分子克隆實(shí)驗(yàn)指南（套裝上下冊(cè)）

出版時(shí)間：2002-8 出版社：科學(xué)出版社作者：J.薩姆布魯克頁(yè)數(shù)：1949 譯者：黃培堂
Tag標(biāo)簽：無(wú)

前言

　　《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》第一版寫(xiě)于約20年前，當(dāng)時(shí)分子克隆的基本方法遠(yuǎn)未成熟，僅在少數(shù)幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室建立了起來(lái)?！斗肿涌寺?shí)驗(yàn)指南》的出版大大改變了這種局面，其指南性的特點(diǎn)使20世紀(jì)70年代后期和80年代早期對(duì)這些技術(shù)仍感到陌生的讀者獲得了信心。本書(shū)第二版于第一版出版后的第7年出版，通俗易懂，內(nèi)容更豐富。此時(shí)，個(gè)別方法日益通用和簡(jiǎn)化，但是在多步驟的實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)中仍然難以把它們成功地串在一起。作為第二版的修訂本，第三版反映出的是一種成熟的操作規(guī)程，可靠性高，十分有利于科技人員的使用操作。在20世紀(jì)90年代，為滿足科技人員的要求許多枯燥且重復(fù)性強(qiáng)的分子生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化了。為滿足科技人員的要求，多步驟的實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)已被轉(zhuǎn)換成試劑盒?，F(xiàn)在很容易從商業(yè)制造商那里買到高質(zhì)量的基因組和cDNA文庫(kù)。而且包括核酸在內(nèi)的所有手工操作也極大地受益于試劑和酶的質(zhì)量的提高。伴隨著這些進(jìn)步及其他方面的發(fā)展，合格的實(shí)驗(yàn)室工作者現(xiàn)在能夠輕易避免許多實(shí)驗(yàn)方面的問(wèn)題，而這些問(wèn)題在幾年前還曾困擾著最熟練的研究人員。并非表明每一細(xì)節(jié)都盡善盡美，也不是說(shuō)技術(shù)不可能有進(jìn)一步的發(fā)展了。然而，現(xiàn)在通過(guò)認(rèn)真仔細(xì)地實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并應(yīng)用已有知識(shí)，比反復(fù)試驗(yàn)?zāi)軌蚋菀椎乇苊饫щy?！　　斗肿涌寺?shí)驗(yàn)指南》所有版本的主要目的就是給科研人員提供最新的重復(fù)性好的技術(shù)方法。前兩版的使用者將會(huì)發(fā)現(xiàn)本版實(shí)驗(yàn)部分具有組織良好的特征。不僅如此。本版內(nèi)容更為全面而詳盡。老方法被現(xiàn)代化了，而新的方法也被增加進(jìn)來(lái)，從而使分子克隆技術(shù)幾乎滲透到生物醫(yī)學(xué)研究的絕大多數(shù)領(lǐng)域。同樣重要的是我們希望提供合理的依據(jù)，證明在可供選擇的程序中，特定方法為什么及如何起作用。因此這個(gè)版本不僅包含了對(duì)于實(shí)驗(yàn)方法中要點(diǎn)的說(shuō)明，還將豐富的材料以信息欄的形式列示出來(lái)，放在每章的末尾和附錄9中。我們希望貫穿在本書(shū)中的115個(gè)信息欄可以對(duì)為什么某些技術(shù)方法中要用某些方式，以及某些技術(shù)怎樣逐步發(fā)展等問(wèn)題予以清晰的說(shuō)明。最后，我們提供了豐富的參考文獻(xiàn)，以便感興趣的讀者可以對(duì)這些方法和觀點(diǎn)追根求源。很少有人會(huì)從頭到尾讀這本書(shū)，但我們希望對(duì)于分子克隆感興趣的人員將會(huì)從這些書(shū)頁(yè)中找到許多有助于他們思考和有助于他們手頭工作的內(nèi)容。

內(nèi)容概要

本書(shū)在第三版中，作者對(duì)圖書(shū)內(nèi)容進(jìn)行了完全的升級(jí)，修訂了實(shí)驗(yàn)的每條方案，增加了大量新的材料，拓寬了它涉及的領(lǐng)域，內(nèi)容豐富而詳細(xì)。使其具有用于學(xué)習(xí)遺傳學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、微生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和免疫學(xué)等學(xué)科的重要指導(dǎo)和參考價(jià)值。 本書(shū)可供生物學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生，以及農(nóng)、林、牧等方面有關(guān)的科研、教學(xué)與技術(shù)人員參考。

書(shū)籍目錄

中譯本序譯者的話   第三版前言 上冊(cè)   第1章 質(zhì)粒及其在分子克隆中的應(yīng)用   第2章 λ噬菌體及其載體   第3章 M13噬菌體載體   第4章 高容量載體的應(yīng)用   第5章 DNA凝膠電泳和脈沖場(chǎng)瓊脂糖凝膠電泳   第6章 真核基因組DNA的制備和分析   第7章 真核細(xì)胞mRNA的提取、純化和分析   第8章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外擴(kuò)增DNA   第9章 放射性標(biāo)記DNA探針與RNA探針的制備   第10章 合成寡核苷酸探針   第11章 cDNA文庫(kù)制備及其基因鑒定 下冊(cè)   第12章 DNA測(cè)序   第13章 誘變   第14章 表達(dá)文庫(kù)的篩選   第15章 在大腸桿菌中表達(dá)克隆化基因   第16章 哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞中導(dǎo)入克隆化基因   第17章 哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞的基因表達(dá)分析   第18章 蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)附錄 　附錄1 分子克隆中使用的緩沖液和試劑的配制 　附錄2 培養(yǎng)基 　附錄3 載體和細(xì)菌菌株 　附錄4 分子克隆所用的酶 　附錄5 酶的抑制物 　附錄6 核酸 　附錄7 密碼子和氨基酸 　附錄8 分子克隆中的常用技術(shù) 　附錄9 檢測(cè)系統(tǒng) 　附錄10 DNA陣列技術(shù) 　附錄11 生物信息學(xué) 　附錄12 告誡 　附錄13 供應(yīng)商 　附錄14 商標(biāo) 索引 編輯致謝

章節(jié)摘錄

　　傳統(tǒng)的高拷貝數(shù)質(zhì)粒載體攜帶有各種colEl復(fù)制子；相反地，低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體帶有如R1之類的復(fù)制子，因而只能在非常嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臈l件下維持質(zhì)粒I）NA的合成?！　〉谝淮牡涂截愝d體，按今天的標(biāo)準(zhǔn)而言可算是相當(dāng)巨大而粗糙，它們?cè)挥脕?lái)解決特定的外源基因和DNA序列克隆到質(zhì)粒中后出現(xiàn)的毒性問(wèn)題。編碼膜蛋白和DNA結(jié)合蛋白的許多基因?qū)儆诖祟?，某些啟?dòng)子和調(diào)節(jié)序列也是如此（參見(jiàn)Fill et a1。1979；HIansen and vorl Meyenberg 1979；Little 1979；Murray and Kelley 1979；Beck andBremer 1980；Claverie。Martin et a1。1989）。有時(shí)這些I）NA序列和基因產(chǎn)物對(duì)宿主菌的毒性太大，以至于用高拷貝數(shù)的載體分離轉(zhuǎn)化的菌株簡(jiǎn)直是不可能的。即使獲得了轉(zhuǎn)化子，它們的生長(zhǎng)速率通常極低，克隆化的外源I）NA序列也不穩(wěn)定。為解決這類問(wèn)題，已經(jīng)建立了多用途的低拷貝數(shù)載體，它們不僅帶有受到嚴(yán)格調(diào)控的原核啟動(dòng)子，僅維持低水平本底表達(dá)（如pET系列載體），而且攜有防止外源DNA序列從上游質(zhì)粒啟動(dòng)子過(guò)多轉(zhuǎn)錄的原核轉(zhuǎn)錄終止子?，F(xiàn)在這些低拷貝數(shù)的載體被添上了多克隆位點(diǎn)、單鏈?zhǔn)删w的復(fù)制起點(diǎn)、T3和T7的啟動(dòng)子和其他有用的調(diào)節(jié)子。現(xiàn)有的多數(shù)低拷貝數(shù)載體也攜帶par基因座，它在細(xì)胞分裂過(guò)程中促進(jìn)質(zhì)粒分子在子細(xì)胞中的精確分配?！　?hellip;…

編輯推薦

　　《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南（上下）（第3版）》可供生物學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生，以及農(nóng)、林、牧等方面有關(guān)的科研、教學(xué)與技術(shù)人員參考。

圖書(shū)封面

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無(wú)

評(píng)論、評(píng)分、閱讀與下載

還沒(méi)讀過(guò)(28)
勉強(qiáng)可看(209)
一般般(356)
內(nèi)容豐富(1479)
強(qiáng)力推薦(121)

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用戶評(píng)論 (總計(jì)107條)

分子生物學(xué)專業(yè)教師、研究生的經(jīng)典參考書(shū)，實(shí)驗(yàn)必備工具書(shū)。
分子克隆實(shí)驗(yàn)指南用書(shū)質(zhì)量好，值得買值得讀
分子生物學(xué)的圣經(jīng)，工具書(shū)，內(nèi)容全面，實(shí)用
這書(shū)很詳細(xì) 老早就想買一本之前借的學(xué)校圖書(shū)館在分子克隆方面可以說(shuō)是相當(dāng)于漢語(yǔ)新華字典質(zhì)量也很好絕對(duì)正版做分子不可缺少的工具書(shū)
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的寶典
購(gòu)買此書(shū)的都知道——分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)，而且價(jià)格相當(dāng)?shù)暮竦馈?/li>
此書(shū)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)用書(shū)的經(jīng)典，，值得擁有。
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的紅寶書(shū)，一定要買，不錯(cuò)，頂
很喜歡，是分子生物學(xué)方面必備的書(shū)。當(dāng)當(dāng)發(fā)貨很快的
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室必備。很贊
經(jīng)典著作，分子克隆工作者必備，非常不錯(cuò)，建議購(gòu)買!
還沒(méi)來(lái)得及看，因?yàn)楹芏嘧龇肿由飳W(xué)的都把它當(dāng)做指導(dǎo)書(shū)，只要是正版的肯定沒(méi)問(wèn)題。
很經(jīng)典的書(shū)，分子生物學(xué)的寶典
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分子克隆的經(jīng)典好書(shū)，很好很好
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不愧為分子實(shí)驗(yàn)中的圣經(jīng)。
被譽(yù)為分子實(shí)驗(yàn)室的“圣經(jīng)”，果然名不虛傳，很厚，相當(dāng)于工具書(shū)了，很好。
是因?yàn)橐佑|分子生物實(shí)驗(yàn)，在丁香園上，網(wǎng)友推薦才買來(lái)一看，因?yàn)槭诸^相關(guān)的書(shū)籍不是很多。現(xiàn)在雖然換做臨床實(shí)驗(yàn)，但有本生物分子實(shí)驗(yàn)書(shū)籍，有疑問(wèn)的時(shí)候可以隨時(shí)翻閱一下還是很不錯(cuò)的。但很多在書(shū)上還是不能找到答案，就需要上網(wǎng)查了。這本書(shū)是比較偏基礎(chǔ)，純屬個(gè)人意見(jiàn)。
經(jīng)典書(shū)，分子生物實(shí)驗(yàn)必看！
不愧是生物學(xué)中的圣經(jīng)\(^o^)/~
非常經(jīng)典的分子生物基本書(shū)，特別是附錄齊全，內(nèi)容明確清楚。分子生物實(shí)驗(yàn)室必備書(shū)籍。
速度快，兩天就到了，書(shū)本質(zhì)量好，跟在圖書(shū)館借的第三版第一次印刷本比較了下，除了書(shū)本的封面有點(diǎn)改變以外，內(nèi)容是一致的。對(duì)第一次在當(dāng)當(dāng)網(wǎng)上所購(gòu)圖書(shū)本人非常滿意～！
這本書(shū)真的很好，100多塊錢感覺(jué)超值！而且相比我買的下面那本分子生物學(xué)，不管是價(jià)格質(zhì)量包裝都好狠多
工作需要，買了一套做工具書(shū)。內(nèi)容豐富充實(shí)，實(shí)用性強(qiáng)。非常具有參考價(jià)值！
很好的工具書(shū)，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要參考
以前看第一版感覺(jué)就很好，買第三版希望對(duì)工作有所幫助
以前我們有第二版，書(shū)已經(jīng)翻爛了。決定買第三版，書(shū)的質(zhì)量還不錯(cuò)
很好很實(shí)用的實(shí)驗(yàn)指南！
內(nèi)容詳細(xì)，翻譯得當(dāng)，是實(shí)驗(yàn)用書(shū)的好指導(dǎo)
書(shū)的內(nèi)容很多，很喜歡！希望能在實(shí)驗(yàn)方面有所指導(dǎo)和幫助?。。。。。。。。。。。。。。?/li>
不錯(cuò)的實(shí)驗(yàn)圣經(jīng)
這本書(shū)是做基礎(chǔ)必備的實(shí)驗(yàn)之王。
做實(shí)驗(yàn)必備。經(jīng)典書(shū)籍。
質(zhì)量很好，實(shí)驗(yàn)必備用書(shū)，不愧是經(jīng)典！
實(shí)驗(yàn)必備用書(shū)啊，冷泉港實(shí)驗(yàn)室就是牛逼。
冷泉港實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)典之作
詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)流程
獨(dú)一無(wú)二的經(jīng)典
這是套經(jīng)典著作，做生命科學(xué)研究的應(yīng)該人手一本。
沒(méi)辦法，要做實(shí)驗(yàn)，要查溶液配比，少它不行啊。
對(duì)于實(shí)驗(yàn)入門者，實(shí)用，但是有些說(shuō)得和自己實(shí)驗(yàn)室情況結(jié)合不是很緊咯
這是實(shí)驗(yàn)金標(biāo)準(zhǔn)
書(shū)是老公挑著買的。對(duì)于做實(shí)驗(yàn)很有幫助。推薦給大家。
很權(quán)威實(shí)用全面的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書(shū)
為實(shí)驗(yàn)室買的。屬于比較實(shí)用的書(shū)。很多技術(shù)還是具有指導(dǎo)意義的。
我從當(dāng)當(dāng)網(wǎng)購(gòu)物已有多次了，主要是圖書(shū)，感覺(jué)它的圖書(shū)比較全，價(jià)格較低，送貨基本在2天，書(shū)籍是正版的，服務(wù)很令人滿意！
給學(xué)生上課用的，很不錯(cuò)，內(nèi)容很全，質(zhì)量也不錯(cuò)，滿意！
書(shū)還可以，內(nèi)容不錯(cuò)，但是到底是一冊(cè)124元還是上下冊(cè)共124元，我只收到上冊(cè)，很奇怪！
書(shū)的質(zhì)量還不錯(cuò)，內(nèi)容很詳細(xì)。
書(shū)本內(nèi)容豐富，服務(wù)質(zhì)量較好
是正版，比書(shū)店便宜。工具書(shū)。
換新的封皮了，挺清爽的，內(nèi)容不多說(shuō)的，實(shí)用第一。
幫朋友買的，內(nèi)容很新，印刷質(zhì)量也不錯(cuò)！
圖書(shū)質(zhì)量很好，很值得推薦的一本書(shū)。
內(nèi)容很多，要在實(shí)踐中檢驗(yàn)
我是看了電影之后有興趣看看這本書(shū)的，書(shū)中的人物形象比電影里更豐滿，如果在西安生活過(guò)，就會(huì)更有感觸
只發(fā)了一冊(cè)，我給退了，書(shū)是好書(shū)
確實(shí)很實(shí)用指導(dǎo)我前進(jìn)
封面有點(diǎn)臟，不過(guò)內(nèi)容好就行了，還是很不錯(cuò)的參考書(shū)
內(nèi)容很細(xì)，講的很清楚，相當(dāng)不錯(cuò)
內(nèi)容就不說(shuō)了學(xué)這專業(yè)的都知道價(jià)錢比書(shū)店的便宜不錯(cuò)
整體感覺(jué)很不錯(cuò)，內(nèi)容全面實(shí)用。送貨速度挺快，2天內(nèi)就到了。
對(duì)我們的工作有非常重要的作用
本實(shí)驗(yàn)室有一套，這一套是給新開(kāi)的實(shí)驗(yàn)室買的
書(shū)質(zhì)量很好，而且還是新的封面，看起來(lái)、摸起來(lái)都舒服，嘿嘿。
當(dāng)當(dāng)網(wǎng)的客服還是不錯(cuò)的，送過(guò)來(lái)時(shí)還用一個(gè)紙箱包著，書(shū)很新很完整，就是送貨時(shí)間太長(zhǎng)了，等了一星期
還沒(méi)有看，希望有大用，好好學(xué)習(xí)
學(xué)習(xí)用的，好好學(xué)習(xí)，天天向上
不錯(cuò)，正在學(xué)習(xí)！
這本書(shū)就不用多說(shuō)了，正版質(zhì)量很好
買的送給朋友的，她在香港，點(diǎn)名要這本書(shū)
對(duì)于學(xué)醫(yī)的來(lái)說(shuō)，這本書(shū)非常好。
本書(shū)貨真價(jià)實(shí)，對(duì)我們工作有很大幫助。
這本書(shū)挺好的，質(zhì)量也不錯(cuò)。值得購(gòu)買。
不錯(cuò)，就是太厚了，只適合在家里看，不適合拿到其它地方去，因?yàn)閷?shí)在大重了，快遞都不樂(lè)意給我送上樓。
為客戶買的，快遞非常給力。上午訂的，下午就送到了。
送貨速度較快，書(shū)籍質(zhì)量不錯(cuò)
北京買不了，只好寄到朋友那里，真夠費(fèi)勁的，希望以后區(qū)域購(gòu)買的能夠提示哪里可以購(gòu)買
好好好好好~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~`
物美價(jià)廉，很實(shí)用。還是當(dāng)當(dāng)網(wǎng)買書(shū)好。
這本書(shū)對(duì)自己的工作幫助很大
一直想買！終于盼到降價(jià)了！我從網(wǎng)上看到第四版的英文版已經(jīng)出版了，如果不急著用的話可以等，估計(jì)中文版一年后就會(huì)出版。
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很實(shí)用，是寶典
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書(shū)不錯(cuò)，但是我要的發(fā)票未一起快遞。
很經(jīng)典，就是好厚！
給實(shí)驗(yàn)室的反饋很好
經(jīng)典倆字足以概括
好是好。有些難，呵呵，看不太懂。和想的不太一樣。不通俗
對(duì)于研究生來(lái)說(shuō)很實(shí)用
書(shū)很好，送貨很快！
期待很久了，絕對(duì)的經(jīng)典啊
挺厚重的，翻了一下，感覺(jué)應(yīng)該是正版，正是我需要的。哈哈
印刷不錯(cuò)，價(jià)錢比書(shū)店可便宜不少
非常經(jīng)典的書(shū)，推薦！
經(jīng)典書(shū)，好！
很厚，經(jīng)典，超值
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