,,值得擁有。
  •   分子生物學實驗的紅寶書,一定要買,不錯,頂
  •   很喜歡,是分子生物學方面必備的書。當當發(fā)貨很快的
  •   分子生物學實驗室必備。很贊
  •   經(jīng)典著作,分子克隆工作者必備,非常不錯,建議購買!
  •   還沒來得及看,因為很多做分子生物學的都把它當做指導書,只要是正版的肯定沒問題。
  •   很經(jīng)典的書,分子生物學的寶典
  •   是做分子克隆不可或缺的一套好書
  •   分子克隆的經(jīng)典好書,很好很好
  •   書是正版,質(zhì)量好。好書了,分子克隆講的很全面細致
  •   不愧為分子實驗中的圣經(jīng)。
  •   被譽為分子實驗室的“圣經(jīng)”,果然名不虛傳,很厚,相當于工具書了,很好。
  •   是因為要接觸分子生物實驗,在丁香園上,網(wǎng)友推薦才買來一看,因為手頭相關(guān)的書籍不是很多。現(xiàn)在雖然換做臨床實驗,但有本生物分子實驗書籍,有疑問的時候可以隨時翻閱一下還是很不錯的。但很多在書上還是不能找到答案,就需要上網(wǎng)查了。這本書是比較偏基礎(chǔ),純屬個人意見。
  •   經(jīng)典書,分子生物實驗必看!
  •   不愧是生物學中的圣經(jīng)\(^o^)/~
  •   非常經(jīng)典的分子生物基本書,特別是附錄齊全,內(nèi)容明確清楚。分子生物實驗室必備書籍。
  •   速度快,兩天就到了,書本質(zhì)量好,跟在圖書館借的第三版第一次印刷本比較了下,除了書本的封面有點改變以外,內(nèi)容是一致的。對第一次在當當網(wǎng)上所購圖書本人非常滿意~!
  •   這本書真的很好,100多塊錢感覺超值!而且相比我買的下面那本分子生物學,不管是價格質(zhì)量包裝都好狠多
  •   工作需要,買了一套做工具書。內(nèi)容豐富充實,實用性強。非常具有參考價值!
  •   很好的工具書,在實驗過程中需要參考
  •   以前看第一版感覺就很好,買第三版希望對工作有所幫助
  •   以前我們有第二版,書已經(jīng)翻爛了。決定買第三版,書的質(zhì)量還不錯
  •   很好很實用的實驗指南!
  •   內(nèi)容詳細,翻譯得當,是實驗用書的好指導
  •   書的內(nèi)容很多,很喜歡!希望能在實驗方面有所指導和幫助!?。。。。。。。。。。。。?!
  •   不錯的實驗圣經(jīng)
  •   這本書是做基礎(chǔ)必備的實驗之王。
  •   做實驗必備。經(jīng)典書籍。
  •   質(zhì)量很好,實驗必備用書,不愧是經(jīng)典!
  •   實驗必備用書啊,冷泉港實驗室就是牛逼。
  •   冷泉港實驗室的經(jīng)典之作
    詳細的實驗流程
    獨一無二的經(jīng)典
  •   這是套經(jīng)典著作,做生命科學研究的應(yīng)該人手一本。
  •   沒辦法,要做實驗,要查溶液配比,少它不行啊。
  •   對于實驗入門者,實用,但是有些說得和自己實驗室情況結(jié)合不是很緊咯
  •   這是實驗金標準
  •   書是老公挑著買的。對于做實驗很有幫助。推薦給大家。
  •   很權(quán)威實用全面的實驗指導書
  •   為實驗室買的。屬于比較實用的書。很多技術(shù)還是具有指導意義的。
  •   我從當當網(wǎng)購物已有多次了,主要是圖書,感覺它的圖書比較全,價格較低,送貨基本在2天,書籍是正版的,服務(wù)很令人滿意!
  •   給學生上課用的,很不錯,內(nèi)容很全,質(zhì)量也不錯,滿意!
  •   書還可以,內(nèi)容不錯,但是到底是一冊124元還是上下冊共124元,我只收到上冊,很奇怪!
  •   書的質(zhì)量還不錯,內(nèi)容很詳細。
  •   書本內(nèi)容豐富,服務(wù)質(zhì)量較好
  •   是正版,比書店便宜。工具書。
  •   換新的封皮了,挺清爽的,內(nèi)容不多說的,實用第一。
  •   幫朋友買的,內(nèi)容很新,印刷質(zhì)量也不錯!
  •   圖書質(zhì)量很好,很值得推薦的一本書。
  •   內(nèi)容很多,要在實踐中檢驗
  •   我是看了電影之后有興趣看看這本書的,書中的人物形象比電影里更豐滿,如果在西安生活過,就會更有感觸
  •   只發(fā)了一冊,我給退了,書是好書
  •   確實很實用指導我前進
  •   封面有點臟,不過內(nèi)容好就行了,還是很不錯的參考書
  •   內(nèi)容很細,講的很清楚,相當不錯
  •   內(nèi)容就不說了 學這專業(yè)的都知道 價錢比書店的便宜 不錯
  •   整體感覺很不錯,內(nèi)容全面實用。送貨速度挺快,2天內(nèi)就到了。
  •   對我們的工作有非常重要的作用
  •   本實驗室有一套,這一套是給新開的實驗室買的
  •   書質(zhì)量很好,而且還是新的封面,看起來、摸起來都舒服,嘿嘿。
  •   當當網(wǎng)的客服還是不錯的,送過來時還用一個紙箱包著,書很新很完整,就是送貨時間太長了,等了一星期
  •   還沒有看,希望有大用,好好學習
  •   學習用的,好好學習,天天向上
  •   不錯,正在學習!
  •   這本書就不用多說了,正版質(zhì)量很好
  •   買的送給朋友的,她在香港,點名要這本書
  •   對于學醫(yī)的來說,這本書非常好。
  •   本書貨真價實,對我們工作有很大幫助。
  •   這本書挺好的,質(zhì)量也不錯。值得購買。
  •   不錯,就是太厚了,只適合在家里看,不適合拿到其它地方去,因為實在大重了,快遞都不樂意給我送上樓。
  •   為客戶買的,快遞非常給力。上午訂的,下午就送到了。
  •   送貨速度較快,書籍質(zhì)量不錯
  •   北京買不了,只好寄到朋友那里,真夠費勁的,希望以后區(qū)域購買的能夠提示哪里可以購買
  •   好好好好好~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~`
  •   物美價廉,很實用。還是當當網(wǎng)買書好。
  •   這本書對自己的工作幫助很大
  •   一直想買!終于盼到降價了!我從網(wǎng)上看到第四版的英文版已經(jīng)出版了,如果不急著用的話可以等,估計中文版一年后就會出版。
  •   慢慢看,有需要用的知識就查一下
  •   很實用,是寶典
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  •   書是正版,很好,很實用。
  •   書不錯,但是我要的發(fā)票未一起快遞。
  •   很經(jīng)典,就是好厚!
  •   給實驗室的 反饋很好
  •   經(jīng)典倆字足以概括
  •   好是好。有些難,呵呵,看不太懂。和想的不太一樣。不通俗
  •   對于研究生來說很實用
  •   書很好,送貨很快!
  •   期待很久了,絕對的經(jīng)典啊
  •   挺厚重的,翻了一下,感覺應(yīng)該是正版,正是我需要的。哈哈
  •   印刷不錯,價錢比書店可便宜不少
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